蒲公英根提取物流化制粒的工藝研究

王麗娜,李 靜,王 丹,陳 爽,李 研,賈 皓 (.吉林醫藥學院藥學院，吉林 吉林 3203;2.海南醫學院基礎醫學與生命科學院，海南 ?？?570000)

蒲公英是中醫臨床常用的一味中藥，其味苦，性甘、寒，歸肝、胃經，具有清熱解毒、消腫等作用，常用于濕熱黃疸、目赤、肺癰、咽癰、熱淋澀痛等病癥。蒲公英根提取物可以抑制體內瘤塊生長,對慢性膽囊痙攣及結石癥有效,保護由乙醇引起的肝毒性反應[1]。

流化床制粒又稱一步制粒、沸騰制粒、流化噴霧制粒等，現階段已廣泛地應用于醫藥、保健食品等行業中[2]。本研究探究蒲公英根提取物流化床制粒的最佳工藝參數，以優化蒲公英根提取物制粒方法。

1 材料與儀器

1.1 材 料

蘆丁標準品(中國藥品生物制品檢定所，批號：183184)；蒲公英根提取物粉末；羧甲基纖維素鈉(天津市光復精細化工研究所)；可溶性淀粉(天津市永大化學試劑有限公司)；糊精(天津市瑞金特化學品有限公司。

1.2 儀 器

WBF多功能流化床(重慶英格造粒包衣技術有限公司)；紫外分析儀DV-1800(島津-GL消耗品銷售公司)；78X-2型片劑四用測定儀(上海黃海藥檢儀器有限)。

2 方法與結果

2.1 總黃酮含量的測定

精密量取4份供試品溶液各1.0 mL分別置于10 mL容量瓶中，取其中1份作為參比溶液，用70%乙醇將其定容至刻度線。其余3份分別加入4%亞硝酸鈉0.4mL溶液，蓋上蓋子搖勻，放置5 min;加10%的硝酸鋁溶液0.4 mL，蓋上蓋子搖勻，放置5 min;加1 mol/L氫氧化鈉溶液4 mL，最后用70%乙醇定容至刻度線，蓋上蓋子搖勻，放置16 min，再用紫外分光光度法于510 nm處測定其吸光度[3]。

2.2 單因素分析實驗

2.2.1黏合劑種類的考察

稱取5份蒲公英根提取物粉末各15 g放置于流化床制粒的容器中，分別噴入不同的黏合劑:蒸餾水、淀粉漿，糊精、羧甲基纖維素鈉、聚維酮進行制粒，其他工藝參數均相同，觀察制得顆粒效果。并分別將五種黏合劑制得的顆粒按照“2.1”的項下方法處理，在510 nm處測定總黃酮含量[4]。

綜合考慮制得顆粒效果和總黃酮含量。水作為黏合劑時制得的顆粒細粉多，大多不成顆粒；淀粉漿作為黏合劑時有大顆粒出現，顆粒大小不一；糊精作為黏合劑時制得的顆粒不均勻；羧甲基纖維素鈉作為黏合劑時制得的顆粒大小均勻，成品效果好；聚維酮作為黏合劑時顆粒大小不均，出現少量大顆粒。另外不同黏合劑種類會影響總黃酮的量，當使用羧甲基纖維素鈉作為黏合劑時，出現了總黃酮含量的最高值。因此選擇羧甲基纖維素鈉作為黏合劑做接下來的正交試驗較為合適。

2.2.2黏合劑濃度的考察

稱取5份蒲公英根提取物粉末15 g放置于流化床制粒的容器中，分別噴入黏合劑羧甲基纖維素鈉濃度依次為0.5%、1.0%、1.5%、2.0%和2.5%，進行制粒，其他工藝參數均相同，觀察制得顆粒效果。并分別將5種濃度黏合劑制得的顆粒按照“2.1”的項下方法處理，在510 nm處測定總黃酮含量。

綜合考慮制得顆粒效果和總黃酮含量。黏合劑為0.5%時制得的顆粒細粉多，多不成顆粒；黏合劑濃度為1.0%、1.5%和2.0%時制得顆粒效果較好；黏合劑濃度為2.5%時出現大顆粒。另外,黏合劑濃度為1.5%時總黃酮含量最高。因此選擇1.0%、1.5%和2.0%3個水平黏合劑濃度做正交試驗。

2.2.3進風量的考察

稱取5份蒲公英根提取物粉末各15g放置于流化床制粒的容器中，分別將進風量設為20、25、30、35、40 m3/h，其他工藝參數均相同，觀察制得顆粒效果。并分別將5種不同的進風量制得的顆粒按照“2.1”的項下方法處理，在510 nm處測定總黃酮含量[5]。

綜合考慮制得顆粒效果和總黃酮含量。進風量為20 m3/h時制得的顆粒出現塌床；進風量為25、30、35 m3/h時制得顆粒外觀較好；進風量為40 m3/h時制得的顆粒細粉多。另外,進風量為30 m3/h時總黃酮含量最高。因此在選擇25、30、35 m3/h 3個水平進風量做正交試驗。

2.2.4進風溫度的考察

稱取5份蒲公英根提取物粉末各15 g放置于流化床制粒的容器中，分別將進風溫度設為20、30、40、50、60 ℃，其他工藝參數均相同，觀察制得顆粒效果。并分別將5種不同的進風溫度制得的顆粒按照“2.1”的項下方法處理，在510 nm處測定總黃酮含量[6]。

綜合考慮制得顆粒效果和總黃酮含量。進風溫度為20和30 ℃時制得的顆粒出現塌床；進風溫度為40、50、60 ℃時制得顆粒外觀較好,大小均勻。因實驗室內的流化床制粒機最高溫度不能超過60 ℃。另外隨著進風溫度的升高，總黃酮含量逐漸升高，60 ℃時總黃酮含量最高。但40、50、60 ℃對總黃酮含量及外觀效果的影響并不大，因此選擇40、50、60 ℃ 3個水平進風溫度做正交試驗。

2.2.5霧化壓力的考察

稱取五份蒲公英根提取物粉末15 g放置于流化床制粒的容器中，分別將霧化壓力設為60、80、100、120、140 kPa，其他工藝參數均相同，觀察制得顆粒效果。并分別將5種不同的進風量制得的顆粒按照“2.1”的項下方法處理，在510 nm處測定總黃酮含量[7]。

綜合考慮制得顆粒效果和總黃酮含量。霧化壓力為60 kPa時形成大顆粒；霧化壓力為140 kPa時細分偏多；霧化壓力為80、100、120 kPa時制得的顆粒較好。另外霧化壓力為100 kPa時總黃酮含量最高，而且隨霧化壓力的增大并不成線性關系。因此在選擇80、100、120 kPa 3個水平霧化壓力做正交試驗。

2.3 正交試驗優化流化床制粒工藝

2.3.1因素水平的設定

根據單因素試驗的結果，以黏合劑的濃度、進風量、進風溫度、霧化壓力進行L9(34)4因素3水平的正交設計。見表1。

表 1 L9(34)正交試驗因素水平表

2.3.2正交試驗結果

以顆粒得率、顆粒水分和總黃酮含量為評價指標,各指標權重系數依次為0.4、0.3、0.3,采用綜合評分法進行數據分析。由表2和3結果分析，4個因素的影響程度的次序為黏合劑的濃度>進風量>進風溫度>霧化壓力。最佳方案為A1B2C2D2,即進風溫度為60 ℃，霧化壓力為100 kPa,黏合劑的濃度為1.5%，進風量為30 m3/h。

表 2 正交試驗結果直觀分析表

表 3 方差分析表

2.4 驗證實驗

準確稱取同一批供試品3份，分別按照最佳提取制粒工藝條件進行流化床制粒，平行操作。制得顆粒大小均勻，效果較好?？傸S酮含量RSD為0.29%，表明該方法所建立的方案效果較好，而且充分利用了藥材的有效成分。

3 討 論

流化床制粒技術操作簡便快捷，集混合、制粒、干燥于一體；可以節省黏合劑的用量和物料粉末的用量；污染小，符合GMP要求；所得顆粒圓整，外觀好；顆粒流動性好。在醫療和一些工業方面可廣泛使用，有良好的應用前景。通過正交試驗結果分析可知：黏合劑的濃度對蒲公英根的流化床制得的顆粒中總黃酮的含量影響最明顯。4個因素的影響程度強弱依次為黏合劑的濃度、進風量、進風溫度和霧化壓力。根據正交設計，選出最優的工藝參數：黏合劑為羧甲基纖維素鈉且濃度為1.5%，進風量為30 m3/h，進風溫度為 60 ℃，霧化壓力為100 kPa。且驗證試驗所得結果較好。所以正交優化設計可以較好地應用于蒲公英根提取物制粒的工藝研究進行篩選優化。

因對噴霧速度的大小沒有明確的規定與參考，噴霧速度過大時塌床現象較為嚴重，速度過小會對黏合劑及其他因素有干擾。所以要不斷調整噴霧速度以選擇合適的條件。實驗時嘗試用不同濃度的淀粉漿及糊精做黏合劑進行流化床制粒，制得顆粒效果差，淀粉漿由于黏度大，總有塌床現象，損耗嚴重。糊精作為黏合劑使用時物料粉末總是向流化床容器頂部飛，即使進風量調節的很低過濾袋外部仍有很多粉末。所以進行流化床制粒時應先了解物料的性質,選擇合適的黏合劑及噴霧速度，避免浪費。