60%乙·嗪·滴辛酯乳油的高效液相色譜分析

王利，李艷華，杜輝*

(1.南通江山農藥化工股份有限公司，江蘇 南通 226017；2.哈爾濱利民農化技術有限公司，黑龍江 哈爾濱 150025)

60%乙·嗪·滴辛酯乳油是由乙草胺、嗪草酮、2，4-滴異辛酯三種有效成分復配而成的旱田除草劑，在大豆、玉米播種后出苗前進行土壤封閉處理，可一次性防除大豆田、玉米田等旱田多種雜草，除草譜廣、防效穩定[1]。

本文采用高效液相色譜法[2]，在同一色譜條件下，實現了乙草胺、嗪草酮、2，4-滴異辛酯的有效分離。該方法簡便、準確，精密度和準確度均能達到定量分析的要求，適用于產品質量的檢測分析。

1 實驗部分

1.1 儀器和試劑 日本島津LC-10A液相色譜儀(帶紫外檢測器)；色譜工作站；超聲波清洗器；分析天平；微量注射器50μL；甲醇(色譜純)；乙腈(色譜純)；磷酸(色譜純)(均為美國天地公司)；超純水(電阻率：25℃，18.2MΩ·cm)；乙草胺標準品(質量分數99.5%)；嗪草酮標準品(質量分數99.5%)；2，4-滴異辛酯標準品(質量分數99.4%)，國家農藥質量監督檢驗中心(沈陽)提供。

1.2 色譜條件 色譜柱：200mm×4.6mm(i.d.)不銹鋼柱，內裝C18填充物，粒徑為5μm；流動相：A泵：乙腈，B泵：酸水(磷酸調pH值=2.5)；按時間程序運行：0～7min時，A：B=50：50，7～19min時，A：B=75：25， 19～20min時，A：B=85：15，35min停止。流速1.0mL/min；柱溫：室溫；檢測波長：236nm；進樣量5μL。保留時間： 嗪草酮5.2min；乙草胺13.4min；2，4-滴異辛酯30.4min。色譜圖(圖1、圖2)。

圖1 標樣溶液高效液相色譜圖

圖2 60%乙·嗪·滴辛酯乳油高效液相色譜圖

1.3 實驗方法

1.3.1 標準溶液的配制 準確稱取乙草胺標準品0.20g(精確至0.02mg)、嗪草酮標準品0.03g(精確至0.02mg)、2，4-滴異辛酯標準品0.09g(精確至0.02mg)于50mL容量瓶中，加入約45mL甲醇溶解，在超聲波上脫氣5min，使樣品全部溶解，冷卻至室溫，定容，搖勻。

1.3.2 試樣溶液的配制 準確稱取試樣0.5g(精確至0.02mg)于50mL容量瓶中，加入約45mL甲醇溶解，在超聲波上脫氣5min，使樣品全部溶解，冷卻至室溫，定容，搖勻。

1.4 測定 在上述操作條件下，待儀器基線穩定后，連續注入數針標樣溶液，待相鄰2針響應值變化<1.5%后，按照標樣溶液、試樣溶液、試樣溶液、標樣溶液的順序進行測定。

1.5 計算 乙草胺(或嗪草酮、2，4-滴異辛酯)質量分數按下式計算：

式中A1：標準品溶液中，乙草胺(或嗪草酮、2，4-滴異辛酯)峰面積的平均值；A2：試樣溶液中，乙草胺(或嗪草酮、2，4-滴異辛酯)峰面積的平均值；m1：乙草胺(或嗪草酮、2，4-滴異辛酯)標準品稱樣量(g)；m2：試樣的質量(g)；ω：標準品中乙草胺(或嗪草酮、2，4-滴異辛酯)的質量分數(%)。

2 結果與討論

2.1 有效成分的特異性 液相色譜操作條件：

檢測器：二極管陣列檢測器；

色譜柱：250mm×4.6mm(i.d)不銹鋼柱，內裝C18填充物，粒徑為5μm；

流動相：A泵：乙腈，B泵：酸水(磷酸調pH值=2.5)；按時間程序運行：0～7min時，A：B=50：50，7～19min時，A：B=75：25， 19～20min時，A：B=85：15，35min停止。

稱取適量乙草胺、嗪草酮、2，4-滴異辛酯標準品置于一個50mL容量瓶中，取試樣置于另一個50mL容量瓶中，使用甲醇溶解，過濾，作為特異性溶液。

待儀器穩定后進樣，進行特異性測定。結果顯示未檢測到不純物，峰純度指數>0.99，表明特異性符合要求。

2.2 流動相的選擇 以常規的甲醇+水為流動相，2，4-滴異辛酯出峰時間太慢，效率太低，最終確定乙腈+水為流動相，按時間程序運行，樣品中各組分能很好分離，保留時間適中。

2.3 波長的選擇 考查不同波長下乙草胺、嗪草酮和2，4-滴異辛酯的響應值，在236nm處各組分均有較大吸收，響應值比例適當且無雜質干擾，最終選擇檢測波長236nm。

2.4 方法線性相關性試驗 準確配制5個不同濃度的乙·嗪·異辛酯標準溶液，分別進樣分析，得到響應值(表1、表2、表3)。以質量濃度為橫坐標，與其相應的峰面積為縱坐標，繪制線性關系曲線(圖3、圖4、圖5)。得到乙草胺線性回歸方程為y=0.793 7x+0.017 9，相關系數為0.999 7(n=5)、嗪草酮線性回歸方程為y=5.089 5x-0.008 7，相關系數為0.999 9(n=5)、2，4-滴異辛酯線性回歸方程為y=2.274 6x+0.064，相關系數為0.999 9(n=5)，說明在選定的條件下，各有效成分的響應值與其質量濃度有良好的線性相關性。

圖3 乙草胺線性關系曲線圖

圖4 嗪草酮線性關系曲線

圖5 2，4-滴異辛酯線性關系曲線

表1 乙草胺線性關系試驗結果

表2 嗪草酮線性關系試驗結果

表3 2，4-滴異辛酯線性關系試驗結果

2.5 方法精密度的測定 在選定的色譜操作條件下，對同一樣品重復測定5次，結果乙草胺、嗪草酮、2，4-滴異辛酯的標準偏差分別為0.085、0.032、0.077，變異系數分別為0.23%、0.63%、0.42%。表明該方法的精密度較高(表4)。

表4 精密度試驗結果

2.6 方法準確度的測定[3]為了證明方法的準確度，做產品回收率試驗。方法是在定量的60%乙·嗪·滴辛酯乳油中加入已知含量的乙草胺、嗪草酮和2，4-滴異辛酯標準品，分析其含量，計算回收率，結果(表5)。乙草胺的回收率在98.65%～99.97%之間、嗪草酮的回收率在99.06%～99.69%之間、2，4-滴異辛酯的回收率在98.83%～99.95%之間，說明該測定方法具有較好的準確度。

表5 60%乙·嗪·滴辛酯乳油準確度測定表

3 結論

試驗結果表明，在本文建立的分析條件下，60%乙·嗪·滴辛酯乳油的各有效成分分離效果好，雜質干擾少，方法具有很好的精密度和準確度，分析速度較快、簡便、準確，適合工業化生產控制分析，是較為理想的分析方法。