王 娟 于 文
西安開米股份有限公司,陜西西安,710075
除螨劑R301是一種高效、廣譜、安全的除螨殺菌劑,能夠添加到肥皂、洗衣粉、洗衣液等洗滌用品中,起到除螨殺菌的作用。市面上有些除螨洗衣液中添加除螨劑R301類成分,但是卻沒有相應的檢測方法,文獻中大多是關于除螨劑R301的殺滅效果或者除螨洗衣液的合成工藝[1-2]。因此,研究并開發一個關于除螨洗衣液中防腐劑除螨劑R301含量的檢測方法很有必要,可以檢測除螨洗衣液中是否添加除螨劑R301及其含量,讓消費者更放心地使用除螨洗衣液。為此,筆者采用高效液相色譜法,確定了適宜的檢測波長,有效去除干擾,以期建立一種準確性高、可靠性強、適用性廣的檢測方法。
儀器:UV6000LP(二極管陣列檢測器)液相色譜儀,Thermo Finnigan公司。
甲醇:色譜純,德國Merck公司。
除螨劑R301:標準品(純度≥98.0%,上海輕工業研究所有限公司)。
冰醋酸:分析純,重慶北碚精細化工廠。
超純水:自制。
95%乙醇:分析純。
色譜柱:AcclaimTM120A,250 mm×4.6 mm。
柱溫:室溫。
進樣方式:20 μL閥進樣。
檢測波長:258 nm。
流速:1.0 mL/min。
流動相:甲醇∶純水∶醋酸=65∶35∶0.3,用0.45 μm濾膜過濾。
洗脫方式:等度洗脫。
1.3.1 流動相的配制
流動相:將甲醇、純水、冰醋酸按65∶35∶0.3的比例混勻,用0.45 μm濾膜過濾,再用超聲振蕩脫氣10 min,備用。
1.3.2 標準溶液的制備
稱取1.048 5 g除螨劑R301標準樣品于100 mL容量瓶中,用95%乙醇稀釋至刻度,再繼續稀釋配制一系列不同質量濃度的樣品(2.097 μg/mL、4.194 μg/mL、10.485 μg/mL、41.940 μg/mL、69.900 μg/mL、104.850 μg/mL、209.700 μg/mL)備用。
1.3.3 樣品溶液的制備
精確稱量5.0000 g樣品于50 mL容量瓶中,用95%乙醇稀釋,超聲振蕩,定容至刻度備用。
主要進行甲醇/水、甲醇/水/醋酸與乙腈/水、乙腈/水/醋酸的篩選,并根據實際情況調整其配比,以達到最佳分離效果并減少干擾,最后看哪個體系比較適合除螨洗衣液中除螨劑R301的檢測。實際實驗過程中發現乙腈/水/醋酸體系效果跟甲醇體系效果相似,但是乙腈成本高。經過綜合比較分析,總結出流動相為甲醇∶純水∶醋酸=65∶35∶0.3(體積比,v/v)時,等度洗脫能達到最佳分離效果、基線平穩和減少干擾,比較適合本項目檢測。
除螨劑R301最大吸收波長(圖1)為233 nm和258 nm。選擇258 nm作為檢測波長,通過添加法,把除螨劑R301加入洗衣液樣品中,得到樣品中添加除螨劑R301的紫外色譜圖,對比除螨劑R301的紫外色譜圖(圖2)、樣品的紫外色譜圖(圖3)及添加除螨劑R301的樣品溶液紫外色譜圖(圖4),判定出樣品中除螨劑R301的色譜峰。其目標色譜峰與其他色譜峰分離度高,干擾峰少,提高了樣品中除螨劑R301的檢測精度,故選擇258 nm作為檢測波長。
圖1 樣品光譜圖
圖2 除螨劑R301的紫外色譜圖
圖3 樣品的紫外色譜圖
圖4 樣品中添加除螨劑R301的紫外色譜圖
在上述色譜條件下,待儀器基線穩定后,采用濃度-峰面積外標法定量,配制質量濃度為2.097 μg/mL、4.194 μg/mL、10.485 μg/mL、41.940 μg/mL、69.900 μg/mL、104.850 μg/mL、209.700 μg/mL的標準溶液進樣分析。實驗數據見表1。由實驗得線性回歸方程為y=0.0002x-0.4479,R2=1(圖5),其中y為除螨劑R301濃度(μg/mL)、x為除螨劑R301峰面積、r為相關系數,r值大于0.99,說明在除螨劑R301濃度為2.097~209.7 μg/mL內線性關系良好,除螨洗衣液樣品黏度較高,需要稀釋定容后進樣檢測。
圖5 除螨劑R301標準溶液的線性圖譜
表1 標準曲線溶液
精確稱取1.048 5 g含除螨劑R301的樣品于100 mL容量瓶中,用95%乙醇溶解并稀釋到刻度,搖勻;吸取1 mL上述溶液于250 mL容量瓶中,用95%乙醇稀釋到刻度,搖勻,備用。按此方法配制6份溶液,進行6次檢測,實驗結果見表2。
表2 重復性實驗
由表2中實驗結果可知,此樣品檢測結果RSD為2.65%,說明方法誤差小,具有良好的重復性。
精確稱取1.048 5 g含除螨劑R301的樣品于100 mL容量瓶中,用95%乙醇溶解并稀釋到刻度、搖勻;吸取1 mL上述溶液于100 mL容量瓶中,用95%乙醇稀釋到刻度,搖勻;再吸取1 mL上述溶液于25 mL容量瓶中,用純水稀釋到刻度,搖勻,備用。將此標準溶液檢測6次,實驗結果見表3。
表3 精密度實驗
由表3中實驗結果可知,RSD為2.16%,說明方法誤差小,精密度比較好。
回收率實驗采取在已知含量(除螨劑R301含量6.65 μg/mL)的市售樣品1作為基質樣品,加入已知質量濃度的除螨劑R301標準溶液2;精確稱量5.000 0 g含除螨劑R301的樣品于50 mL容量瓶中,加入2 mL或4 mL濃度為104.85 μg/mL除螨劑R301標準溶液2,用95%乙醇溶解并稀釋至刻度,超聲振蕩,定容至刻度備用,利用選定的色譜條件進行分析,實驗結果見表4。
表4 回收率實驗(n=6)
由表4可知,回收率在99.1%~100.5%,滿足分析要求。
精確稱量5.000 0 g市售樣品于50 mL容量瓶中,用95%乙醇稀釋,超聲振蕩,定容至刻度備用。測定樣品中的除螨劑R301含量,實驗結果見表5。
表5 樣品中除螨劑R301的測試結果
由表5中的實驗結果可知,兩組市售樣品的6次結果的RSD分別為1.72%和1.25%,說明方法誤差小,平行性比較好。
采用高效液相色譜法測定除螨洗衣液中除螨劑R301的含量,方法簡便、迅速,精密度高。標準溶液在2.097~209.7 μg/mL線性相關,回收率為99.1%~100.5%。此方法精確、可靠,可作為產品質量控制的檢測方法。