液相色譜柱后衍生法快速測定馬鈴薯中10種氨基甲酸酯類農藥殘留

吳新華

（惠東縣農業技術推廣中心，廣東 惠州 516300)

馬鈴薯是世界上僅次于水稻、小麥、玉米的第四大糧食作物，生長周期短，單位面積產量高，營養豐富，用途廣泛，在人們日常生活中占有十分重要的地位[1]。氨基甲酸酯類農藥因具有殺蟲效果顯著，且分解快、殘留期短、代謝迅速的特點[2]，正越來越多地被應用于農業生產，其殘留對人體的危害也越來越受到人們的重視[3-4]，我國也出臺了相應的限量標準[5]。目前，氨基甲酸酯農藥殘留檢測多使用NY/T 761—2008標準[6]，該標準操作步驟多、時間長，影響檢測效率；而關于使用QuEchERS快速處理樣品的方法，目前的研究多結合氣質聯用儀或液質聯用儀使用[7-12]，質譜儀的價格及使用成本均較高，基層檢測機構較難實現?；輺|縣是全國較大的冬種馬鈴薯生產基地，2017年惠東縣馬鈴薯種植面積達到8 700 hm2，馬鈴薯的質量安全檢測工作也日益增多；因此，結合現有設備，研究操作簡單、測定快速的馬鈴薯中氨基甲酸酯類農藥殘留液相色譜儀檢測方法，以提高檢測工作效率，這對惠東縣馬鈴薯產業發展具有重要意義。

1 材料和方法

1.1 儀器與試劑

儀器：安捷倫液相色譜儀 1260Ⅱ（美國安捷倫科技公司）、柱后衍生儀Vector PCX（美國 Pickering科技有限公司）、高速勻漿機（德國艾卡公司）、樣品粉碎機（德國飛利浦有限公司）。

試劑：10種氨基甲酸酯農藥標樣（涕滅威亞砜、涕滅威砜、滅多威、3-羥基克百威、涕滅威、速滅威、克百威、甲萘威、異丙威、仲丁威）規格：100.0 μg/mL，來自農業部環境質量監督檢驗測試中心（天津）；氫氧化鈉溶液、OPA試劑均來自美國Pickering科技有限公司，乙腈、甲醇均為色譜純，水為去離子水，馬鈴薯為市售。

1.2 樣品處理

取馬鈴薯可食部分，切塊、充分混勻后放入樣品粉碎機，制成待測樣。準確稱取20.0 g試樣置于離心管中，加入10種氨基甲酸酯類農藥（濃度均為10 mg/L）標樣，加入40 mL乙腈，再加入氯化鈉5 g，經18 200 r/min勻漿2 min，然后3 000 r/min離心6 min，使乙腈相和水相分層。吸取分層后的乙腈溶液5 mL，在50 ℃經氮吹至近干，加入甲醇定容至2 mL，最后用過濾膜過濾后裝瓶待測。

1.3 液相洗脫條件

色譜柱為ZORBAX Eclipse Plus C18 USP L1 Analytical，4.6 mm×250.0 mm；柱溫40 ℃，進樣體積10 μL；熒光檢測器，入射波長330 nm，激發波長465 nm；梯度洗脫條件0 min，甲醇15%、2～8 min，甲醇25%、9 min，甲醇40%、10 min，甲醇45%、19～25min，甲醇80%、26 min，甲醇15%、流量保持1 mL/min.

1.4 柱后衍生條件

柱后衍生條件同NY/T 761—2008標準：0.05 mol/L氫氧化鈉溶液，流速0.3 mL/min；OPA試劑，流速0.3 mL/min；反應器溫度為水解溫度100 ℃，衍生溫度為室溫。

2 結果與分析

2.1 馬鈴薯提取液凈化選擇

馬鈴薯提取液經勻漿、離心后獲得上層清液，其顏色淺、清澈、表面也無油污狀漂浮物，考慮色素、油酯類影響較小，基質液較干凈。通過對上清液氮吹、甲醇定容、過濾后裝瓶進樣，獲得液相色譜圖（圖1），發現樣品雜質峰出現在3 min左右，目標峰在6 min之后，對幾種氨基甲酸酯類農藥定性不存在影響。在定量操作方面，采用無農藥殘留馬鈴薯制備基質空白，配制標準曲線，避免基質效應。

圖1 10種氨基甲酸酯類農藥色譜

2.2 標準曲線回歸方程、相關系數、檢出限

在0.02～1.00 mg/mL范圍內，使用馬鈴薯基質液配制標準溶液，10種氨基甲酸酯農藥濃度對應峰面積有良好的線性關系，相關系數均大于0.999 0，以信噪比等于3對應的目標化合物濃度作為方法的檢出限，得出10種農藥的方法檢出限為0.008～0.010 μg/mL（表1）。

表1 10種氨基甲酸酯農藥的標準曲線

2.3 回收率和精密度

對馬鈴薯樣品添加3種不同濃度（0.05、0.10、0.20 μg/mL）標準樣品，做3個平行樣，10種氨基甲酸酯類農藥回收率為77.1%～106.0%，相對標準偏差在1.2%～6.7%（表2），說明液相色譜柱后衍生法符合檢測要求。

表2 10種農藥的回收率、相對標準偏差

3 結論與討論

本文參考NY/T 761—2016標準關于蔬菜水果中氨基甲酸酯類農藥殘留檢測的方法，對馬鈴薯中氨基甲酸酯類農藥殘留檢測前處理進行了優化，結果表明，直接將提取液氮吹至近干，再用甲醇定容進樣檢測，整個過程步驟少、回收率較好，且方法簡單。該方法能同時準確檢測馬鈴薯中10種氨基甲酸酯類農藥殘留，10種氨基甲酸酯類農藥回收率在77.1%～106.0%，相對標準偏差在1.2%～6.7%，滿足氨基甲酸酯類農藥的定量檢測要求，適合基層檢測單位馬鈴薯中氨基甲酸酯類農藥殘留的批量檢測工作。