豬流行性腹瀉的研究進展

朱向東 ，高 冉

（1.天津市動物疫病預防控制中心，天津 300402；2.天津瑞普生物技術股份有限公司，天津 300000）

豬流行性腹瀉（PED）是由豬流行性腹瀉病毒（PEDV）引起的一種高度接觸性豬腸道傳染病，以腹瀉、嘔吐、脫水和哺乳仔豬高死亡率為臨床特征。自2010年12月以來，PED在我國大面積暴發，2013年又席卷美國，給我國乃至世界的養豬業造成了嚴重的經濟損失。文章總結了PED的發現及流行、病原學、臨床癥狀、致病特征、診斷、疫苗、防控等，為科學防治豬流行性腹瀉提供參考。

1 PED的發現及流行

1971年，PED首次發現于英國一個育肥豬場，臨床表現與豬傳染性胃腸炎（TGE）極其相似，發病豬也表現為水樣腹瀉。隨后，PED在歐洲幾個國家發生流行，但直到1982年，該病才被統一命名為豬流行性腹瀉。從1973年開始，中國陸續出現關于PED的報道。但直到1984年，研究人員才通過熒光標記抗原和血清中和試驗首次證實了PED在中國的存在。2010年以前，我國PED主要以區域性流行和零星暴發為主。2010年10月開始，PED的流行逐漸呈現上升趨勢。PED疫情首先出現在華南地區，隨后迅速席卷全國，仔豬發病率和死亡率接近100%，給養豬業造成了巨大的經濟損失。2013-2015年，PED在美國、加拿大、墨西哥、哥倫比亞等國暴發，造成了巨大的經濟損失。到目前為止，PED仍在我國和世界廣泛流行，是影響養豬業健康發展的重要疫病之一。

2 病原學

PEDV屬于尼多病毒目冠狀病毒科冠狀病毒屬成員，基因組為單股正鏈RNA，基因組全長約為28 kb，主要的結構蛋白為纖突糖蛋白（S蛋白）、小膜蛋白（E蛋白）、膜蛋白（M蛋白）和核衣殼蛋白（N蛋白）。S蛋白是病毒的囊膜蛋白，與病毒的組織嗜性和毒力改變相關，其中S基因1~2 367 bp（S1）包含病毒主要的中和表位和受體結合域，這個區域的變化最能體現病毒的變異情況，是PEDV遺傳進化分析最常用的基因。N基因在各個結構蛋白中保守性最高，常被用于病毒鑒定實驗的目的基因。

3 臨床癥狀

豬自然感染PEDV的潛伏期一般為5～8 d，人工感染潛伏期僅為8～24 h。癥狀的嚴重程度與年齡呈負相關，年齡越小，癥狀越嚴重。保育豬和哺乳期豬感染PEDV的主要癥狀是食欲不振、水樣腹瀉和進食后嘔吐，病豬體溫略有升高，腹瀉持續3～4 d。育肥豬感染PEDV會出現腹瀉，持續1周左右，逐漸恢復正常，少數豬生長發育遲緩后恢復正常，病死率為1%～3%。母豬感染PEDV后臨床表現為厭食、嗜睡、反應遲鈍和持續腹瀉，約1周后恢復正常；成年豬感染PEDV后癥狀較輕，有的僅表現為嘔吐，感染較嚴重時會出現水樣腹瀉，一般3～4 d自愈。

4 致病機制

PEDV主要通過糞口途徑傳播進入豬體，但糞口途徑并不是該病唯一的傳播途徑。一些研究表明，乳汁、精液、含有PEDV的氣溶膠等都是PEDV潛在的傳播途徑。

當病毒表面的蛋白質吸附在靶細胞膜上并與特異性受體結合后，通過內吞作用和膜融合侵入細胞，完成病毒復制、病毒顆粒組裝等增殖過程。病毒在小腸上皮細胞的復制過程中，細胞器遭到破壞，腸道環境紊亂，病原體滋生，上皮細胞丟失增多。小腸是豬體吸收營養的主要部分，接觸面積減少，消化吸收功能紊亂，影響營養物質的吸收。食物未經消化吸收進入大腸，大腸內滲透壓升高，引起腹瀉、脫水，最終導致病豬死亡。

PEDV感染不同年齡和不同環境條件的仔豬，不同的毒株有不同的臨床和病理表現。典型的病理變化包括胃內未消化的白色凝乳，小腸擴張，充滿空氣或充滿淡黃色液體。腸壁擴張無彈性、松弛、變薄和透明，小腸絨毛萎縮、縮短和減少，除胃底黏膜和腸黏膜充血外，絨毛長度和絨毛長度與隱窩深度的比值減小。

5 診斷

PED的快速準確診斷對于有效控制疾病非常重要。目前臨床癥狀和組織病理學病變可用于初步診斷，結合病原學診斷或血清學診斷做出最終診斷。病原診斷技術包括：病毒分離、免疫熒光檢測（IF）、免疫組化檢測（IHC）、抗原ELISA檢測和病毒核酸RT-PCR檢測。血清學診斷技術包括：間接免疫熒光抗體（IFA）試驗、病毒中和試驗（VNT）、抗體ELISA檢測、流動微球免疫熒光法（FMIA）等。

6 疫苗

疫苗免疫是目前控制豬流行性腹瀉最有效的方法，目前用于豬流行性腹瀉臨床防控的傳統疫苗主要包括細胞滅活疫苗、組織滅活疫苗和減毒活疫苗等。王明等人最初制備PEDV組織滅活疫苗，經后海穴位免疫后豬體可以獲得良好的免疫保護效果。1995年，馬思奇等制備豬傳染性胃腸炎和豬流行性腹瀉病毒雙重滅活疫苗，仔豬主動免疫保護率達到88.89%，免疫保護期也持續6個月。佟有恩等成功制備CV777株減毒活疫苗，研制TGEV和PEDV二價減毒活疫苗，2003-2006年間該疫苗在中國市場廣泛使用。2015年3月，馮力研究員研制的豬傳染性腸胃炎-豬流行性腹瀉-豬輪狀病毒三聯活疫苗保護率可達96.15%，仔豬被動免疫后保護期可達斷奶后7 d，主動免疫持續長達6個月。

目前，我國共有8個PEDV聯苗獲得了新獸藥證書，涉及PEDV疫苗毒株7個，分別為CV777株及其致弱毒株弱毒CV777株，AJ1102株及其致弱毒株AJ1102-R株，弱毒株ZJ08株，SCSZ-1株和LW/L株。PEDV毒株可以劃分為2個基因群：GI和GII。其中它們又可進一步劃分為GI-a、GI-b、GII-a和GII-b四個亞群。在這個分群體系中，經典株集中在GI群，流行株主要集中在GII群中。對PEDV疫苗株基因群進行分析，結果顯示，CV777株及其致弱毒株弱毒CV777株作為經典株，屬于GI-a亞群；ZJ08株屬于GI-b亞群；AJ1102株及其致弱毒株AJ1102-R株則屬于GII-b亞群。目前針對PEDV經典毒株及其致病機制的疫苗研究已取得階段性進展，但PEDV變異毒株頻繁出現，現有商品化疫苗與變異毒株的抗原性不匹配，導致保護效力和免疫效果不足。如果做的不好，將對我國乃至世界的養豬業造成嚴重的影響和巨大的經濟損失。

7 防控

做好豬流行性腹瀉的防控，首先應做到確診病因。豬流行性腹瀉病因復雜，其中病毒性致病因子至少包括豬傳染性胃腸炎病毒（TGEV）、豬流行性腹瀉病毒（PEDV）、豬A群輪狀病毒（PoRA）、豬德爾塔冠狀病毒（PDCoV）和豬急性腹瀉綜合征病毒（SADS-CoV）等；細菌性致病因子至少包括大腸桿菌、沙門菌和魏氏梭菌等。各種致病因子導致的腹瀉癥狀非常相似，難以通過臨床表現和病理變化加以區分。此外，2種以上病因混合感染情況較為普遍。因此，快速、準確確診病因對于豬流行性腹瀉的防控十分重要。

做好豬流行性腹瀉的防控，其次應加強診斷能力提升。養豬場戶應提高自身檢測水平或尋求專業實驗室進行技術支撐。堅決避免出現僅憑臨床癥狀進行判斷和一次檢測結果用幾年的情況出現。應建立定期監測和緊急檢測制度，及時進行場區內新毒株及流行特征分析，及時更新升級檢測方法以免造成變異毒株漏檢帶來較大風險。

做好豬流行性腹瀉的防控，還要持續做好免疫和生物安全。堅決摒棄將疫苗當治療劑和返飼等不科學的免疫行為。應在場區病原學和血清學調查的基礎上，科學合理地確定免疫程序，要對不同豬群的免疫進行統一規劃。嚴格的生物安全措施要做到多點飼養和全進全出，做到嚴格的消毒與空舍。此外，還要做到產仔舍保溫、避免應激等。