結合注射劑用法用量變更淺析一致性評價中非臨床試驗的受試物分析

謝愛芳 顏東

摘要：本文結合一致性評價中參考參比制劑變更用法用量的情況，分析了因用法用量變更引發的非臨床研究安全性風險，闡述了不同變更情形下所需開展的非臨床試驗受試物分析，給出了相應分析研究內容和試驗要求的參考建議，闡明了因受試物分析與稀釋液的種類、配制濃度等戚戚相關，研究時需全面考慮變更的影響，從而開展切實有效的受試物分析，為評估藥物安全性提供參考。

關鍵詞：一致性評價;用法用量;非臨床試驗;受試物分析

【中圖分類號】 R4 【文獻標識碼】 A? ? ? 【文章編號】2107-2306（2022）07--01

《化學藥品注射劑仿制藥質量和療效一致性評價技術要求》[1]中明確規定，一致性評價過程中需檢索并跟蹤參比制劑說明書的變更情況，參考最新版參比制劑說明書，合理擬定一致性評價藥品說明書。由于稀釋液的種類、濃度等均對注射劑的使用時有影響，因此參考參比制劑用法用量修訂說明書，和根據參比制劑變更處方工藝，均會增加潛在的安全性風險。因此，一致性評價中結合用法用量變更開展特殊安全性試驗，為變更后產品的安全性評價提供參考意義顯著。

開展特殊安全性試驗，離不開受試物分析。受試物分析系指對供非臨床研究的藥物的特性進行分析，如與溶媒混合后的穩定性分析、均勻性分析、含量準確性分析等?！端幬锎碳ば?、過敏性和溶血性研究技術指導原則》[2]等非臨床研究相關技術指導原則，均對受試物分析提出了要求，原則中明確指出化學藥物試驗過程中應進行受試物樣品分析，并提供樣品分析報告。成分基本清楚的中藥、天然藥物也應進行受試物樣品分析。

本文結合一致性評價過程中注射劑產品用法用量的變更，簡單闡述了一致性評價中非臨床試驗的受試物分析及考量因素，為開展切實有效的非臨床安全性試驗，評估藥物安全性提供參考。

1 用法用量的變更情況

1.1 用法用量無明顯改變

部分注射劑處方組成及制備工藝相對簡單，一致性評價時改變了某個生產工序即可達到與參比制劑質量一致。其處方組成變化微乎其微，用量與參比制劑大同小異，用法不涉及稀釋液種類和配伍濃度改變。例如，氯化鉀注射液，一致性研究時，去掉了活性炭吸附，去掉了pH調節劑的使用，而用法用量和參比制劑無明顯差別?；谟盟幓A沒有改變，其測定方法收載于藥典，受試物分析方法成熟可靠，引發非臨床安全性的風險較低。

1.2用法用量顯著變化

基于參比制劑的處方組成，部分注射劑發生了涉及處方和工藝的一項或多項影響產品質量的變更，如去掉了金屬絡合劑、防腐劑，改變了滅菌工藝等。對比藥品說明書會發現，臨床配伍使用的稀釋液的種類或配伍濃度也存在明顯差別。這種情況下，修訂用法用量時兼顧非臨床安全性研究進行完備的受試物分析是非常必要的。

例如，硫酸阿米卡星注射一致性評價時去掉了防腐劑、改變了處方組成，發生了影響產品質量的改變，從而導致受試物基礎變化較大。已上市藥品說明書中顯示，成人肌內注射或靜脈滴注，單純性尿路感染對常用抗菌藥耐藥者每12小時0.2g，用于其他全身感染每12小時7.5mg/kg，或每24小時15mg/kg;成人一日不超過1.5g，療程不超過10天。而參比制劑說明書中規定，在靜脈輸注的情況下，藥物應以100mg～200mg溶于100至500ml的稀釋液中，并在30分鐘至1小時內給藥。與參比制劑相比，已上市藥品說明書中沒有明確的稀釋配制要求?？掠3]調研顯示，硫酸阿米卡星注射液臨床常采用的配伍方法是：每500mg加入氯化鈉注射液或5%葡萄糖注射液或其他滅菌稀釋液100ml～200ml;溶媒最常選用[3]100～250 ml 0.9%NS稀釋液、其次是5%GS稀釋液、再次是5%GNS稀釋液。對比可知，藥品用法用量的修訂與臨床使用稀釋液種類和配伍濃度密切相關。

2.供試品分析

2.1一般性分析

藥品說明書中用法用量無明顯變化時，基于用藥基礎沒有改變，受試物分析方法成熟可靠，風險較低，在非臨床安全性評價時進行一般性受試物分析，即做好受試物的配制方法、配制后的保存條件下的穩定性、均一性的檢測和驗證。例如，對過敏性、溶血性和局部刺激性試驗開展的一般性受試物分析，需考察供試品配置穩定性、均一性，采用高、中、低濃度從上、中、下三層取樣，各測定結果相對誤差需符合±10%以內的試驗要求;考察受試物配制方法的穩定性時，樣品需平行配制3份，分別從中層取樣檢測，各測定結果相對誤差需符合±10%以內的試驗要求。

2.2全面分析

全面的受試物分析涵蓋方法建立、方法驗證等，包括分析配制和儲存過程中對供試品濃度和含量影響的穩定性分析、配制后的測定方法的準確性分析以及各溶液的均一性分析。分析指標包括分析配制和儲存過程中對供試品濃度和含量影響的穩定性分析、配制后的測定方法的準確性分析以及各溶液的均一性分析等，涉及的具體試驗如系統適用性試驗、特異性分析、靈敏度、線性范圍、精密度與準確度、溶液穩定性、均一性（上、中、下三層）等。分析配制和儲存過程中對供試品濃度和含量影響的穩定性分析一般在開展非臨床研究前已完成，在不同實驗室開展研究注意需做好方法轉移與確認。對于配制后的受試物分析則需在GLP實驗室完成。

受試物分析時，系統適用性試驗中連續5次峰面積測定值的相對標準偏差不大于2%，保留時間的相對標準偏差不大于5%;特異性試驗比較稀釋液、溶媒和標準曲線溶液的色譜圖時，待測化合物保留時間處無干擾峰或干擾峰不影響定量下限;擬合標準曲線的有效濃度點至少6個，準確度建議在90%～110%之間，相關系數應大于0.995;系統殘留試驗中比較稀釋液及標準曲線溶液的色譜圖時，注意稀釋液在待測化合物保留時間處應無干擾峰或干擾峰不影響定量下限。精密度、準確度試驗中需同批運行質控樣本，每批高中低濃度水平應至少有5個質控樣本，測定結果的準確度需介于90%～110%之間，批內批間精密度的相對標準偏差在5%以內?？疾炫渲坪蟮膬湟旱姆€定情況時，放置若干時間前后儲備液的峰面積比值在95%～105%。采用溶媒稀釋后測定樣本穩定性時，每個濃度至少平行配制3個樣本，各條件下配制即刻和放置n小時后的含量測定結果的準確度介于90%～110%，且每個濃度樣本精密度不大于10%，若溶媒更換，則需要重新進行驗證。均一性試驗中，建議測定結果的平均準確度在90-110%以內，均一度的相對標準偏差在5%以內。

3.結語

非臨床安全性評價供試品檢測，要求對供試品制劑進行質量分析[4]，并規定配制后的溶液濃度與理論濃度的可接受偏差規定為±10%，混懸液為±15%。但實際試驗時，由于分析方法的建立和驗證，與供試品的理化特性、稀釋液的不同種類、臨床配制的不同濃度等的戚戚相關，需要根據品種特點、臨床用藥習慣和用藥基礎，結合《非臨床安全性評價供試品檢測要求的Q&A》[5]，全面考慮，在合理進行用法用量變更的同時，兼顧開展切實有效的供試品檢測[6]，為非臨床安全性試驗結果的可靠性提供支持，為臨床用藥的安全性提供參考依據。

參考文獻：

[1] 國家藥品監督管理局藥品審評中心.化學藥品注射劑仿制藥質量和療效一致性評價技術要求.[S]

[2] 國家食品藥品監督管理局藥品審評中心.藥品非臨床安全性研究（急性毒性、長期毒性、生殖毒性、遺傳毒性、致癌性、一般藥理學、依賴性、免疫毒性、局部毒性）技術指導原則[S].

[3] 柯英.硫酸阿米卡星注射液上市后安全性及臨床應用真實世界研究[J].藥學與臨床研究.2021，29（4）：305-308.

[4] 李耀庭，梁金強，黃芝瑛.藥物安全性評價研究中供試品的檢測與分析[J].藥物評價研究.2015，37（6）：541-543.

[5] 國家食品藥品監督管理總局.非臨床安全性評價供試品檢測要求的Q&A[S].

[6] 胡曉敏，王慶利.重視新藥非臨床安全性評價供試品的檢測[J].中國臨床藥理學雜志，2014，30（9）：838-839.

作者簡介： 謝愛芳（1978—），女，工程師，華潤雙鶴利民藥業（濟南）有限公司，研究方向：藥事管理。