不同去角方式對低日齡犢牛情感狀態的影響

谷田雨，王浩南，尹國安

（黑龍江八一農墾大學動物科技學院，大慶 163319）

近年來，越來越多的研究表明，動物也能夠體驗到多種高級情感，也就是說，動物也有豐富的主觀體驗，如消極的、中性的或積極的情感。對于動物來說，由于它們不能用語言表達他們的主觀體驗，所以直接評估其情感狀態是困難的。而對人類的研究表明，認知功能的幾個方面，包括注意力和記憶力，都會受到情感狀態的影響[1]。有研究發現去勢會減少幼畜的游戲行為[2]。游戲行為發生時長的減少可能與全身持續性疼痛有關。游戲行為是一種與內啡肽釋放相關的自我獎勵行為，游戲行為測試用于評估動物的情感狀態，處于低積極情感狀態的動物游戲行為會相應減少[3]。在良好的生存環境下，幾乎所有的幼年哺乳動物均會表現游戲行為[4]，當完成某項任務時，游戲行為也被作為獎勵[5]。例如，在一項選擇測試中，幼鼠對社交游戲的重視程度與獲得食物的程度一樣高[6]。然而，游戲行為不是動物生存所必需的，幼鼠在不利的條件下其游戲行為會減少甚至消失。幼齡有蹄哺乳動物在面臨母乳短缺或斷奶期表現較少的游戲行為[7]。因此，游戲行為可能是評估幼齡動物福利的重要指標[2]。

最近的研究試圖將動物認知過程的變化作為評估動物情感的一種方法[8]。農場動物遭受一次負面經歷（如恐懼、疼痛或慢性應激）后，會表現出悲觀等負面情緒[9]。相反，農場動物在豐富多樣的環境下會偏向于作出樂觀的判斷[10]。動物對環境中積極或消極刺激的感知，反映了它們的情感狀態[11]，異常的情感狀態使動物的正常生理狀態出現波動，并導致其偏好、動機等主觀意識出現偏差[12]。在人類的研究中發現處于消極情感狀態的人更傾向于以消極的方式應對刺激，表現出消極的認知偏差，而處于積極情感狀態的人則會表現積極的認知偏差[13]。情感狀態會影響注意力、記憶力及判斷偏差。這些由情感引起的認知變化已經在許多物種中得到驗證[8]。判斷偏差測試已被用來評估動物的長期情感狀態，與動物福利的關系也得到了廣泛的認可[14]。判斷偏差測試前期，給予動物積極和消極的線索，之后再給予動物模棱兩可的信息進行測試，當動物處于負面情感狀態時，對這些模棱兩可線索的反應時間會增加（即悲觀判斷偏差）[1]。本試驗研究在燒烙去角和去角膏去角兩種不同去角方式下，疼痛是否對犢牛造成情感狀態的影響，以及兩種去角方式之間是否存在差異。

1 材料與方法

1.1 試驗動物

試驗選用荷斯坦犢牛，由黑龍江省哈爾濱完達山奶牛養殖有限公司提供。

1.2 試驗設計

試驗選取40頭4日齡犢牛（16頭公犢，24頭母犢）進行學習訓練，訓練完成后隨機選取4頭母犢牛進行假去角，根據去角方式的不同將剩余犢牛分為兩組，第一組采用燒烙方式去角（以下簡稱燒烙組），第二組采用去角膏的方式去角（以下簡稱去角膏組），每組公犢牛8頭、母犢牛10頭。

1.3 飼養管理

犢牛欄內犢牛采用群養方式飼養，每日飼喂3次牛奶（分別為05:30、12:30、17:30），犢牛出生后第3天開始給水，出生7d后的犢牛供給充足的開食料（顆粒料）任其自由采食。每天清理糞便污染的墊草，清理后添加新墊草。其他飼養管理程序按照規?；鰳藴式y一進行。

1.4 犢牛訓練及去角

訓練圍欄由膠合板和鋼架組成，長為200cm、寬為140cm、高為150cm（圖1），圍欄內地面鋪有10cm厚的墊草，每星期更換一次新的墊草。電腦屏幕固定在圍欄門的對側，離地50cm高。在圍欄兩側距離門30cm、距離地面50cm處，分別設有切換球（用于屏幕圖片切換）與牛奶獲取口。圍欄設有監控設備，可對犢牛測試期間持續錄像記錄。

圖1 犢牛訓練圍欄

犢牛從5日齡開始，在每天早（05:30）、中（12:30）、晚（17:30）3個喂奶時間點進行訓練，在訓練過程中每次飼喂1.2～1.5L牛奶，每次訓練10～35min。到12日齡時使犢牛學會識別圖片且會自動切換圖片，建立紅色圖片是懲罰、白色圖片是獎勵的機制。

去角時間為13日齡11:30，去角順序與訓練順序相同，燒烙組使用智牧人去角器，加熱到預定溫度（600～800℃）燒烙5～7s，去角膏組選用內勒博士去角膏（成分：氫氧化鈣38%、氫氧化鈉21%、甘油19.8%、水21.2%），剃掉犢牛角芽周邊毛發，涂抹直徑大約2cm以覆蓋住角芽，所有犢牛去角均由同一名經驗豐富的獸醫完成。

1.5 游戲行為測定

在10日齡時對試驗犢牛進行標記，使用紅色蠟筆分別在犢牛的左身、右身、背部白色毛發處標記序號，并在生活圍欄內栓系6條麻繩作為玩具，連續拍攝4d記錄每頭犢牛玩繩的時間。

1.6 判斷偏差測試

判斷偏差測試時間為：犢牛去角前6h和去角后1.5h、6h、25.5h、30h。將60張純色圖片（白色、紅色各24張，飽和度為60%、40%、20%的紅色圖片各4張，且所有圖片對比度和銳度相同，在屏幕顯示圖片時亮度保持一致），統一處理，設置相同對比度及銳度；使用Microsoft office 2019軟件隨機排序，制成PPT用于測試。行為判定：觸碰到啟動切換球離開時記為觸碰一次，犢牛鼻尖距離屏幕5cm以內視為觸碰屏幕。獎懲機制：試驗中犢牛觸碰白色圖片給予獎勵（喂食牛奶）；觸碰紅色圖片給予懲罰（輕打頭部）；觸碰其他圖片時不予獎懲。

1.7 數據分析

將游戲行為情況進行配對T檢驗，與去角前基期值做比較，對去角方法的比較采用獨立T檢驗。判斷偏差測試對時間數據進行相關處理，各測試點的時間/基期時間得到比值，使用獨立T檢驗進行分析。

2 結果與分析

2.1 游戲行為

經配對T檢驗，與去角前對應時間基期相比，在去角后6～8h，燒烙組與去角膏組游戲行為時間均顯著降低（P＜0.05）。經獨立樣本T檢驗，兩種去角方式的游戲行為發生時間無顯著差異（P＞0.1）（圖2）。

圖2 不同去角方式對犢牛游戲行為時長的影響

2.2 判斷偏差測試

經獨立樣本T檢驗，與假去角組相比，燒烙組和去角膏組在去角后的四次測試中，對60%飽和度紅色圖片的反應時間均無顯著差異（P＞0.1），兩種去角方式之間也無顯著性差異（P＞0.1）（圖3）。

圖3 不同去角方式對犢牛選擇60%飽和度紅色圖片反應時間的影響

經獨立樣本T檢驗，與假去角組相比，燒烙組在去角后的四次測試中，對40%飽和度紅色圖片的反應時間無顯著差異（P＞0.1），去角膏組在去角后第1次、第2次測試中，對40%飽和度紅色圖片的反應時間高于假去角組，但無顯著性差異（P=0.08、P=0.088），存在升高的趨勢。兩種去角方式之間雖無顯著差異，但在第3次測試中燒烙組低于去角膏組（P=0.072），有下降趨勢（圖4）。

圖4 不同去角方式對犢牛選擇40%飽和度紅色圖片反應時間的影響

經獨立樣本T檢驗，與假去角組相比，燒烙組和去角膏組在去角后的四次測試中，對20%飽和度紅色圖片的反應時間均無顯著差異（P＞0.1），兩種去角方式之間雖無顯著性差異，但在第1次測試時燒烙組低于去角膏組（P=0.071），存在一定下降趨勢（圖5）。

圖5 不同去角方式對犢牛選擇20%飽和度紅色圖片反應時間的影響

3 討論

研究證實懸掛的麻繩可以作為犢牛的玩具，且犢牛一般會在下午喂奶后和上午喂奶前這兩個階段出現長時間的玩繩行為[15]。本試驗也得到相似的結果，犢牛在早上06:00～08:00及傍晚18:00～20:00喂奶后出現長時間的游戲行為，因此在分析去角對游戲行為影響時選取這兩個時間段。有研究人員對不同牛奶攝入量（6L、12L）的犢牛游戲行為進行比較，結果發現，低牛奶攝入量的犢牛游戲行為更少，同時他們還發現較早斷奶的犢牛（7周齡斷奶）游戲行為少于13周齡斷奶犢牛[7]。與群養犢牛相比，單獨飼養的犢牛游戲更少[16]。與假去角組犢牛相比，去角組犢牛在去角后玩耍行為減少[17]。即當動物受到損害（如疼痛、饑餓、生?。r，游戲行為時間較少[18]。Russhen等研究發現，在去角后的第二天，使用去角膏去角的犢牛玩耍次數低于未去角犢牛[19]。本研究也有相似結果，去角后24h犢牛游戲時間減少，隨后恢復到去角前的水平。去角后6～8h顯著低于去角前，這與Mintline等的研究結果相似[20]。即兩種去角方式都影響了犢牛的積極情感，使犢牛在去角后游戲時間減少，18～20h后恢復正常，兩種去角方式之間沒有差異。

Lecorps等研究使用對模棱兩可信息的反應時間，來檢測疼痛引起的情緒變化。犢牛在去角后6h觸碰高獎勵位置的時間增加，表明犢牛由于疼痛產生了消極的情感狀態[21]。用犢?？吹侥＠鈨煽蓤D片時的反應時間作為判斷偏差測試的指標，有研究人員認為反應時間延長是情感變化更敏感的表現[22]。以前的試驗很少有人在疼痛預計消散后繼續測試犢牛，Lecorps等研究發現，在去角后6h，燒烙去角對犢牛情感有顯著影響，而在去角后22和70h測試時，發現燒烙去角對犢牛情感無影響[21]。在本研究中，犢牛去角后1.5、7、24和48h進行了多次測試（第1、2、3、4次測試），目的是找到兩種去角方式引起犢牛疼痛的持續時間。研究發現，去角后犢牛對模棱兩可圖片的反應時間與未去角組無顯著差異，但去角膏組犢牛在去角后第1次測試和第2次測試對40%飽和度的紅色圖片反應時間較未去角組有升高趨勢，這些反應時間的增加，可能是去角后疼痛引起的。兩種去角方式之間雖無顯著性差異，但在第1次測試時對20%飽和度的紅色圖片反應時間和第3次測試時對40%飽和度的紅色圖片反應時間上，燒烙組低于去角膏組，說明去角膏組比燒烙影響更大。但兩種去角方式并沒有造成情感上的波動，可能是由于犢牛日齡比較小，對去角帶來的傷害沒有那么敏感，或者是群養犢牛的抗應激能力比單獨飼養的犢牛強，所以兩種去角方式未造成犢牛消極的情感狀態。

4 結論

燒烙和去角膏均會引發13日齡犢牛去角疼痛，但僅導致積極情感降低且在18h后影響消失。因此，犢牛在低日齡去角是一種生產中的更佳選擇。