四川宜賓地區不同孕期婦女血漿可溶性纖維蛋白單體復合物水平參考范圍的建立

龍 琴，石安惠，黃佳蓉（宜賓市婦幼保健院，四川宜賓 644000）

可溶性纖維蛋白單體復合物（soluble fibrin monomer complex，SFMC）是纖維蛋白原轉變為纖維蛋白的中間體，是凝血酶水解纖維蛋白原使后者失去纖維肽A 和纖維肽B 而產生的[1]。有研究認為SFMC 作為凝血酶活性的標志物，血漿中高水平的SFMC 被認為是正在進行血管內凝血的指標[2]，并有可能比其他凝血標志物（PT，APTT，FDP，D-D等）更早的預測血栓形成事件[3]。但是對于血漿SFMC 水平在不同人群中的分布檢出情況目前報道較少。不同孕期婦女血漿SFMC 水平的參考范圍目前未檢索到。本研究旨在建立不同孕期血漿SFMC參考范圍，探索血漿SFMC 水平與D-D 水平的相關性，為本地區臨床診療提供依據。

1 材料和方法

1.1 研究對象 選取2021年05月～2022年01月宜賓市婦幼保健院就診的397 例健康孕婦及120 例健康體檢者為研究對象，年齡17～44 歲。將受試者分為健康對照組、孕早期組（≤13+6周）、孕中期組（14～27+6周）和孕晚期組（≥28 周）共四組。確保每組納入不少于120 例受試者，以保證參考范圍的90%置信區間。受試者排除有以下任何可能影響檢測結果的因素：靜脈血栓栓塞病史或家族史的患者；有高血壓、惡性腫瘤、肝腎疾病、心血管疾病患者；服用影響凝血及纖溶系統藥物的患者。本研究經醫院倫理委員會認可，實驗過程中所用的樣本均已獲得受試者知情同意。

1.2 儀器與試劑 所有檢測均在日本SEKISUI 公司的CP3000 全自動凝血分析儀完成，試劑均為日本SEKISUI 公司配套試劑，試劑批號分別為：SFMC 檢測試劑盒（121RJR），SFMC 校準品（201RBS），SFMC 質控品（202RCS）；D-二聚體檢測試劑盒（845RCS），D-二聚體校準品（824RDR），D-二聚體質控品（901RCS）。

1.3 方法

1.3.1 標本采集：采集受試者3.2g/dl 枸櫞酸鈉抗凝血液樣本1.8ml，混勻后1 500g 離心15min，取血漿樣本保存于-80℃備用。

1.3.2 檢測前：將樣本37℃水浴5min，溶解后10min 內上機檢測。實驗操作嚴格按儀器及試劑說明書進行，每次檢測標本前使用低值、高值兩個水平的質控品進行檢測，確保檢測精密度和可靠性。

1.3.3 參考范圍建立：在臨床應用中，低于參考范圍下限的SFMC 結果無意義，故僅計算SFMC 單側參考范圍，以第95 百分位數來表示參考范圍的單側上限值，用Excel 軟件中的PERCENTILE 函數計算P95。離群值按照Dixon（即D/R 比值）判斷，即當D/R ≥1/3 時，該值應當作為離群值被剔除。D 是指極大（或極?。┲岛拖噜徶抵g的絕對差值，而R 是指包括極值在內的所有值中最大值和最小值間的差值。

1.4 統計學分析 應用SPSS，Medcalc，Excel軟件進行數據統計分析。 采用Kolmogorov-Smirnov(K-S)檢驗，判斷資料分布情況。經正態性檢驗SFMC 呈偏態分布，以中位數（四分位數）[M（P25～P75）]表示。組間比較采用單因素方差分析。P＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 四組血漿SFMC 水平比較及參考范圍的建立本研究初步選擇了517 例受試者，在回顧所有受試者臨床資料后，排除1 例宮外孕史的受試者，2 例存在分析前誤差（脂血）的受試者，4 例檢測結果為離群值的受試者及13 例重復入組的受試者，最終納入497 例符合標準的受試者，年齡27.6±4.9 歲。組間比較，受試者年齡差異無統計學意義（F=1.801，P＞0.05）。

見表1。各實驗組血漿SFMC 的參考范圍分別為：＜7.3μg/ml（對照組），＜18.4μg/ml（孕早期），＜20.4μg/ml（孕中期）和＜58.5μg/ml（孕晚期），組間比較差異具有統計學意義（F=55.989，P＜0.001）；同時不同孕期組間比較差異也具有統計學意義（F=38.120，P＜0.001）。

表1 不同實驗組年齡及血漿SFMC 水平比較

2.2 血漿SFMC 水平與孕周的相關性分析 見圖1。隨著孕周的增加，孕婦血漿SFMC 水平逐漸上升。在孕早期至孕中期檢測值整體的增長趨勢較緩，但進入孕晚期后開始明顯提升，特別是在孕34 周后顯著升高。

圖1 孕婦血漿SFMC 水平與孕周的相關性分析

2.3 孕婦血漿SFMC 水平與其D-D 相關性分析見圖2。本研究中受試者血漿D-D 水平與SFMC 水平呈正相關，計算線性回歸方程，顯示出兩個項目具有一定的相關性(r2=0.468 8)。

圖2 受試者血漿D-二聚體水平與SFMC 水平相關性分析

3 討論

妊娠期為女性特殊時期，表現為生理性高凝狀態，抗凝系統功能和纖溶活性降低，血小板功能活化，血液瘀滯，血管損傷，子宮增大壓迫下腔靜脈和盆腔靜脈，妊娠期和產后活動能力下降等，這些復雜的生理變化導致其處于血栓前狀態，容易發生靜脈血栓栓塞癥(VTE)[4]，發生風險與非孕婦女相比大約增加了5 倍[5]，而同時VTE 也是女性妊娠和產后死亡的主要原因[6]。因此，在妊娠期間進行早期評估、篩查和識別VTE 具有重要的意義[7-8]。

可溶性纖維蛋白單體復合物（SFMC）在凝血早期即可形成，國外相關研究表明SFMC 在預測發病風險上優于D-D 檢測，已被建議作為VTE 的新檢測標志物[9]，用于VTE 的預防監測。由于SFMC 檢測試劑在國內目前暫無廠家上市，國內有關SFMC的研究報道較少，有研究顯示，SFMC 在部分冠心病、子癇前期、惡性腫瘤患者中表達增加[1,10-12]，而孕婦群體血漿SFMC 水平暫無相關的報道。本次研究SFMC 檢測試劑盒（免疫比濁法）所建立的妊娠期婦女各階段SFMC 參考范圍，為臨床預測妊娠期VTE 提供了較為可靠的實驗室參考指標。

本次研究所建立的各孕期參考范圍與正常對照組參考范圍差別較大。在孕晚期受試者中，有95%的受試者超過正常對照組參考范圍，最高者可達正常對照組參考范圍上限的10 倍以上，說明臨床十分有必要建立孕婦人群的血漿SFMC 參考范圍。本次研究的受試者中有4 例多胎妊娠，其中孕早期1例，孕晚期3 例，由于多胎妊娠受試者轉院等原因，雖未能完整收集到該人群孕早期、孕中期、孕晚期相關臨床資料，但多胎妊娠例數少，占總受試例數比例很?。?.8%），初步認為不會對本次孕婦人群血漿SFMC 參考范圍的建立造成顯著影響。在參考區間驗證中，每組隨機抽取20 例進行驗證，均落在各組參考范圍之內。新建立的參考范圍顯示血漿中SFMC 水平隨孕期的增長而增高，由于當前沒有SFMC 妊娠期參考范圍建立的相關研究，本研究為孕婦SFMC 檢測提供了一個全新的臨床參考，這也是本次研究價值所在。

本研究中，孕早期、孕中期、孕晚期各階段的SFMC 水平逐漸升高，在孕晚期達到最高，與對照組比較，差異有顯著統計學意義（P＜0.001），因此，對孕婦進行SFMC 檢測并觀察其變化具有一定的診斷及研究價值，而這些變化可能與孕婦VTE 及其他妊娠疾病的發生有一定關聯性。同時，受試者血漿D-D 水平與SFMC 水平呈正相關（r2=0.468 8）。研究發現，在SFMC 呈低值D-D 呈高值的區域（SFMC ≤20.0μg/ml，D-D ≥3.0μg/ml）內，10例完全來自于孕晚期組；而在D-D 呈低值SFMC呈高值的區域（SFMC ≥20.0μg/ml，D-D ≤3.0μg/ml）內，28 例樣本中，5 例屬于孕早期組，8 例屬于孕中期組，15 例屬于孕晚期組。相較僅D-D 高值的數據，SFMC 高值的數據在各組中均有一定分布，可以推測在妊娠期中D-D 與SFMC 水平擁有不同的發展趨勢。因此，二者聯合檢測更能為臨床提供可靠信息，提高母嬰安全。

綜上所述，本研究初步建立了宜賓地區健康孕婦血漿SFMC 的參考范圍，且與正常對照組有明顯差異。因此，采用正常人群的血漿SFMC 參考范圍用于妊娠期婦女的靜脈血栓風險評價可能存在較大的誤差。本研究妊娠期各階段血漿SFMC 參考范圍的建立在孕婦VTE 預防監測上具有重要的臨床意義。本研究的局限性在于：由于研究經費限制本研究未能另選人群進行參考范圍驗證，后續本課題組將繼續深入研究，以完善驗證。