犬傳染性肝炎的診斷與防治

楊美蘭，繆祥虎，鄭廣云，賈柱元

1.云南省曲靖市獸藥飼料監察所，云南曲靖 655000；2.云南省曲靖市畜禽改良工作站，云南曲靖 655000

隨著生活水平的不斷提高，飼養寵物的人群也越來越多。犬的傳染性疾病個體發病率也隨之增多，而傳染性肝炎較為常見和多發，給養犬業造成了極大的危害。因此，對犬傳染性肝炎作出診斷并進行綜合治療，對于控制病情的發展、減小養犬業損失有重要的意義。

1 病原與流行病學

犬傳染性肝炎（infectious canine hepatitis，ICH）是犬的一種急性、高度接觸性敗血性傳染病，由感染犬傳染肝炎病毒（ICHV）引起。犬傳染性肝炎病毒又稱犬腺病毒（canine adenovirus，CAV），屬腺病毒科、乳腺病毒腺病毒屬，呈球形，無囊膜，根據血清學可分為犬腺病毒I 型和腺病毒II 型[1]。其中，CAV1 引起多器官出血，以肝臟出血病變最明顯，而CAV2 主要引起呼吸道發生病變。犬腺病毒易在犬腎和睪丸細胞內增殖，也可在豬、豚鼠和水貂等的肺和腎細胞中有不同程度增殖，出現細胞膿腫變圓、聚集成葡萄串樣典型細胞病變，也可產生蝕斑。感染細胞內常有核包涵體，核內病毒粒子呈晶格狀排列[2]。

該病毒在低溫條件下抵抗力較強，能長時間存活，對熱不耐受，60 ℃3～5 min 即可滅活；對乙醚、氯仿有耐受性，在室溫下能抵抗95%乙醇達24 h；苯酚、碘酊、氫氧化鈉和甲醛能有效殺滅該病毒。犬傳染性肝炎對犬、狐（銀狐、紅狐）和浣熊易感性較強，可發生于任何季節，但春初、秋末、冬季發病率相對較高。任何種類、性別和年齡階段的犬都能發生該病，1 歲以內的幼犬病死率最高。病犬及帶毒犬是主要傳染源。在感染的急性型階段，病毒分布于犬的全身各組織，通過分泌物和排泄物排出體外污染周圍環境。病愈犬雖有終身免疫力，但6 個月后仍能從其尿液中檢測到犬腺病毒[3]。

2 臨床癥狀與病理變化

患傳染性肝炎的病犬，按其癥狀發生的程度分為最急性、急性、慢性和無典型癥狀型4 種，按其臨床癥狀表現分為肝炎型和呼吸型2 種[4]。

肝炎型主要由犬腺病毒I 型病毒引起。病犬多表現出精神沉郁，食欲下降，飲欲增強，腹痛、腹瀉、嘔吐，糞便中帶血，黏膜蒼白或者輕度黃染，偶爾可見齒齦發生出血。肝臟損傷嚴重時會出現黃疸，黏膜可見大面積黃染。急性病犬體溫升高達40 ℃以上，體溫呈馬鞍型變化曲線，出現畏寒，結膜發炎，眼、鼻可見漿性黏性分泌物。犬傳染性肝炎病毒進入眼房后，能在角膜表面的內皮細胞中生長，產生包涵體并擴散到內皮細胞中，從而導致病犬或康復犬單眼或雙眼出現暫時性角膜渾濁，引起“藍眼病”的臨床癥狀。肝炎型病犬多出現蛋白尿或膽紅素尿，呈現呼吸變快、心搏動增強等癥狀。較輕的病例無典型臨床癥狀，只見食欲下降、畏寒、體溫稍高，持續時間一般2～3 d。肝炎型病犬最突出的病理特征是病犬出現不同程度的皮下水腫，多器官出現充血、出血，其中，消化道和膽囊出血明顯。肝臟明顯腫大，切面外翻，淤血，呈紫黑色，表面許多暗紅色斑點；膽囊腫大，膽汁變黏稠，膽囊壁水腫、增厚、出血。經組織學觀察，肝臟出現壞死病灶，肝細胞變性腫大，明顯可見包涵體，肝竇發生萎縮；膽囊上皮細胞發生變性、壞死和脫落，固有層出現水腫，黏膜肌層發生萎縮變形；大腦血管周圍出血，內皮細胞大量增生，核內可見包涵體[5]。

呼吸型主要由犬腺病毒II 型病毒引起。病犬常出現明顯的呼吸道癥狀，體溫多高達41 ℃左右，咳嗽，呼吸加速，流漿液性或膿性鼻液。隨著病程的發展，淋巴結和扁桃體發生腫大，心率明顯加快，多伴有咽喉炎癥狀。在體溫上升期，血檢可見白細胞減少，血細胞沉降率加快，血凝時間延長等變化。最突出的病理變化是體溫升高明顯，可視黏膜出現潮紅，扁桃體和淋巴結腫脹、充血，唾液腺、支氣管、肺臟等器官腫大、出血。

3 診斷技術及要點

3.1 臨床癥狀診斷

病犬在發病早期可檢測出蛋白尿或膽紅素尿，血清中谷丙轉氨酶、谷草轉氨酶、白蛋白、乳酸脫氫酶和肌酸激酶均明顯高于參考范圍，隨著病程的發展出現“藍眼”病或在組織內皮細胞觀察到包涵體[6]。依據出現的這些典型臨床癥狀和剖檢病理變化對該病的確診有一定的診斷意義。

3.2 病毒分離鑒定

犬傳染性肝炎病毒多存在于病犬扁桃體、肝臟、脾臟等組織器官中，無菌采集這些器官用無血清DMEM 制成組織懸液，離心后取上清液接種于MDCK 細胞，37 ℃恒溫培養3～5 d，出現典型的細胞病變即可確診。

3.3 酶聯免疫吸附試驗

采集分離被檢犬血清，用犬傳染性肝炎病毒免疫犬獲得的血清為標準陽性血清，無犬傳染性肝炎病毒的犬血清為標準陰性血清，按照酶聯免疫吸附試驗的操作步驟進行檢測。該方法不僅可用于未接種犬傳染性肝炎疫苗病犬的診斷，還可以檢測免疫接種疫苗犬的抗體保護水平。

3.4 免疫酶組織化學法

采集病犬肝臟、扁桃體等新鮮組織，按常規方法制作成冰凍石蠟切片，過氧化氫-甲醇溶液37 ℃20 min 去內源酶，用胰蛋白酶溶液消化處理2 min以暴露抗原，漂洗、封閉，加標準血清，漂洗后再加酶標記物，漂洗后蘇木精襯染，脫水、封片，觀察到被檢組織細胞胞漿、偶見細胞核呈黃色至棕褐色著染，即可判定犬傳染性肝炎病毒抗原陽性。

3.5 犬傳染性肝炎快速檢測卡檢測

犬傳染性肝炎快速檢測卡是對犬傳染性肝炎方便快捷的一種診斷方法，分為抗原檢測試紙和抗體檢測試紙，在臨床運用中較多用抗原檢測試紙來進行檢測診斷。傳染性肝炎檢測方法：用棉簽涂抹眼、鼻，口腔流液或伸入肛門內直腸進行采樣，插入裝有緩沖液的樣品管內，混勻成待檢液，用傳染性肝炎檢測卡做樣品檢測，T 線和C 線同時出現則為陽性，只出現C 線為陰性。該方法是臨床上快速檢測犬傳染性肝炎的重要檢測方法。

4 防治措施

1）主要遵循抗病毒、消炎、保肝、補液、解毒的原則進行對癥治療。該病無特效藥，主要采取對癥治療的方法。發病初期，給病犬注射犬傳染性肝炎特異性高免血清抑制病毒擴散，每天注射葡萄糖鹽水，配合使用抗生素、消炎藥抗感染治療，輔助使用三磷酸腺苷、輔酶A、肌苷、干擾素等增強機體的抵抗力，出現出血癥狀可使用安絡血或止血敏對癥治療，高熱病犬肌注板藍根注射液或安乃近注射液，使用肝復肽等藥物進行保肝治療。

2）大量的研究報道也表明，中西醫結合治療法有較好的療效。在中藥方劑中，防風、荊芥、車前子、白菊花、蔓荊子能消風明目，清熱解毒為主，川芎、當歸尾、紅花活血散瘀消腫為輔，龍膽草、黃芩能瀉肝火為佐、白芷、厚樸除熱濕散腫為使，以上諸藥合用，共同起到散風清熱、消腫明目的作用。吳登堃等[7]運用中成藥明目地黃丸灌服治療犬傳染性肝炎，經過4年的臨床試驗，該療法療效明顯、確切，安全，操作方便。

3）加強飼養管理，增強犬的抗病機能。犬傳染性肝炎的傳播途徑主要是直接接觸傳染，病犬及治愈犬要單獨飼養隔離半年以上。定期對犬舍及周圍環境進行消毒，按時進行相關疫（菌）苗免疫接種。

4）免疫預防接種。該病沒有特效藥，及時進行預防接種能取到較好的保護作用。一般推薦對6 周齡或6 周齡以上的幼犬進行首次免疫，連續接種3次，每次間隔3 周，可獲得較好的免疫保護效果。