浙江景寧大仰湖自然保護區大型真菌資源調查及評價

徐端妙 朱新宇 林秀君 雷延菊 朱志柳*

（1景寧畬族自治縣生態林業發展中心，浙江麗水323500；2中國科學院微生物研究所真菌學國家重點實驗室，北京100101；3皇太后大學卓越真菌研究中心，泰國清萊57100）

真菌是真核生物中除了動物和植物外的第三類生物，其中能形成肉眼可見的大型子實體稱為大型真菌。大型真菌是生態系統中不可或缺的分解者，在地球生物圈的物質循環和能量流動中發揮著不可替代的作用，在全球物質循環，尤其是碳元素循環中具有重要的生態價值；同時大型真菌中的許多食藥用菌與人類生產、生活密切相關，具有重大的經濟價值[1]。如早在2000年前東漢的《神農本草經》中已經把靈芝列為上藥。自2004年來，食用菌已成為我國僅次于糧、油、果、菜的第五大類農產品。除食藥用菌外，毒蘑菇亦是大型真菌中不可忽視的部分，我國每年都有因誤食毒蘑菇中毒的報道，并且毒蘑菇中毒是食物中毒死亡的主要原因之一[2]。

浙江省景寧縣大仰湖濕地群省級自然保護區地處浙江省景寧畬族自治縣東南部，屬洞宮山脈中段，位于麗水市景寧畬族自治縣內，包括縣域中東部的大仰、草魚塘、荒田湖三個分場，其地理坐標為東經119°41′00″～119°45′25″、北緯27°50′47″～27°58′11″，海 拔613.8～1556.9 m，相 對 高 差943.1 m，海 拔1 500 m以上山峰有12座。該保護區是飛云江水系和甌江水系的發源地之一，屬中亞熱帶季風氣候，年平均溫度約12.8℃、無霜期196 d左右、降水量1824.8 mm、相對濕度80%以上，具有溫暖濕潤、雨量充沛、四季分明、中亞熱帶資源豐富的特點。該保護區地貌以深切割山地為主，次級地貌有山地地貌、夷平地地貌和山區流水地貌，境內峰巒起伏，地形復雜，植被類型以松科、杉科、柏科、殼斗科、槭樹科、胡桃科、樺木科和金縷梅科為主[3-4]。

三年來，景寧畬族自治縣生態林業發展中心與中國科學院微生物所的聯合考察隊對大仰湖自然保護區大型真菌的種類和分布進行調查，初步查清該地區的大型真菌資源狀況，為大仰湖自然保護區真菌資源的保護和利用提供基礎資料。

1 材料與方法

1.1 研究材料

研究材料由聯合考察隊于2015、2016、2019年間采自景寧畬族自治縣大仰湖自然保護區的大仰、草魚塘、荒田湖三個林場，共計375份，經編號、分類、鑒定、烘干后存放于中國科學院菌物標本館（HMAS）。

1.2 研究方法

1.2.1 形態學鑒定

野外采集過程中對子實體進行原生態拍照并詳細記錄新鮮子實體生境及宏觀特征，包括：菌蓋大小、顏色、表面有無鱗片或絨毛；菌褶厚度、顏色、是否具有小菌褶；菌柄長寬、形態、氣味、受傷后的顏色變化；菌環（若有）大小、形狀、上下表面是否光滑或者覆蓋鱗片。微觀解剖特征由干標本切片于光學顯微鏡（ZEISSIMAGERA2）下觀察所得。切片以5%～10%的KOH溶液為浮載劑，用1%的剛果紅試劑染色。測量并記錄孢子、擔子、褶緣囊體（若有）、菌蓋表皮菌絲等結構（每個特征測量至少20次，并拍照）。統計孢子的長寬平均值（X）、孢子長寬的標準差（SD）以及擔孢子的長寬比（Q）[5]。

1.2.2 真菌DNA ITS序列分析

DNA提取采用試劑盒（北京博邁德生物技術有限公司的廣譜植物基因組DNA快速提取試劑盒、長春市志昂生物科技有限公司的快速植物DNA磁珠法提取試劑盒GO-GPLF-400）提取法，提取方法參照試劑盒說明書；對真菌DNA條形碼基因ITS（核糖體RNA基因內轉錄間隔區）進行擴增。設定PCR反應體系為25μL，包 括2×Taq Plus PCR MasterMix（200 mol/L dNTPsP、4.0 mm MgCl2、2.5 U TaqDNA聚合酶）、DNA模板、ddH2O和正反向兩種引物。引物為ITS1（5’-TCCGTAGGTGAACCTGCGG-3’）和ITS4（5’-TCCTCCGCTTATTGATATGC-3’）。PCR擴增產物送入北京華大基因研究中心有限公司測序。

1.2.3 標本鑒定

獲得的標本ITS序列通過檢測后，在GenBank中進行BLAST比對和同源序列的檢索，并結合標本的形態學鑒定結果進行最后的鑒定[6-7]。

分類系統參照最新擔子菌門分類體系以及子囊菌門分類體系[8]。

1.2.4 大型真菌信息分析

大型真菌經濟用途參照文獻[9]和文獻[10]。

2 結果與分析

2.1 大仰湖自然保護區大型真菌名錄

375份真菌標本形態學和分子生物學鑒定結果：大型真菌有107種，隸屬于2門4綱13目34科67屬，其中食用菌21種，藥用菌21種，毒菌20種（表1）。

表1 大仰湖自然保護區大型真菌名錄

（續表1）

（續表1）

2.2 大仰湖自然保護區大型真菌統計分析

大仰湖自然保護區大型真菌調查結果，大型真菌分屬于34個科；大型真菌種類最豐富的3個科（優勢科）為牛肝菌科、紅菇科、蘑菇科，共有39種，優勢科占保護區總科數的8.82%，但包含的種數占總種數的36.44%（表2），其中牛肝菌科種數最多，但是單科單屬也是不可忽略的重要組成部分。

表2 大仰湖自然保護區大型真菌種類豐富科（≥10種）統計

大仰湖大型真菌共有67個屬，6個優勢屬，分別為蘑菇屬、乳菇屬、鵝膏屬、紅菇屬、粉褶菌屬、多汁乳菇屬，共有27種（表3），雖然優勢屬僅占保護區總屬數的8.96%，但包含的種數占保護區總種數的25.24%。其中紅菇屬Russula、乳菇屬Lactarius的大型真菌與殼斗科Fagaceae和松科Pinaceae等植物為共生關系[11-12]，這與大仰湖自然保護區溫帶屬性的植被分布有著密不可分的關系。

表3 大仰湖自然保護區大型真菌種類豐富屬（≥4種）統計

3 小結與討論

近年大仰湖自然保護區發現并已發表3個新種：磚紅紅菇Russula carnea、短鏈蘑菇Agaricuscatenariocystidiosus和景寧蘑菇Agaricusjingningensis，發現2個國內新記錄種：南方喙囊乳菇Lactarius austrorostratus和巴德茲脆柄菇Psathyrella badhyzensis，其中景寧蘑菇Agaricus jingningensis為大仰湖自然保護區特有種。

在對自然保護區的大型真菌調查過程中，發現該地區野生食藥用資源豐富，一些重要的食用菌，如雞油菌Cantharelluscibarius，被當地的村民廣泛采食；但是如中華鵝膏Amanita sinensis，因其外觀與一些劇毒鵝膏難以分辨，采集該食用菌存在一定的風險；一些重要的藥用菌，如蟬花Cordycepscicadae，具有抗菌、抗氧化、抗腫瘤，提高免疫力等功效，具有較好的開發價值。該地區存在20種毒蘑菇，其中劇毒種類有灰花紋鵝膏Amanita fuliginea、長條棱鵝膏Amanita longistriata等。因此，當地政府需要加大宣傳，避免當地群眾誤食毒蘑菇中毒。

調查初步明確了大仰湖自然保護區大型真菌資源，今后，需進一步對當地珍稀大型真菌資源進行評估和保護。

致謝：感謝中國科學院微生物研究所真菌學國家重點實驗室趙瑞琳研究員和賀茂強博士對本文指導。