羔羊大腸桿菌病的診斷要點及防治措施

司天桃，張夢圓，李文彩，王克文，李 文

新疆維吾爾自治區哈密市畜牧工作站（哈密市農村生態工作站），新疆哈密 839000

大腸桿菌病是由致病性大腸桿菌感染而引起的一種急性細菌性傳染病[1]，羔羊感染后臨床特征主要表現為腹瀉、敗血癥。成年羊感染后，大多呈局部性感染，給養殖者造成嚴重的經濟損失[2]。

1 羔羊大腸桿菌病的發生和傳播

大腸桿菌是一種中等大小的革蘭氏陰性桿菌，屬于腸桿菌科埃希氏菌屬，該菌對外界環境的抵抗力較弱，一般常用的消毒藥劑或55 ℃加熱15 min 均可將其殺死[3]。此病原菌大量存在于外界環境中，此病的發生與氣候環境驟變、營養短缺、圈舍潮濕、臟亂等有關。大腸桿菌是條件性致病菌，一般不顯示致病性，只在氣候驟變、忽冷忽熱等環境條件刺激下，該病原菌在機體內大量繁殖，加之羊只抵抗力下降，引起內源性傳染。大腸桿菌病也可經過消化道、產道或臍帶感染[4]。大腸桿菌菌型復雜多樣，一種動物可以感染不同血清型的大腸桿菌，不同地區的同一品種的羊只感染的菌型也有所差異，大多數動物的特定疾病都是由1個至多個主要血清型的大腸桿菌所致，因其復雜多樣，又具傳染性，若得不到及時防控，會給養殖戶造成巨大的損失[5]。

2 診斷要點

2.1 臨床診斷

根據臨床特征，該病分為敗血型和腸型。

1）敗血型主要是大腸桿菌侵入血液中，并大量繁殖，引發菌血癥，繼而又產生大量毒素，毒素隨血液至全身組織器官，對臟器、器官功能造成損害，引發敗血癥。敗血型主要發生于2～6 周齡的羔羊，潛伏期可長可短，主要取決于羔羊的單次感染量和實際抵抗力。感染后的羔羊主要表現為體溫升高，達41～42 ℃，精神萎靡，視力倒退，頭常向一側傾斜，喜獨臥，磨牙，口吐白沫，關節疼痛，呼吸困難，進而導致昏迷，通常發病后24 h 內死亡[6]。

2）腸型主要為大腸桿菌在消化道內大量繁殖，腸道微生物菌群平衡失調，產生毒素，腸黏膜破損脫落，出現炎癥[2]。該型多發于2～8日齡的新生羔羊。發病初期，病羊體溫可升高至40～41 ℃，食欲下降，隨之出現腹瀉，呈灰白色稀糊狀，并夾帶有氣泡，偶見混有血液。隨疾病的變化發展，腸壁較薄，腸黏膜脫落，血管極易破裂，糞便中帶血液。病羊表現為腹痛、精神萎靡，嚴重虛弱脫水、喜臥、有時出現痙攣，不能站立。如未得到及時救治，可在發病后24～48 h 內死亡，死亡率高達50%[7]。

2.2 病檢特點

敗血型主要在羔羊的胸、腹腔和心包內出現大量纖維素性滲出液[8]，肘、腕關節腫大，且內有纖維素性膿性絮片和混濁的滑液；腦膜充血且伴有少許出血，常有腦溝膿性滲出物。腸型主要病因在消化道，真胃內乳凝塊發酵，腸黏膜水腫充血、出血，小腸黏膜內混有血液和氣泡，腸系膜淋巴結切面腫脹充血，伴有出血?？梢娎w維素化膿性關節炎，肺瘀血或有輕度炎癥。

2.3 實驗室診斷

1）樣品采集處理。在無菌條件下，采集病亡或發病羔羊的臟器、糞便組織，儲藏備用。挑取適量采集的樣品組織，分別進行分離培養，觀察菌落生長情況及其特征。一般培養基平板上會出現表面光滑、濕潤，呈半透明狀、明顯凸起的黃色或者白色的圓形菌落。再次挑取培養生長的單個菌落進行純化培養，備用。

2）鏡檢涂片。在無菌條件下，分別挑取適量采集的樣品組織，分別制成涂片，并進行革蘭氏染色，然后鏡檢觀察涂片，可發現病死和發病羔羊的臟器、糞便組織涂片中存在大量革蘭氏陰性桿菌。

3）病菌16S rRNA 序列分析。對分離培養備用的病菌進行DNA 提取，并將分離菌株DNA 作為模板，設計引物和序列，確定PCR 反應體系，進行PCR擴增。經瓊脂糖凝膠電泳檢測PCR 擴增產物后，送生物工程有限公司進行測序。然后，利用BLAST 分析測序結果，構建系統進化樹，并對該病原菌的同源性進行比對。

4）LAMP 技術。蔡樹東等[9]發現環介導等溫擴增技術（LAMP）是一種恒溫核酸擴增技術[10]，它與傳統的PCR 技術相比，具有時間短、靈敏性高、特異性強、產物易檢等特點。該技術可通過2 對特異性引物對目的序列的6 個區域退火雜交，利用BstDNA聚合酶的催化作用，在恒溫（60～65 ℃）條件下，溫育30～60 min，實現對目標序列的批量擴增[11]。該技術可直接通過肉眼觀察其是否有白色焦磷酸鎂沉淀產生來判斷該病菌，也可通過添加羥溴化乙淀（EB）、基萘酚藍（HNB）、鈣黃綠素或SYBRGreenI 等熒光染料進行顯色觀察來判斷。

3 防治措施

3.1 加強科學飼養管理

科學的飼養管理技術是防治大腸桿菌病的有效方法。根據羔羊的營養需求，合理喂養，制定科學的飼養標準和方法，以促進羔羊健康和正常發育，防止因營養缺乏而發病。加強飼養衛生，建立良好的生長環境，做好圈舍清潔衛生。圈舍內溫度過低過高，潮濕，氨氣、二氧化碳濃度過高，都能降低羔羊皮膚黏膜的抵抗力而誘發此病，因此圈舍內一定要做到通風良好、空氣清爽，光照充足，冬季保溫防寒，夏季涼爽防暑，防止此病發生。飼養初生羔羊，除應保證圈舍有適當的溫度外，要盡早使其吃到初乳，提高幼羔羊母源抗體和免疫球蛋白的水平，增強幼羔羊抗病能力[12]。

3.2 做好引進種羊的檢疫、防疫工作

自繁自養不僅可以避免購買帶病羊只，也有利于羔羊的飼養，引進種羊不能從疫區購買，確實需要引入種羊時，要對買入的羊只進行隔離檢疫1～2個月，確定健康無病后，才能與原來的羊只進行混養；隔離檢疫期間，應針對此病進行預防接種，以提高羊只免疫力。

3.3 建立合理的防疫制度

羊場（羊圈）應建設在遠離公路、村鎮、工廠、學校的地方；羊場內的生產區和生活區應分開；入口應設消毒池和更衣室，羊場工作人員和飼養員需更換工作服和鞋后才可進入生產區。飼養員要使用固定的用具和設備，不能混用。工作服、鞋和用具要經常消毒清洗，保持清潔。工作人員要定期及時更換消毒池內的消毒藥水，保證有效消毒濃度。禁止在生產區屠宰、解剖病羊，隨意亂扔、亂放死亡病羊。

3.4 進行圈舍消毒制

羊圈消毒的目的是為了殺滅外界環境中存在的各種病原體，也是切斷病原菌傳播途徑的一項有效措施。因此，在進行羊圈消毒時，要根據圈舍的大小、墻壁、地面的結構、病原體的種類及其對外界環境的抵抗力，選擇適用的消毒藥物種類、消毒方法及消毒藥的劑量，然后均勻地噴灑羊圈的墻壁、護欄、地面等。消毒完畢后要用清水清洗飼料槽，以除去消毒藥味。

3.5 按時預防接種疫苗

在母羊懷孕期或羔羊出生后，按接種程序接種相關疫苗，間接或直接使羔羊獲得免疫抗體，從而防止病菌的感染和傳播。

3.6 做好檢疫

掌握羊群健康水平、了解羊群疫情動態和防治是檢疫工作的主要目的。檢疫人員要對原有羊只進行定期檢疫，從外地引進羊只時應進行臨時檢疫（變態反應、血清學試驗及臨床觀察等）。及時調查本地民間或牧場羊只中的疫情，有助于分析此病的流行趨勢，這些對及時做好大腸桿菌病防疫工作十分重要。

3.7 阻斷傳染源

當發生羔羊大腸桿菌病時，要及時阻斷傳染源，創造良好的圈舍環境條件。首先，應做好羊群圈舍環境消殺工作，勤通風、勤打掃，及時清理圈舍中的糞便，避免糞便等排泄物污染飼料和飲水，所有設備及羊只的活動場所及時進行定期消毒。同時，為了避免出現病原菌對消毒劑的抗性，應交替使用不同消毒劑。其次，在養殖過程中要勤觀察，若發現疑似病例，應將其隔離并對其給予治療，及時對圈舍進行徹底消毒，避免擴大疫情。

3.8 病羊的尸體處理

掩埋、焚燒、加工利用等是處置病羊尸體的有效方法，可根據其各自優缺點、具體情況和處置條件進行選擇。

3.9 病羊糞便的處理

病羊的糞便中通常含有大量病原體，必須妥善處理。病羊糞便的處理方法主要有燒毀、化學藥品處理和堆積發酵。其中，經過數個月的堆積發酵后，可消滅病原體且不損耗肥料，因此，堆積發酵法最為常用。燒毀或化學藥品處理，既要花費經費，又會損失大量有價值的肥料，并且通常不能消滅病原體，因此很少使用此方法。

4 藥物治療

治療該病要做到早診斷、早治療。常用藥物有：氯霉素15 mg/kg，靜脈或肌肉注射，2 次/d；新霉素0.6 萬單位/kg，內服或肌注，2～3 次/d；多粘菌素，1 萬單位/kg，肌肉注射，2 次/d；黃連素，內服0.5～1.0 g，3 次/d；硫酸黏菌素預混劑，內服0.005～0.010 g/kg，2～3 次/d。同時，應注意補充葡萄糖和維生素，保護胃腸黏膜、調整胃腸機能等。此中藥方也可治愈該?。荷剿?0 g；白術15 g；黃連、茯苓、白頭翁、訶子肉、白芍各10 g；秦皮、山萸肉各12 g；甘草6 g；干姜5 g；煎汁300 mL，每只病羔羊灌服10 mL，2 次/d，連用3 d。

5 結 語

想要有效防治羔羊大腸桿菌病，必須掌握其發病原因和傳播及診斷要點，根據臨床診斷或實驗室診斷，準確診斷該病。結合實際情況，采用“綜合防治”措施，加強檢疫和飼養管理、按時接種疫苗、做好圈舍消毒、做好病羊尸體和糞便的處理等；嚴禁引進病羊，阻斷傳染源，防患于未然。通過以上防治措施，可有效防治羔羊大腸桿菌病的發生與傳播。但因此病抗藥性較強，在藥物治療前應進行病菌藥敏試驗，以達到更高的治療效果。