馬銀龍 張玉良 杜容宇 陳占軍
肺癌是目前常見的惡性腫瘤之一,在我國發病率和死亡率均居高不下[1]。手術治療是目前肺癌患者的首選,但是由于手術復雜、時間長、切口較長等原因,肺部、傷口容易產生感染等并發癥,加重患者的病情,是患者術后死亡的主要原因之一[2-3]。炎癥因子在患者術后感染后出現顯著上升等情況,常用于臨床感染檢測的指標包括C-反應蛋白(CRP)、降鈣素原(PCT)和白細胞介素-6(IL-6)等[4-5]。miR-21和miR-155屬于微小RNA(miRNAs),是潛在的致癌miRNA,在肺癌患者中出現表達上調,與預后相關[6]。本文探討圍手術期感染的肺癌患者血清miR-21、miR-155與炎癥因子水平變化及其臨床價值,旨在為今后臨床控制和預防術后感染提供思路。
選取2019年9月至2020年9月本院收治的肺癌患者94例,年齡18~69歲,平均(57.32 ±7.64)歲。納入標準:①符合《NCCN腫瘤學臨床實踐指南》[7]中關于肺癌的診斷標準,患者經病理檢查確診為肺癌;② 住院行手術治療患者;③ 臨床及隨訪資料完整者;④患者簽署自愿受試同意書,患者及其家屬需簽署知情同意書。排除標準:① 已接受放療、化療及手術治療者;②合并其他惡性腫瘤患者;③合并其他器官嚴重性病變患者。以《醫院感染診斷標準》[8]為依據,將患者分為感染組(n=28)和非感染組(n=66)。
抽取研究對象術前與術后的靜脈血5 mL,離心取上清待檢。血清IL-6水平通過酶聯免疫法檢測,ELISA試劑盒購自上海酶聯生物技術有限公司;血清CPR水平通過免疫熒光層析法檢測,試劑盒購自北京索萊寶科技有限公司;血清CRP水平通過膠乳增強免疫比濁法檢測,相關試劑盒購自北京索萊寶科技有限公司。以上操作均嚴格按照試劑盒說明書進行。
取上述血清樣本,使用TRIzol RNA試劑盒(購自賽默飛世爾科技有限公司)提取總RNA,紫外分光光度計(上海美譜達公司)檢測總RNA 濃度及純度。取2 μg 總 RNA 使用反轉錄試劑盒(賽默飛世爾科技有限公司)進行反轉錄反應。取反轉錄產物進行PCR擴增,擴增條件為95℃ 30 s,60℃ 20 s,72℃ 20 s,循環40 次。用2-ΔΔCt法計算各組基因的相對表達量。
感染組與非感染組患者年齡、性別、腫瘤組織分型、腫瘤大小差異無統計學意義(P>0.05),TNM分期、淋巴結轉移差異有統計學意義(P<0.05)。TNM Ⅲ期患者術后感染的概率明顯高于TNM Ⅰ、Ⅱ期患者(P<0.05),有淋巴結轉移患者術后感染概率明顯高于無淋巴結轉移患者(P<0.05),見表 1。
表1 感染組與非感染組臨床病理特征比較/例
手術前2組患者血清miR-21、miR-155以及炎癥因子水平差異無統計學意義(P>0.05),手術后感染組血清miR-21、miR-155以及炎癥因子明顯高于未感染組患者(P<0.05),見表2。
表2 2組患者手術前后血清miR-21、miR-155以及炎癥因子水平變化
多因素logistic 回歸分析顯示,血清PCT、IL-6、CRP、miR-22、miR-155水平上升為影響肺癌患者圍手術期感染的獨立危險因素(P<0.05),見表3。
表3 肺癌患者圍手術期感染的多因素logistic分析
根據Spearman相關性分析法得出,血清miR-22、miR-155與IL-6、CRP、PCT水平存在相關性,呈正相關,見表4。
表4 Spearman相關性分析
肺癌近年來發病率和病死率均呈上升趨勢,主要與經濟發展加快導致空氣污染加重以及人口老齡化有關[9]。肺葉切除術是臨床上用于治療肺癌的方法,可以有效降低肺癌的死亡率,但是由于肺葉切除術的手術時間長,術后容易出現感染[10-11]。肺癌圍手術期感染是肺癌患者術后死亡的主要因素,病死率超過了30%[12]。
臨床上主要用于診斷患者感染的臨床指標如PCT、CRP、IL-6等炎性分子,PCT可作為檢測細菌感染的臨床指標[13];IL-6與機體免疫應答有關[14];CRP可作為檢測機體炎癥反應指標[15]。當患者出現感染時,患者發生炎癥反應后炎性分子水平上升[16]。本研究發現手術后感染組血清炎癥因子水平明顯高于未感染組患者,患者發生術后感染后炎癥因子水平上升,說明機體發生了炎癥反應。此外,血清PCT、IL-6、CRP水平上升可作為影響肺癌患者圍手術期感染的獨立危險因素,這與目前的研究一致,但由于血清PCT、IL-6、CRP水平檢測敏感性低,需要尋找更為合適的臨床指標。
miRNA作為非編碼的微小RNA,可穩定存在于外周血中,不易受外界影響[17]。miR-21以及miR-155與腫瘤的發生發展密切相關,在多種腫瘤類型患者中出現異常表達[18]。miR-21以及miR-155表達水平還與肺癌患者的預后相關,miR-21以及miR-155表達水平越高,患者的生存時間越短,而患者的預后與術后感染密切相關[19-20]。本研究發現手術后感染組血清miR-21、miR-155水平明顯高于未感染組患者,說明血清miR-21、miR-155水平與肺癌患者發生術后感染有關,這與預測的結果一致。且多因素logistic 回歸分析發現,血清miR-21、miR-155水平上升為影響肺癌患者圍手術期感染的獨立危險因素,說明血清miR-21、miR-155水平有成為預測肺癌患者發生圍手術期感染指標的潛力。
綜上所述,本研究通過RT-PCR法證實了外周血miR-21和miR-155水平在肺癌圍手術期感染患者出現表達上調,對今后進一步研究肺癌圍手術期感染與miR-21和miR-155水平的關系提供了一定的數據支持。但是本研究由于單一中心、病例少等缺點,研究結果可能出現了一定的偏差,這需要在未來的研究中加以完善。