益生菌在防治雞球蟲病中的研究進展

雷振宇，李曉剛，葉 成，閆可可，丁世榮，江 濤*

（1.固始縣動物疫病預防控制中心，河南 固始 465200 2.登封市畜產品質量監督檢驗中心）

對于雞球蟲病的防治，抗球蟲疫苗能有效控制雞球蟲病，但活疫苗存在致病風險、種間交叉保護范圍小等問題，因此目前難以推廣應用。臨床上仍以化學合成的藥物控制雞球蟲病，但藥品的濫用已經導致耐藥性和藥物殘留的出現。隨著人們對食品安全越來越關注，以及養殖“禁抗”的不斷推進，促使人們去探尋一種更為安全有效的抗球蟲方法。近年來，基于益生菌毒副作用小、無殘留、不易產生耐藥性而受到越來越多的關注。

1 常用益生菌的種類及其作用機制

2002 年，世界衛生組織和世界糧農組織正式將益生菌定義為“活性微生物，當其以足夠的量食用時，可以對宿主的健康產生有益的影響”。目前，已經被發現的益生菌種類按其菌屬可分成三類：乳酸菌類、芽孢桿菌類、酵母菌類。我國農業農村部第105 號公告公布的允許使用的飼料添加劑品種目錄中，飼料級微生物菌種共有12 種。不同的益生菌發揮著不同的功能特點，其作用機制大致可歸納為物理屏障、化學屏障和免疫屏障這三種。

1.1 物理屏障

物理屏障主要與腸黏膜的通透性有關，益生菌通過黏附在動物消化道的黏膜和上皮細胞層表面，增加黏液分泌，頡頏結合位點，阻止病原微生物的侵襲，預防腸道感染。徐子涵在研究乳酸菌對肉雞生長性能和腸黏膜結構影響的試驗中發現，該乳酸菌能顯著增加肉雞的體質量和小腸絨毛高度，減小隱窩深度，增加腸黏膜的吸收面積，促進小腸腺體發達，進而促進雞對營養物質的吸收利用［1］。益生菌還可通過調節腸上皮分泌的黏液形成黏彈性膠質，以及增強腸上皮緊密連接蛋白的表達，封閉腸黏膜上皮細胞頂部的孔隙，從而阻擋致病菌的入侵及定植。有關專家在肉雞基礎日糧中添加枯草芽孢桿菌時發現，枯草芽孢桿菌能夠增強細胞骨架蛋白和緊密連接蛋白相關基因的表達，增強了腸上皮細胞間的緊密連接，降低了腸道黏膜的通透性，從而阻止了病原菌對腸上皮細胞的侵襲。

1.2 化學屏障

化學屏障主要指益生菌合成分泌的一些抗菌因子直接阻止病原微生物的生長，從而調節腸道微生態平衡，如有機酸、游離脂肪酸、防御素和各種酶等物質。有關專家在研究枯草芽孢桿菌對雞球蟲和產氣莢膜梭菌的影響時發現，腸上皮細胞在受到病原微生物入侵時，枯草芽孢桿菌產生的細菌素不僅能夠阻止病原微生物入侵上皮細胞，從而降低雞球蟲對腸道的損傷，還能干擾細菌的細胞壁合成，從而抑制腸道產氣莢膜梭菌的生長繁殖。益生菌還可通過分泌維生素、氨基酸等各種營養物質促進腸道和免疫器官的發育，增強機體免疫力。謝全喜在肉雞基礎日糧中添加植物乳桿菌時發現，植物乳桿菌能夠通過分泌乙酸和乳酸降低腸道pH，從而抑制病原微生物的生長繁殖，還可通過分泌各種營養物質促進肉雞脾臟和法氏囊等免疫器官的發育，增強肉雞的生產性能［2］。

1.3 免疫屏障

免疫屏障是指益生菌可通過直接或間接方式影響多種免疫細胞的功能，刺激機體腸道黏液中免疫球蛋白和細胞因子的分泌，起到免疫調節和控制炎癥的作用。免疫球蛋白是黏膜免疫反應中最主要的一類抗體，朱沛霽在雪山草雞的日糧中添加枯草芽孢桿菌，結果顯示枯草芽孢桿菌通過增強腸道黏液層SIgA 的分泌，通過與病原微生物的表面抗原結合來保護腸上皮細胞及其正常功能［3］。有關專家發現枯草芽孢桿菌能夠提高腸道黏液中IgA、IgG和SIgA 濃度，增加小腸絨毛長度、隱窩深度和絨毛面積，并改善抗氧化相關基因的表達，從而增強腸道免疫排斥功能。免疫反應中產生的細胞因子主要包括致炎性細胞因子（IL-6、IFN-α、IFN-γ等）和抗炎性細胞因子（IL-10、IL-15 等），協同作用引起腸道上皮細胞產生免疫反應。唐雪玉發現枯草芽孢桿菌能夠明顯提高鵝血清中IL-6、IFN-α、IFN-γ、IL-10的含量，改善鵝只機體免疫功能［4］。

2 益生菌在防治雞球蟲病中的臨床應用

2.1 乳酸菌類

乳酸菌是革蘭氏陽性、非孢子形成的兼性厭氧菌，是動物胃腸道中的優勢菌群，具有較早的應用歷史，該類菌活菌數較高，能大量產酸，保持pH 穩定。飼料級微生物菌種主要有5種，分別為干酪乳桿菌、植物乳桿菌、屎鏈球菌、糞鏈球菌和乳酸片球菌。乳酸菌通過增強機體體液免疫和細胞免疫，以及分泌的乙酸和乳酸降低了腸道pH，以達到抗球蟲作用。楊桂連在探究乳酸菌對雛雞抗柔嫩艾美耳球蟲感染中的作用時發現，乳酸菌不僅提高了血清和腸道分泌物中的抗體（IgG、SIgA）和細胞因子（IFN-γ、IL-2）水平，還降低了球蟲卵囊排出量和球蟲引起的腸道損傷［5］。

2.2 芽孢桿菌類

芽孢桿菌是革蘭氏陽性、可產芽孢的需氧菌，該類菌物理性質穩定，可耐高溫、耐酸堿，能產生多種酶類物質、調節腸道微生態的平衡和提高免疫力。飼料級微生物菌種有4種，分別為枯草芽孢桿菌、納芽孢桿菌、乳鏈球菌和嗜酸乳桿菌?？莶菅挎邨U菌通過促進腸道免疫反應達到免疫保護作用。陳鎖用枯草芽孢桿菌治療球蟲引起的壞死性腸炎時效果顯著，能緩解腸道絨毛損傷，促進腸道SIgA、IL-10、IL-1、TNF-α的表達，增強肉雞腸道免疫［6］。黃現青發現枯草芽孢桿菌能夠產生脂肽類抗微生物物質，這種物質在進入腸道后可能對球蟲蟲體或蟲卵具有直接滅活作用，從而起到抗球蟲作用［7］。

2.3 酵母菌類

酵母菌是單細胞真菌，兼性厭氧，在任何條件下都能生長發育。飼料級微生物菌種有3 種，分別為啤酒酵母、產阮假絲酵母和沼澤紅假單胞菌。酵母及其培養物中含有豐富的乳鐵蛋白、乳酸和琥珀酸等物質，這些物質不僅能夠阻礙病原微生物的生長繁殖，還能調節宿主免疫反應，從而改善機體的生產性能。呂玲在進行酵母細胞對肉雞球蟲感染的影響時發現，在日糧中添加酵母細胞可促進腸道IFN-γ的產生，從而激活腸道屏障中巨噬細胞等免疫細胞的免疫應答，從而降低由球蟲感染引發的大腸桿菌和沙門氏菌的繼發感染［8］。

3 使用益生菌防治雞球蟲病時存在的問題

近年來，益生菌替代抗生素的“綠色養殖”模式在動物養殖界引起廣泛關注。我國對益生菌抗球蟲機制的探究仍處于起步階段，對于益生菌在雞球蟲發育過程中通過哪些途徑起到抑制作用，還存在許多未知。對于大部分抗球蟲益生菌的使用，主要是基于一些田間試驗和與其他抗生素效果對比試驗上，嚴重阻礙了益生菌抗球蟲產品的應用和推廣，因此對于益生菌抗球蟲的分子機制還需進一步研究。

就目前而言，益生菌在養殖場中的應用也存在一些問題。一是益生菌種類繁多，養殖中益生菌的使用量沒有一個科學的依據，需要從中篩選出用量少、效果好的益生菌抗球蟲制劑；二是部分益生菌在貯存過程中活力不穩定，導致實際使用時效果不佳；三是益生菌制劑與目前市場中使用的抗球蟲藥物相比價格較高，如需長期添加使用，會使養殖成本提高，因此很難推廣使用。

4 益生菌防治雞球蟲病的發展前景

動物腸道是一個具有生物多樣性的微環境，因此維持腸道微生態平衡，對腸道上皮屏障功能至關重要?？顾幭x株使傳統化學抗球蟲藥物防治效果降低甚至失效，藥物殘留問題也日趨關注，隨著全面無抗養殖時代的到來，基于益生菌無毒副作用、無藥物殘留、生產成本低、增強機體免疫功能、提高生產性能等諸多優點，益生菌可以逐漸成為抗球蟲藥物的替代品。因此，益生菌在抗球蟲病方向上有著天然的優勢以及廣闊的發展前景。