尾穗莧體外細胞毒活性成分的研究

劉賢賢，覃麗清，張 業，劉瑋欣，何瑞杰

（1. 桂林師范高等?？茖W校，廣西 桂林 541199；2. 桂林醫學院，廣西 桂林 541100；3. 神州細胞工程有限公司，北京 100041；4. 廣西壯族自治區中國科學院廣西植物研究所 廣西植物功能物質與資源持續利用重點實驗室，廣西 桂林 541006）

尾穗莧（Amaranthus caudatusL.）為莧科（Amaranthaceae）莧屬（AmaranthusL.）一年生草本植物，具有藥食兩用的特性，在我國大部分地區均有種植。尾穗莧營養豐富[1-2]，同時因其富含黃酮[3]、有機酸[4]、多糖[5]等化學成分而具有抗氧化[3,6-7]、抗腫瘤[8]、增強免疫力[9]等作用。為充分發掘該植物的藥食兩用價值，本研究以尾穗莧為研究對象，分別用不同溶劑對尾穗莧進行提取，分離出單體化合物，單體化合物的結構經多種核磁共振譜、熔點及高分辨質譜數據鑒定，隨后采用MTT法研究單體化合物的細胞毒活性，以冀為尾穗莧的進一步研究開發提供支持。

1 儀器與材料

1.1 儀器

M1000酶標儀（Tecan公司）；KQ5200DE 型數控超聲波清洗器，FB224自動內校電子分析天平（上海舜宇恒平科學儀器）；RE2000B旋轉蒸發儀（上海亞榮生化儀器）；ZF-8型暗箱四用紫外分析儀（上海嘉鵬科技）；500 MHz Bruker Avance Ш HD核磁共振波譜儀（瑞士布魯克公司）；依利特P270半制備高效液相（大連依利特）；MAT 95XP高分辨質譜（美國Thermo）；SP-MAX3500FL多功能熒光酶標儀（上海閃譜）。

1.2 材料

尾穗莧全草由貴州省特色生物科技有限公司提供，經廣西植物研究所韋發南研究員鑒定為莧科莧屬植物尾穗莧（Amaranthus caudatusL.），標本（編號：20120926）被保存于桂林師范高等?？茖W?；瘜W系實驗室。RPMI Medium 1640，胎牛血清，DMEM（Gibco）；噻唑藍（Sigma-Aldrich）；甲醇，乙醇，石油醚，乙酸乙酯，正丁醇，二甲基亞砜（分析純，西隴化工）；5-氟尿嘧啶（上海阿拉?。?。

1.3 細胞

肝癌SMMC-7721細胞，HepG2細胞（中科院細胞研究所）。

2 方法

2.1 提取與分離

稱取干燥尾穗莧200 g，粉碎，分別以甲醇、70 %乙醇、石油醚、乙酸乙酯、正丁醇和水為提取溶劑，在溫度為50～55 ℃，頻率為80～100 Hz條件下超聲提取，第一次超聲提取2 h，料液比為1:3，第二，三次物料比超聲提取1 h，物料體積比為1:2，合并三次提取液并減壓濃縮，得各溶劑粗提物，提取率分別為：16 %，26 %，12.5 %，14 %，15 %，12 %。

取干燥的尾穗莧粉末1 kg，分別用70 %乙醇超聲提取3次，提取的條件為：溫度50～55 ℃，頻率80～100 Hz，第一次用3 L 70 %乙醇超聲提取2 h，第二、第三次用2 L 70 %乙醇超聲提取1 h，一共提取3次，合并3次的提取液，濃縮，得浸膏145 g。隨后取140 g浸膏上大孔樹脂D101（10.0 cm×50.0 cm），以乙醇-水（0:100，10:90，40:60，70:30，100:0，v/v）為流動相進行洗脫，得到5個組分Fr-1～Fr-5。組分Fr-3（52 g）用少量甲醇溶解，55 g硅膠（100目）拌樣，過硅膠柱層析（500 g，200～300目，6.0 cm×50.0 cm），依次用氯仿-甲醇（l00:0～100:50，v/v）常壓下進行梯度洗脫，合并相同流份，得到10個亞組分Fr-3-1～Fr-3-10。Fr-3-3部分（4.9 g）過聚苯乙烯基反相樹脂（MCI）層析柱（3.0 cm×20.0 cm），用甲醇-水（0:100～100:0）梯度洗脫，得到Fr-3-3-1～Fr-3-3-10亞組分。Fr-3-3-1（1.1 g）通過半制備液相（Amethyst，10 mm×250 mm，5 μm），以甲醇-水（20:80～30:70，v/v；流速2 ml/min）洗脫，得化合物4（tR= 20.5 min，16.0 mg）和10（tR=30.5 min，1.2 mg）。再將Fr-3-3-2（1.3 g）通過半制備液相，以甲醇-水（20:80～16:84，流速2 ml/min）洗脫，得化合物3（tR=23.1 min，10.0 mg）和化合物5（tR=25.8 min，24.1 mg）。Fr-3-4（5.1 g）過MCI柱（3.0 cm×20.0 cm），用甲醇-水（0:100～100:0）梯度洗脫，得Fr-3-4-1～Fr-3-4-10亞組分。Fr-3-4-4（1.8 g）通過半制備液相，以甲醇-水（45:55，v/v，流速2 ml/min）洗脫，再上凝膠色譜柱，以氯仿-甲醇（7:3）洗脫，得化合物1（9.0 mg）、化合物2（6.1 mg）。Fr-3-4-6（2.1 g）上半制備液相，以甲醇-水（60:40～70:30，v/v；流速2 ml/min）洗脫，得化合物6（tR=10.5 min， 1.6 mg）、7（tR32.5 min， 1.4 mg）、8（tR=24.5 min， 1.8 mg）、9（tR=26.2 min， 1.1 mg）。

2.2 體外細胞毒活性實驗

用胰蛋白酶消化80 %～90 %匯合度的單層細胞，將細胞收集到含血清的培養基中。離心細胞懸液，使細胞沉積下來，用培養基重懸細胞。將細胞稀釋至2.5×104～50×104個/ml，向96孔板中加入180 μl/孔細胞懸液。將培養板放至培養箱，于5 % CO2、37 ℃ 濕潤環境中溫育24 h，細胞進入指數生長期時加入藥物。

將對數生長期細胞按5×107個/L的密度，接種于96孔板，每孔180 μl。細胞貼壁后，分為陰性對照（等量RPMI-1640）組、陽性藥組（5-氟尿嘧啶，10-4mol/L）、5個10倍梯度（0.01，0.1，1.0，10，100 μg/ml）的藥物樣品組和溶媒對照（含0.5 %乙醇的RPMI-1640）組。每組設5個平行孔。各孔加入相應藥物20 μl。于結束培養48 h前4 h加入5 g/L MTT溶液，20 μl/孔。結束培養后，吸上清棄去，加入DMSO，200 μl/孔，待細胞內生成的藍紫色甲臢完全溶解后，用酶標儀于570 nm處檢測各孔的光密度（optical density，OD）值。重復實驗3次。

先用100% DMSO助溶藥物，然后用無血清高糖DMEM將藥物稀釋，制備4個藥物濃度（使助溶劑DMSO最終濃度為1 %），陰性對照為無血清高糖DMEM（含1%DMSO），陽性對照為5-氟尿嘧啶，所設藥物濃度同藥物組（均含1 % DMSO），每個濃度重復3孔。細胞貼壁，長至50 %～60 %匯合度時加入20 μl藥物，各濃度重復3孔。藥物作用48 h后，去除各孔中的培養基（目的是避免藥物本身顏色干擾），每孔加入200 μl新鮮的培養基，同加入濃度為5 mg/ml的 MTT 20 μl/孔，于37℃濕潤環境中溫育4 h，然后棄去孔中的培養基，加入150 μl DMSO，以溶解甲臜結晶，振蕩搖勻，10 min內在490 nm處記錄吸光值。

按下列公式計算細胞抑制率，用Graphpad Prism 5.0計算IC50值。

抑制率（%）=[（陰性對照孔OD值-實驗孔OD值）/陰性對照孔OD值]×100

所得數據以IC50±SD表示，采用單因素方差分析進行組間比較。設定P＜0.05時，具有統計學意義。

2 結果與分析

從尾穗莧70%乙醇提取物中分離鑒定了10個化合物，其結構見圖1，其中化合物1～5為首次從該植物中分離到?；衔?對人肝癌細胞系HepG2和SMMC-7721具有較強的體外抗腫瘤細胞毒活性。

圖1 化合物1～10的化學結構

2.1 化合物結構鑒定

化合物1：黃色晶體（甲醇-水），mp 255～256 ℃，微溶于甲醇，難溶于水。紫外燈（254～365 nm）照射下顯黃色，噴AlCl3熒光變成黃綠色，故推斷其為黃酮類化合物。HR-ESI-MSm/z：447.0930 [MH]-，結合碳譜數據推斷其分子式為C21H20O11。1H NMR（500 MHz，DMSO-d6）δ：6.43（1H，s，H-2），6.73（1H，d，J=2 Hz，H-6），6.79（1H，d，J=2 Hz，H-8），7.40（1H，d，J=2.4 Hz，H-2’），6.88（1H，d，J=8.4 Hz，H-5’），7.44（1H，dd，J=8.4，2.4 Hz，H-6’），12.95（s，5-OH），5.06（1H，d，J=8.8 Hz，H-Glc-1），3.25～3.70 [6H，m，H-Glc-（2-6）]。13C NMR（500 MHz，DMSO-d6）δ：182.0（C-4），164.5（C-7），163.0（C-2），161.1（C-5），156.9（C-9），149.9（C-4’），145.8（C-3’），121.4（C-1’），119.2（C-6’），116.1（C-5’），113.6（C-2’），105.3（C-3），103.2（C-10），99.9（C-Glc-1），99.5（C-6），94.7（C-8），77.2（C-Glc-4），76.4（C-Glc-3），73.1（C-Glc-2），69.5（C-Glc-5），60.6（C-Glc-6）。以上數據與文獻[10]中的數據基本一致，故鑒定該化合物1為木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷。

化合物 2：黃色晶體（甲醇-水），m p 198～199 ℃，溶于甲醇-氯仿，難溶于水，在紫外燈（254 nm）照射下顯黃色，噴AlCl3熒光變成黃綠色，故判斷其為黃酮類化合物。HR-ESIMSm/z：285.0401[M-H]-，結合碳譜數據推斷其分子式為C15H10O6。1H NMR（500 MHz，DMSO-d6）δ：7.42（1H，dd，J=8.4，2.3 Hz，H-6’），7.39（1H，d，J=2.3 Hz，H-2’），6.89（1H，d，J=8.4 Hz，H-5’），6.44 （1H，d，J=1.6 Hz，H-8），6.17（1H，d，J=1.6 Hz，H-6），6.69（1H，s，H-3）。13C NMR（125 MHz，DMSO-d6）δ：181.7（C-4），164.1（C-2），163.9 （C-7），161.5（C-9），157.3（C-5），149.7（C-4’），145.7（C-3’），121.5（C-1’），119.0（C-6’），116.0（C-5’），113.4（C-2’），103.7（C-10），103.7 （C-3），98.8（C-6），93.8（C-8）。以上數據與文獻[11]中數據基本一致，故鑒定該化合物2為木犀草素。

化合物3：無色晶體（氯仿-甲醇），m p 270～271 ℃，溶于DMSO，甲醇，難溶于乙醇。HR-ESI-MSm/z：136.0620 [M+H]+，結合碳譜數據推斷其分子式為C5H5N5。1H NMR（500 MHz，DMSO-d6）δ：7.08（2H，br s，NH2），8.09（2H，br s，H-3，6），12.80（1H，br s，NH）。13C NMR（125 MHz，DMSO-d6）δ： 139.3（C-4，5），152.4（C-3，6），155.3（C-8）。以上數據與文獻[12]報道一致，故鑒定化合物3為1H-咪唑并[4,5-D]噠嗪-2-胺。

化合物4：白色晶體（甲醇-水），mp 167～168 ℃，溶于DMSO，甲醇，難溶于水。HR-ESI-MSm/z：245.0770 [M+H]+，結合碳譜數據推斷其分子式為C9H12N2O6。1H NMR （500 MHz，DMSO-d6）δ：3.49-4.00 [5H，m，H-Rib-（2’-5’）]，7.83（1H，d，J=8.1 Hz，H-6），5.81（1H，d，J=4.5 Hz，H-1’），5.64（1H，d，J=8.1 Hz，H-5）。13C NMR（125 MHz，DMSO-d6）δ：163.3（C-4），150.9 （C-2），140.8（C-6），101.8（C-5），87.8（C-Rib-1’），84.9（C-Rib-4’），73.7 （C-Rib-3’），70.0（C-Rib-2’），61.0（C-Rib-5’）。以上數據與文獻[13]報道一致，故鑒定化合物4為尿嘧啶核苷。

化合物5：白色晶體（氯仿-甲醇），m p 188～189 ℃，易溶于熱水、甲醇，難溶乙醇等有機溶劑。HR-ESI-MSm/z：243.0979 [M+H]+，結合碳譜數據推斷其分子式為C10H14N2O5。1H NMR（500 MHz，D2O）δ：7.64（1H，s，H-3），6.28（1H，t，J=6.8 Hz，H-6），1.88（3H，s，H-7），4.47（1H，m，H-1’），4.00 （1H，m，H-2’），3.82（1H，m，H-3’），3.76（1H，m，H-4’），2.28（2H，m，H-5’）。13C NMR（125 MHz，D2O）δ：166.6（C=O），151.8（C=O），137.5（C-6），111.5（C-5），86.5（C-1’），85.1（C-3’），70.5（C-2’），61.2（C-4’），38.5（C-5’），11.6（C-7）。以上數據與文獻[14]報道的一致，故鑒定化合物5為2-脫氧胸腺嘧啶核苷。

化合物6：白色粉末，易溶于甲醇。HR-ESIMSm/z：649.3581 [M+H]+，結合碳譜數據推斷其分子式為C35H52O11。1H NMR（500 MHz，CD3OD）δ：0.84 （3H，s，Me-26），1.22（3H，s，Me-27），1.31（3H，s，Me-25），1.42 （3H，s，Me-24），3.62（1H，d，J=3 Hz，H-3α），4.12（1H，m，H-2α），5.40（1H，m，H-12），4.65（2H，br s，=CH2），5.39（1H，d，J=7.5 Hz，H-Glc-1’）。13C-NMR（125 MHz，CD3OD）δ：44.8（C-1），70.7（C-2），77.5（C-3），54.1（C-4），52.0（C-5），21.8（C-6），33.5（C-7），41.1（C-8），48.0（C-9），37.5（C-10），24.1（C-11），124.2（C-12），144.5（C-13），41.1（C-14），28.8（C-15），24.5（C-16），48.0（C-17），47.8（C-18），43.0（C-19），149.5 （C-20），30.9（C-21），38.5（C-22），177.0（C-23），13.7（C-24），17.1（C-25），17.7（C-26），26.5（C-27），177.3（C-28），107.5（C-29），95.8 （C-Glc-1’），73.9（C-Glc-2’），78.7 （C-Glc-3’），71.0 （C-Glc-4’），78.3（C-Glc-5’），62.4（C-Glc-6’）。以上數據與文獻[15]報道一致，故鑒定化合物6為2β, 3β-二羥基-30-降冰油烷-12, 20（29）-二烯-23, 28-二甲酸28-O-β-D-吡喃葡萄糖酯。

化合物7： 白色粉末，易溶于甲醇。HR-ESIMSm/z：781.4735 [M+H]+，結合碳譜數據推斷其分子式為C42H68O13。1H NMR（500 MHz，CD3OD）δ：0.84 （3H，s，Me-26），0.88（3H，s，Me-24），0.95（3H，s，Me-30），0.97（3H，s，Me-29），0.99（3H，s，Me-23），1.11（3H，s，Me-25），1.19（3H，s，Me-27），2.89（1H，dd，J=13.7，5 Hz，H-18），5.29（1H，m，H-12），C-3位上糖片段端頭碳質子的化學位移δ：4.46（1H，d，J=7.5 Hz，H-Glc-1’），C-28位上糖片段端頭碳質子的化學位移δ：5.42（1H，d，J=7.5 Hz，H-Glc-1’’）。13C NMR（125 MHz，CD3OD）δ：39.6（C-1），26.7（C-2），90.7（C-3），40.6（C-4），56.7（C-5），19.3（C-6），33.1（C-7），40.1（C-8），48.0（C-9），37.7（C-10），24.4（C-11），123.6（C-12），144.8（C-13），42.6（C-14），28.2（C-15），26.2（C-16），47.8（C-17），42.3（C-18），47.2（C-19），31.5（C-20），34.7 （C-21），33.2（C-22），28.2（C-23），16.4（C-24），16.7（C-25），17.7（C-26），26.1（C-27），178.3（C-28），33.5（C-29），23.8（C-30），C-3位上糖基片段碳的化學位移δ：105.8（C-1’），73.8（C-2’），78.5（C-3’），71.6（C-4’），78.1（C-5’），62.4（C-6’），C-28位上糖片段碳的化學位移δ：95.6（C-1’’），74.9（C-2’’），78.8（C-3’’），71.4（C-4’’），78.3（C-5’’），62.6（C-6’’）。以上數據與文獻[15]報道一致，故鑒定化合物7為齊墩果酸3-O-β-D-葡萄糖苷-28-O-β-D-吡喃葡萄糖酯苷。

化合物8： 白色粉末，易溶于甲醇。HR-ESIMSm/z：797.4681[M+H]+，結合碳譜數據推斷其分子式為C42H68O14。1H NMR（500 MHz，CD3OD）δ：0.94（3H，s，Me-30），1.01（3H，s，Me-26），1.04（3H，s，Me-29），1.18（3H，s，Me-24），1.20（3H，s，Me-23），1.28（3H，s，Me-27），1.34（3H，s，Me-25），2.89（1H，dd，J=13.7，5 Hz，H-18），3.61（1H，d，J=3 Hz，H-3α），4.14 （1H，m，H-2α），5.29（1H，m，H-12），C-3位上糖片段端頭碳質子的化學位移δ：4.44（1H，d，J=7.5 Hz，H-Glc-1’），C-28位上糖片段端頭碳質子的化學位移δ：5.42（1H，d，J=7.5 Hz，H-Glc-1’’）。13C NMR（125 MHz，CD3OD） δ：44.6（C-1），70.1（C-2），91.2（C-3），39.3（C-4），56.7（C-5），19.3（C-6），33.1（C-7），39.5（C-8），47.5（C-9），37.7（C-10），24.4（C-11），123.4（C-12），144.7（C-13），42.7（C-14），28.4（C-15），25.2（C-16），47.6（C-17），42.3（C-18），46.2（C-19），31.5（C-20），34.7（C-21），33.6（C-22），28.9（C-23），16.4（C-24），17.4（C-25），17.6（C-26），26.1（C-27），178.3（C-28），33.2（C-29），23.7（C-30），C-3位上糖片段碳的化學位移δ： 105.8（C-1’），73.7（C-2’），78.4（C-3’），71.6（C-4’），78.0（C-5’），62.4 （C-6’），C-28位上糖片段碳的化學位移δ：95.6（C-1’’），74.9（C-2’’），78.8 （C-3’’），71.4（C-4’’），78.3（C-5’’），62.6（C-6’’）。以上數據與文獻[15]報道一致，故化合物8被鑒定為2β-羥基齊墩果酸3-O-β-D-葡萄糖苷-28-O-β-D-吡喃葡萄糖酯苷。

化合物9：白色粉末，易溶于甲醇。HR-ESIMSm/z：827.4423 [M+H]+，結合碳譜數據推斷其分子式為C42H68O14。1H NMR （500 MHz，CD3OD）δ：0.84 （3H，s，Me-26），1.22（3H，s，Me-27），1.31（3H，s，Me-25），1.42（3H，s，Me-24），0.95（3H，s，Me-30），0.97（3H，s，Me-29），2.89（1H，dd，J=13.7，5 Hz，H-18），5.29（1H，m，H-12），C-3位上糖片段端頭碳質子的化學位移δ：4.44（1H，d，J=7.5 Hz，H-Glc-1’），C-28位上糖片段端頭碳質子的化學位移δ：5.42（1H，d，J=7.5 Hz，H-Glc-1’’）。13C NMR（125 MHz，CD3OD） δ：44.7（C-1），70.6（C-2），77.4（C-3），54.1（C-4），52.0（C-5），21.8（C-6），33.5（C-7），41.1（C-8），48.0（C-9），37.5（C-10），24.4（C-11），123.6（C-12），144.8（C-13），42.6（C-14），28.2（C-15），26.2（C-16），47.8（C-17），42.3（C-18），47.2（C-19），31.5（C-20），34.7（C-21），33.2 （C-22），177.0（C-23），13.7（C-24），17.1（C-25），17.7（C-26），26.1 （C-27），178.3（C-28），33.5（C-29），23.8（C-30），C-3位上糖片段碳的化學位移δ： 105.8（C-1’），73.9（C-2’），78.7（C-3’），71.8（C-4’），78.2（C-5’），62.6（C-6’），C-28位上糖片段碳的化學位移δ：95.6（C-1’’），74.9（C-2’’），79.0（C-3’’），71.5（C-4’’），78.6（C-5’’），62.6（C-6’’）。以上數據與文獻[15]報道一致，故鑒定化合物9為3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-2β, 3β-二羥油酸-12-烯-23, 28-二甲酸28-O-β-D-吡喃葡萄糖基酯苷。

化合物10：白色粉末，易溶于甲醇。HRESI-MSm/z：387.2016 [M+H]+，結合碳譜數據推斷其分子式為C19H30NO8。1H NMR（500 MHz，CD3OD）δ： 2.42 （1H，d，J=15.0 Hz，H-2a），2.22（1H，d，J=15.0 Hz，H-2b），4.52（1H，s，H-4），6.06（1H，d，J=15.5 Hz，H-7），5.62（1H，dd，J=15.5，6.5 Hz，H-8），4.15（1H，q，J=6.0 Hz，H-9），1.35（3H，d，J=6.0 Hz，H-10），1.11（3H，s，H-11），1.05（3H，s，H-12），1.95（3H，s，H-13），4.36（1H，d，J=7.5 Hz，H-Glc-1’），3.26（1H，dd，J=9.5，7.5 Hz，H-Glc-2’），3.42（1H，t，J=9.5 Hz，H-Glc-3’），3.34（1H，t，J=9.5 Hz，H-Glc-4’），3.29（1H，m，H-Glc-5’），4.01（1H，dd，J=12.0，3.2 Hz，H-Glc-6’a），3.62（1H，dd，J=12.0，5.1 Hz，H-Glc-6’b）。13C NMR（125 MHz，CD3OD）δ：36.5（C-1），50.1（C-2），209.1（C-3），73.0（C-4），128.05（C-5），135.00（C-6），125.83（C-7），138.89 （C-8），76.92（C-9），21.22（C-10），30.02（C-11），28.21（C-12），23.50 （C-13），糖片段碳的化學位移δ：103.97（C-Glc-1’），74.72（C-Glc-2’），78.0 （C-Glc-3’），71.51（C-Glc-4’），77.96（C-Glc-5’），62.42（C-Glc-6’）。以上數據與文獻[16]報道一致，故鑒定化合物10為3-氧代-α-紫羅蘭醇-β-D-吡喃葡萄糖苷。

2.2 尾穗莧粗提取物對SMMC-7721細胞的體外細胞毒活性

檢測尾穗莧甲醇提取物、70 %乙醇提取物、石油醚提取物、乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物、水提取物對SMMC-7721細胞的體外細胞毒活性，結果見表1。

表1 尾穗莧各溶劑提取物對肝癌7721細胞系的細胞毒活性

由表1的結果可見，尾穗莧70 %乙醇提取物對SMMC-7721細胞體外細胞毒活性高于其他溶劑提取物，因此，對尾穗莧70 %乙醇提取物的化學成分進行進一步研究。分離得到的化合物1～5對人肝癌細胞系HepG2和SMMC-7721細胞體外細胞毒活性見表2。

表2 化合物1～5對肝癌細胞系HepG2和SMMC-7721細胞的細胞毒活性

由表2可見，木犀草素（2）對肝癌細胞系HepG2和SMMC-7721細胞生長有較顯著的抑制作用，其IC50值分別為13.36±1.01 μg/ml和16.70±1.15 μg/ml；對照組5-氟尿嘧啶的IC50值分別為22.3±1.35 μg/ml和12.66±0.98 μg/ml。由此可知，木犀草素具有較好的體外腫瘤細胞毒活性，其可能是尾穗莧主要抗腫瘤活性成分之一。

3 討論與結論

尾穗莧為藥食兩用植物，有較高的藥用價值和經濟價值。本文對尾穗莧70 %乙醇提取物的化學成分進行分離鑒定，從中分離到10個化合物，包括黃酮（1和2），生物堿（3～5）、以及萜類（6～10），其中化合物1～5為首次從該植物中分離到。隨后對化合物1～5進行體外腫瘤細胞毒活性研究，結果顯示木犀草素（2）對人肝癌細胞系HepG2和SMMC-7721有顯著的細胞毒活性，其他化合物對以上兩種細胞沒有細胞毒活性。本研究可為該植物的深入開發利用提供科學依據。