浙江省某豬場豬偽狂犬病的凈化案例

洪 波 馬燕強 劉益錢

(杭州市種豬試驗場，浙江杭州 311115）

豬偽狂犬?。≒seudorabies,PR）是由豬偽狂犬病病毒（Pseudorabies virus,PRV）感染豬而引起的一種急性傳染性疾病，是危害生豬健康養殖的重要疫病之一[1,2]。PRV 屬于皰疹病毒科（Herpesviridae）α-皰疹病毒亞科，毒力是由幾種基因協同調控，主要有胸苷激酶（TK）基因、gE、gD、gI 基因等調控，缺失一種或幾種毒力基因，可使偽狂犬病毒的毒力下降，但仍保持免疫原性[3]，這使得偽狂犬病基因工程苗對該病的預防發揮了非常重要的作用，同時偽狂犬病病毒基因缺失蛋白抗體的ELISA 檢測方法可以準確區分免疫抗體和野毒感染抗體，這為豬場偽狂犬病的凈化提供了理論基礎[4]。

浙江省杭州市某二元種豬場有長白母豬487 頭，公豬12 頭，為了進一步提高種豬質量和生產成績，利用近3年時間對公豬、母豬、哺乳豬、保育豬、生長豬、后備種豬實施采血檢測、隔離淘汰、調整免疫程序等技術，同時嚴控生物安全體系，完成了對該場豬偽狂犬病的凈化任務。

1 試驗材料

1.1 主要試劑

PRV-gE 抗體檢測試劑盒、PRV-gB 抗體檢測試劑盒均購自IDEXX 公司。血清樣品的檢測步驟和結果判定均嚴格按照試劑盒說明書。

1.2 臨床樣品

浙江省杭州市某二元種豬場血清。

1.3 疫苗

豬偽狂犬病病毒gE 缺失活疫苗（Bartha-k61 株），生產廠商為美國碩騰。

2 試驗結果與分析

全豬場實行閉群管理、自繁自養，不從場外引種，準備了1 棟600 m2的后備豬舍。

2.1 豬場偽狂犬病的流行調查與調整

由表1 可知，PRV-gE 抗體檢測結果表明，豬場所有的豬均有PRV 感染，但感染率不高，都在10.0%以內；根據檢測結果，豬場應立即淘汰PRV-gE 抗體陽性的種公豬、種母豬、后備種豬及后備種豬同欄豬。PRV-gB 抗體檢測結果表明，種公豬、種母豬、哺乳前期、保育中后期陽性率高，保護力合格；哺乳后期、保育前期、生長豬、后備種豬gB 抗體陽性率低，保護力不合格。經分析，該豬場哺乳后期和保育前期豬的PRV-gB 陽性率低的主要原因是母源抗體下降；生長豬和后備豬的保護力不夠的主要原因是免疫抗體的消長規律。隨即調整了偽狂犬病的免疫程序（見表2）。

表1 2020年3月份對豬場PRV 感染和疫苗的免疫效果進行調查

表2 調整前后的豬偽狂犬疫苗免疫程序

由表2 可看出，免疫程序調整后，增加了仔豬初生后的滴鼻免疫，并且在保育和后備豬階段各增加了1 次免疫。從2020年4月份開始執行調整后的免疫程序，執行5 個月后，再次進行PRV 的凈化檢測。

2.2 豬場偽狂犬病感染陽性豬清除

2020年9月對實施凈化PRV 的豬群進行PRV-gB陽性率檢測，發現在哺乳后期、保育前期、生長豬、后備種豬階段PRV-gB 陽性率有了大幅度上升，且都超過了90.0%，說明調整后的免疫程序是可行的。PRV-gE檢測結果顯示，除了種公豬，每個階段的豬都有不同程度的野毒感染，說明僅調整免疫程序達不到凈化PRV 的目的。經分析，淘汰PRV-gE 陽性種母豬、后備種豬及后備種豬同欄豬。同時，認為豬場各豬只間存在水平交叉感染，需要加強豬場的生產管理。如加大種群淘汰力度，確保凈化順利進行；加強后備豬的監測，確保PRV-gE 100%陰性；嚴格實行“全進全出”，進出豬只前后，對欄舍徹底清洗消毒；及時從正常豬中挑出病豬并進行隔離治療，死豬及時進行無害化處理；加強豬場人員、物品和環境消毒，人員進入豬舍換衣換鞋；加強豬只日常保健。此后，免疫程序保持不變，繼續執行PRV 的凈化，6月后豬場已出售大部分潛在帶毒豬只，并再次實施PRV 感染陽性豬清除。至2021年4月，再對豬群進行PRV 抗體檢測，發現各階段豬只PRV-gE抗體陽性率均為0，說明PRV 陽性初步清除成功，豬只間的水平傳播得到有效控制。各階段豬只PRV-gB 抗體陽性率也有了提高，免疫合格率在95%以上，說明疫苗免疫效果優秀。

2.3 豬場偽狂犬病的感染評估與凈化維持

2021年5-12月，對豬場開展1 個豬生長周期的抽樣日常檢測，從而來評估豬場PRV 的感染情況。針對種公豬分別于5、7、9、11月份每月抽檢2 次，每次抽檢比例25%；種母豬群6、8、10、12月份每月抽檢8次，每次抽檢比例6.25%；哺乳仔豬、保育豬、生長豬每間隔1 個月抽檢1 次，后備種豬群每月分4 次抽檢，每次抽檢比例6.25%。監測結果發現，抽檢全部豬群中PRV-gE 抗體陽性率均為0，整體豬群無野毒感染。PRV-gB 抗體陽性率也維持在95%以上，豬場免疫效果維持優秀。表明該豬場PRV 凈化有效可行，達到預期效果。

2022年2月至2023年1月，對達到PRV 凈化標準的豬群持續進行抽樣監測，發現各豬只沒有PRV 野毒感染。表明豬場PRV 已經清除干凈，凈化成功。

3 小結

2011年以來，豬偽狂犬病的流行在全國范圍內呈上升趨勢，目前已成為嚴重危害養豬業的疫病之一[5,6]。2018年非洲豬瘟在我國發生以來，豬場都增強了生物安全防控措施，也配備了檢測實驗室，這為豬偽狂犬病、豬藍耳病等的凈化提供了條件[7-9]。龐超等[10]、呂素芳等[11]研究發現豬偽狂犬的毒力因子是gE 基因，我國實際生豬養殖過程中多采用PRV-gE 基因缺失疫苗預防豬偽狂犬病。本次豬場均采用PRV-gE 基因缺失疫苗，正常免疫豬體內不會出現gE 抗體，只有感染偽狂犬野毒的才會出現gE 抗體，因此，gB 抗體檢測試劑盒聯合gE 抗體檢測試劑盒，能夠區分疫苗免疫抗體和野毒抗體[12,13]。此外，張志梅[14]、方偉等[15]研究表明，即使豬場免疫了PRV-gE 缺失疫苗，不同場的PRV 感染情況也有極大的差異，這與免疫疫苗是否高效，以及免疫是否科學合理有一定關系，所以在此次豬場豬偽狂犬病的凈化過程中，根據第1 次調查結果果斷修改了PRV 的免疫程序。在此次凈化案例中可以得出，PRV 感染陽性場，在有效使用PRV-gE 缺失疫苗的情況下，持續通過免疫-檢測-淘汰-監測，仍然可以有效凈化PRV。