中晚期妊娠合并CIN患者HPV感染狀況、外周血T細胞亞群細胞水平變化及臨床意義

雷盼盼，劉妮

渭南市婦幼保健院婦科，陜西 渭南 714000

宮頸癌是較為常見的一種惡性腫瘤，發生率僅次于結直腸癌與乳腺癌，嚴重威脅女性的健康及生存質量[1]。宮頸上皮內瘤變(CIN)是同浸潤性宮頸癌息息相關的一組癌前病變總稱，其主要包括宮頸原位癌與非典型增生，可反映宮頸癌的持續發展過程[2]。分子生物學相關研究顯示，人乳頭瘤病毒(human papilloma viruses，HPV)與CIN 一樣，同宮頸浸潤癌息息相關，超過60%的宮頸癌中可以發現HPV DNA，也能夠在宮頸浸潤癌內發現蛋白質產物及HPV DNA 的轉錄，于浸潤癌及高級別CIN中，HPV DNA 在人類基因組內整合，而不是在完整的病毒衣殼中[3-4]。因為女性在妊娠狀態下，其激素水平會發生明顯變化，進而影響人體免疫功能及生殖道環境，加之感染大多具有隱匿性及潛伏性，導致其臨床癥狀特異性不足，極易被忽視[5]?；诖?，本研究將探討中晚期妊娠合并CIN患者的HPV感染狀況、外周血T細胞亞群細胞水平變化及臨床意義，現將結果報道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料 回顧性分析2020 年7 月至2021年12月渭南市婦幼保健院診治的60 例中晚期妊娠合并CIN 孕婦(觀察組)的臨床資料。納入標準：(1)依據《子宮頸癌診斷》中的CIN 相關標準[6]實施分類；(2)孕周＞13周；(3)年齡＞22歲；(4)臨床資料完整。排除標準：(1)屬于輔助生殖技術干預的非自然妊娠；(2)畸形胎兒；(3)有陰道手術、子宮頸手術史；(4)胎盤前置；(5)伴有艾滋病、梅毒或其他病毒感染；(6)伴有嚴重精神疾病。60 例孕婦年齡25～37 歲，平均(26.97±6.03)歲；孕周13～37 周；平均(26.11±2.74)周；CINⅠ期28、Ⅱ期20例、Ⅲ期12例。另選擇同期產檢的60例健康中晚期孕婦作為對照組，年齡24～35 歲，平均(27.15±5.91)歲；孕周13～36 周；平均(26.34±3.01)周。兩組孕婦的年齡、孕周比較差異均無統計學意義(P＞0.05)，具有可比性。本研究經我院醫學倫理委員會批準。

1.2 研究方法 (1)CIN確診：借助陰道鏡行宮頸活檢病理確診為CIN，間隔8～12周進行一次活檢或陰道鏡，選擇陰道鏡結果最嚴重的一次作為最終依據，接受陰道鏡下對相關組織活檢病理檢查的孕婦，均按照世界衛生組織規定的疾病分類標準[7]進行判斷。(2)HPV檢測：選擇錐形專用采集刷，從孕婦宮頸口處的鱗柱上皮交界部位采集標本，之后立即置入專用標本儲存管中。選擇美國Digene 公司的HC-Ⅱ方式對高危型HPV 進行檢測，能測定出高危型HPV16、31、33、18、35、39、51、52、45、56、58、68、59等13種。所有操作均按照試劑說明書嚴格操作，檢測結果用RLU/CO定量數值進行報告，若RLU/CO 超過1 就說明高危型HPV 陽性。(3)HPV DNA 載量檢測：陰道鏡檢查所有入組孕婦，取宮頸可疑病變進行活檢的同時檢測HPV DNA 載量，產后6 個月復查陰道鏡，取宮頸可疑病變進行活檢的同時檢測HPV DNA載量。如果中晚期妊娠合并CIN 孕婦發展為宮頸癌需要及時干預或終止妊娠。(4)免疫功能檢測：收集所有入組孕婦產前及產后6 個月外周血5 mL，選擇流式細胞儀對T細胞亞群(包括CD4、CD8)數量進行檢測。

1.3 觀察指標 (1)比較兩組孕婦產前HPV 陽性狀況；(2)比較觀察組CIN 分級不同孕婦產前與產后6 個月的HPV 感染、HPV DNA 載量；(3)比較兩組孕婦產前與產后6 個月的免疫功能指標；(4)比較觀察組CIN 分級不同孕婦產前與產后6 個月的免疫功能指標。

1.4 統計學方法 應用SPSS20.0統計軟件進行數據統計分析。計量資料以均數±標準差(±s)表示，三組間比較采用F檢驗，兩兩比較采用LSD-t檢驗，計數資料比較采用χ2檢驗。以P＜0.05 為差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組孕婦產前的HPV 陽性率比較 產前，觀察組孕婦的單一感染、多重感染、HPV 陽性率明顯高于對照組，差異均有統計學意義(P＜0.05)，見表1。

表1 兩組孕婦產前的HPV陽性狀況比較[例(%)]Table 1 Comparison of prenatal HPV positive status between the two groups[n(%)]

2.2 觀察組CIN分級不同孕婦產前與產后6個月的HPV 感染、HPV DNA 載量比較 產前，CINⅢ級孕婦的HPV 感染率明顯高于Ⅰ級、Ⅱ級，差異有統計學意義(P＜0.05)，三級孕婦的HPV DNA載量比較差異無統計學意義(P＞0.05)；產后6 個月，CINⅢ級孕婦HPV轉陰率明顯低于Ⅰ級、Ⅱ級，HPV DNA載量明顯高于Ⅰ級、Ⅱ級，差異均有統計學意義(P＜0.05)，見表2。

表2 觀察組不同CIN分級孕婦產前與產后6個月的HPV感染、HPV DNA載量比較[例(%)，±s]Table 2 Comparison of HPV infection and HPV DNA load in pregnant women with different CIN stages in the observation group at the prenatal stages and 6 months after delivery[n(%), ±s]

表2 觀察組不同CIN分級孕婦產前與產后6個月的HPV感染、HPV DNA載量比較[例(%)，±s]Table 2 Comparison of HPV infection and HPV DNA load in pregnant women with different CIN stages in the observation group at the prenatal stages and 6 months after delivery[n(%), ±s]

注：與本組產前比較，aP＜0.05。Note:Compared with that at the prenatal stages,aP＜0.05.

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2.3 兩組孕婦產前與產后6 個月的免疫功能指標比較 產前及產后6 個月，觀察組孕婦的CD4 水平明顯低于對照組，CD8 水平明顯高于對照組，差異均有統計學意義(P＜0.05)，見表3。

表3 兩組孕婦產前與產后6個月的免疫功能指標比較(±s)Table 3 Comparison of immune function indexes between two groups of pregnant women at the prenatal stages and 6 months after delivery[n(%), ±s]

表3 兩組孕婦產前與產后6個月的免疫功能指標比較(±s)Table 3 Comparison of immune function indexes between two groups of pregnant women at the prenatal stages and 6 months after delivery[n(%), ±s]

注：與本組產前比較，aP＜0.05。Note:Compared with that at the prenatal stages,aP＜0.05.

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2.4 觀察組不同CIN分級孕婦產前與產后6個月的免疫功能指標比較 產前及產后6 個月，不同CIN分級CD8 水平比較差異無統計學意義(P＞0.05)；產前及產后6 個月，CINⅢ級孕婦的CD4 水平明顯低于Ⅰ級、Ⅱ級，差異均有統計學意義(P＜0.05)，見表4。

表4 觀察組不同CIN 分級孕婦產前與產后6 個月的免疫功能指標比較(±s)Table 4 Comparison on immune function indexes among pregnant women with different CIN stages in the observation group at the prenatal stages and 6 months after delivery(±s)

表4 觀察組不同CIN 分級孕婦產前與產后6 個月的免疫功能指標比較(±s)Table 4 Comparison on immune function indexes among pregnant women with different CIN stages in the observation group at the prenatal stages and 6 months after delivery(±s)

注：與本組產前比較，aP＜0.05。Note:Compared with that at the prenatal stages,aP＜0.05.

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3 討論

隨著婦科腫瘤發生率的不斷提升，其越來越對女性的生命安全及生存質量造成嚴重影響。宮頸癌屬于較為常見的一種惡性腫瘤，按照相關文獻顯示，國內每年有13萬左右的新發宮頸癌病人[8]。CIN指的是子宮頸發展到癌的宮頸上皮組織出現的變化，主要分為CINⅠ、Ⅱ、Ⅲ級。相關文獻顯示，同HPV有關的腫瘤正在逐步增長，在HPV 引發的各種腫瘤中，宮頸癌發生率最高[9]。HPV屬于雙鏈結構的一種DNA病毒，表現為噬上皮特性，廣泛分布于動物及人類中，且特異性較高，它的DNA 宿于人體細胞染色體中，會阻礙細胞凋亡及修復[10-11]。因為女性的激素水平在妊娠期會發生巨大變化，對人體免疫功能及生殖道環境產生嚴重影響，且感染之后具有隱匿性及潛伏性，其癥狀并不明顯，通常不被重視。

本次研究將中晚期妊娠合并CIN 患者納入研究對象，分析HPV陽性狀況，結果顯示，合并CIN 孕婦的HPV 陽性率明顯高于健康孕婦。夏亞莉[12]的研究結果顯示，中晚期妊娠合并CIN者高危型HPV陽性率為84.2%，這與本研究的80%相近。相關文獻也顯示，伴隨宮頸病變級別的增加，高危型HPV陽性率也會逐漸提升[13]。本研究還顯示，伴隨CIN分級的增加，HPV感染率逐漸上升，產后6 個月自然陰轉率逐漸下降，且HPV DNA 載量逐漸上升，說明伴隨CIN分級的增加，高危HPV 感染率增加、產后轉陰率下降，這主要是由于長時間感染極易導致合并感染。所以，檢測HPV感染及HPV DNA 載量可協助判斷病情診斷與預后。

機體免疫功能屬于動態平衡的一個過程，其中，T細胞亞群能夠間接的反映人體免疫功能狀態[14-15]。本次研究顯示，產前及產后6 個月，合并CIN 孕婦的CD4 水平明顯低于健康孕婦，CD8 水平明顯高于健康孕婦，說明合并CIN 孕婦的免疫功能降低，發生HPV感染的概率較大。產后6 個月，合并CIN 孕婦的CD4水平同產前比較差異無統計學意義，CD8 水平明顯低于產前，提示產后6 個月合并CIN 孕婦的免疫功能正在恢復。本研究進一步研究了CIN 分級不同孕婦的免疫功能，結果顯示產前CIN 孕婦的CD4 隨著CIN分級的增加而下降，產后6 個月，相較于產前CD4 依然較低，而CINⅢ級孕婦的產前與產后6 個月CD4、CD8 水平無明顯差異，提示產后6 個月CINⅢ級孕婦免疫功能同產前比較無變化，但HPV 感染依然存在，臨床需重視。

綜上所述，中晚期妊娠合并CIN患者HPV陽性率明顯高于健康同期妊娠孕婦，免疫功能明顯較差，且HPV感染、免疫功能同CIN發展存在一定相關性。