三種方式聯合檢測在診斷結核性胸膜炎中的應用價值

天津市靜海區醫院（301600）張瑩

臨床對結核性胸膜炎的診斷仍然以聯合診斷結果為準，主要包括了解病史、體征檢查、X線表現、實驗室檢查及組織病理學。隨著分子生物學與免疫學的發展，多種新型技術開始應用于結核性胸膜炎的診斷中[1][2]。為明確胸腔積液腺苷脫氨酶（ADA）/血清ADA檢測、結核分枝桿菌/利福平耐藥基因檢測（Xpert MTB/RIF）及外周血結核分枝桿菌（MTB）感染T細胞斑點試驗（T-SPOT.TB）聯合檢測在診斷結核性胸膜炎中的應用價值[3][4]。本文對我院檢驗科2015年2月～2020年10月經多種方式聯合確診的65例結核性胸膜炎患者開展回顧性分析，均接受胸腔積液ADA/血清ADA檢測、Xpert MTB/RIF檢測、外周血T-SPOT.TB檢測及三種方式聯合檢測，現就本次研究成果作如下的分析論述。

1 資料與方法

1.1 一般資料 對我院檢驗科2015年2月～2020年10月經多種方式聯合確診的65例結核性胸膜炎患者為研究對象，所有患者一般資料齊全，對本次研究知情，且本次研究已經獲得我院醫學倫理委員會批準執行。65例患者中男41例，女24例，年齡37～76歲，平均（56.3±7.4）歲。

1.2 方法 胸腔積液ADA/血清ADA檢測[5]：采集患者5ml抗凝的胸腔積液，以3000r/min離心處理15min，取上層清液，同時采集患者空腹狀態下3ml的外周靜脈血，以3000r/min離心處理3min，分離血清。而后采用C8000全自動分析儀測定胸腔積液中的ADA和血清ADA，計算兩者比值。若胸腔積液ADA與血清ADA比值＞1.0且胸腔積液ADA＞24U/L則可判定為胸腔積液ADA/血清ADA檢測臨界值。

Xpert MTB/RIF檢測[6]：離心處理胸腔積液后，在其中加入2ml的樣本處理液重懸沉淀物充分混勻，取2ml加入至試劑匣。而后采用Gene Xpert MTB/RIF檢測系統檢測，2h后讀取結果。

外周血T-SPOT.TB檢測[7]：借助肝素鈉抗凝管采集患者5ml的外周血液，并加入淋巴細胞分解液，以此實現分離單個核細胞的目的。隨后使用MD-AIM-V細胞培養液將細胞濃度調整為2.5×106ml，對已經經過γ干擾素單抗的為微孔板進行測定，設定陽性孔與陰性孔，分別加入50μl的植物血凝素、AIM-V、CEP-10及ESAT-6培養液。同時每一個孔中加入100μl稀釋好的單個核細胞，開展孵育、洗板、顯色、蒸餾水終止反應。陽性：陰性孔斑點數≤5時，陽性孔斑點數-陰性斑點數≥6；陰性孔斑點數≥6時，陽性斑點數≥2倍陰性對照孔斑點數。

1.3 觀察指標與評價標準 以聯合診斷結果為金標準，比較胸腔積液ADA/血清ADA檢測、Xpert MTB/RIF檢測、外周血T-SPOT.TB檢測及三項聯合檢測的準確率、靈敏度、特異性。靈敏度=[真陽性/（真陽性＋假陰性）]×100%；特異性=[真陰性/（真陰性＋假陽性）]×100%。

1.4 統計學方法 研究結果數據應用統計學軟件SPSS23.0完成處理，計量資料、計數資料分別用±s、（n,%）表示，差異性分別對應t檢驗、X2檢驗；檢驗依據：P＜0.05表示差異顯著，有統計學意義。

2 結果

2.1 單項檢測與三項聯合檢測的準確率比較 胸腔積液A D A/血清A D A檢測、Xpert MTB/RIF檢測及外周血T-SPOT.TB檢測診斷準確率均低于聯合診斷（金標準），比較差異有統計學意義（X2=26.481/14.444/9.669，P=0.000/0.000/0.002＜0.05）；三項聯合檢測診斷準確率低于聯合診斷（金標準），但比較差異無統計學意義（X2=2.031，P=0.154＞0.05）。胸腔積液ADA/血清ADA檢測、Xpert MTB/RIF檢測及外周血T-SPOT.TB檢測診斷準確率均低于三項聯合檢測，比較差異有統計學意義（X2=20.440/9.119/4.866，P=0.000/0.000/0.027＜0.05）。見附表1。

附表1 單項檢測與三項聯合檢測的準確率比較（n,%）

2.2 單項診斷與三項聯合檢測靈敏度、特異性比較 胸腔積液ADA/血清ADA檢測、Xpert MTB/RIF檢測及外周血T-SPOT.TB檢測靈敏度均低于三項聯合檢測，比較差異無統計學意義（X2=0.952/1.605/0.818，P=0.132/0.205/0.366＞0.05）；胸腔積液ADA/血清ADA檢測、Xpert MTB/RIF檢測及外周血T-SPOT.TB檢測特異性均高于三項聯合檢測，比較差異無統計學意義（X2=0.113/0.152/0.417，P=0.737/0.696/0.519＞0.05）。見附表2。

附表2 單項診斷與三項聯合檢測靈敏度、特異性比較（n,%）

2.3 診斷的ROC曲線 胸腔積液ADA/血清ADA檢測、Xpert MTB/RIF檢測、外周血T-SPOT.TB及聯合檢測的ROC曲線下面積分別為0.90（95%CI:0.83～0.97，P＜0.05），0.89（0.80～0.96，P＜0.05），0.91(0.82～0.98，P＜0.05)，和0.92（0.82～0.99，P＜0.05）。見附圖。

附圖 單項診斷與三項聯合檢測的ROC曲線

3 討論

結核性胸膜炎是臨床一種常見的肺外結核病，其發病與結核分枝桿菌感染及機體的免疫狀態密切相關。診斷方面，以實驗室檢查、X線檢查、胸部CT檢查及胸膜活檢為主，均可取得較好的診斷效果[1][2]。尤其是組織病理學是結核性胸膜炎診斷的依據，有極高的診斷效果，但組織病理學檢查是一種有創檢查，操作較為復雜，多數的患者無法順利完成檢查[8][9]。

胸腔積液ADA/血清ADA檢測、Xpert MTB/RIF檢測及外周血T-SPOT.TB檢測均是近年來廣泛應用于結核性胸膜炎診斷的方式[10]。Xpert MTB/RIF檢測是一種新型的分子診斷技術，優勢在于有較強的自動化水平，可以有效減少非特異性擴增[10][11]。更為重要的一點是，可以在2h內得到測定結果，同時可以最大限度減少人為干預，特異性高。但也有一定的局限性，比如靈敏度不高，多在37%～77%。ADA是臨床診斷結核性胸膜炎的理想指標，當結核分枝桿菌的結核蛋白進入到患者胸腹腔后會導致淋巴細胞增殖，繼而導致ADA含量升高，通過胸腔積液ADA/血清ADA檢測可以提升診斷的特異度[12]。外周血T-SPOT.TB檢測是干擾素-γ釋放試驗的一種，可以通過CEP-10及ESAT-6培養液來檢測出結核分枝桿菌，外周血中的結核分枝桿菌特異性T細胞可以有效分離，經過培養后可以分泌出干擾素γ，繼而借助相應的抗體來測定其濃度，測定患者是否存在結核分枝桿菌感染[13]。在單項診斷與三項聯合檢測靈敏度、特異性比較中發現，三項聯合檢測的靈敏度高于單項診斷，但比較差異無統計學意義，分析原因可能與樣本量較少有一定的關系。三種方式聯合檢測的準確率高于單一檢測方式，且與金標準結果比較差異無統計學意義，表明三種方法聯合檢測在診斷結核性胸膜炎中有良好的效果，值得推廣。同時筆者發現胸腔積液ADA/血清ADA檢測、Xpert MTB/RIF檢測、外周血T-SPOT.TB及聯合檢測的ROC曲線下面積分別為0.90（95%CI:0.83～0.97,P＜0.05），0.89（0.80～0.96，P＜0.05），0.91(0.82～0.98，P＜0.05)，和0.92(0.82～0.99，P＜0.05)，三者差異不明顯，但聯合檢測可提高ROC曲線下面積，提示聯合檢測診斷效能更高。

綜上所述，三種方式聯合檢測在結核性胸膜炎診斷中有較高的準確性，臨床應用價值顯著。