高核苷酸添加劑對斷奶仔豬生長性能、血清生化及免疫指標的影響

徐 棟 王兆鈞 王春維 張 怡

核苷酸（nucleotide，NT）是組成細胞的重要成分，它廣泛參與細胞構成、供能、代謝等生命過程，是體內不可缺少的成分。外源核苷酸對初生動物，尤其是處于免疫應激及肝損傷的動物尤為重要，而一般日糧中的核苷酸不能滿足其需要，在以玉米、豆粕為主的日糧中核苷酸更加缺乏。張永青等（2007）研究表明，在日糧中添加0.2%核苷酸能顯著提高斷奶仔豬的飼料利用率，并有改善日增重和采食量的趨勢。此外，周興華等（2009）研究發現，飼料中添加酵母核苷酸能顯著提高錦鯉幼魚增重率、特定生長率，降低餌料系數。但目前的研究主要集中在生長性能方面，關于核苷酸對動物免疫指標的影響缺乏系統的研究。本試驗采用自制高核苷酸飼料原料替代部分血漿蛋白粉，旨在探討高核苷酸飼料原料對斷奶仔豬生長性能和免疫指標的影響。通過對仔豬血清生化指標和免疫指標的分析，進一步研究高核苷酸飼料原料對斷奶仔豬生長性能和免疫指標產生影響的原因。

1 材料與方法

1.1 試驗動物及分組

平均體重（9.68±0.73）kg的（30±3）日齡杜長大三元雜交斷奶仔豬12頭，按初始體重隨機分成2組，分別為對照組和試驗組。每組內設6個重復，每個重復1頭豬，共12欄。每個處理分別飼喂對應日糧。

1.2 試驗設計

各組日糧營養水平相同，對照組不添加高核苷酸，試驗組添加1.5%自制高核酸飼料添加劑。試驗分為兩個階段，第一階段試驗0～14 d（斷奶后2～3周），第二階段試驗15～28 d（斷奶后4～5周），試驗期總共28 d。

1.3 試驗日糧

對照組采用玉米-豆粕-魚粉型基礎日糧，試驗組在基礎日糧中添加1.5%的自制高核酸飼料原料以替代部分血漿蛋白粉。兩組日糧配方保持消化能、蛋白、鈣、磷和賴氨酸等含量接近。日糧組成及主要營養水平見表1。高核苷酸飼料原料由武漢工業學院畜禽飼料工程技術研究中心生產。

表1 日糧組成及營養水平(風干基礎)

1.4 飼養管理

試驗豬飼養在同一間豬舍內，單籠飼喂，自由采食飲水，室溫保持在（25±3）℃。預飼5 d后，早晨空腹逐頭稱重，作為起始體重，進入正式試驗。每天喂料4次，投料時間為早上 7：00、11：00、16：00 和 20：00。給食以吃飽而食槽無剩余為原則，保證充足清潔飲水，每天打掃豬舍1次（中午12：00）。每天記錄各組投料量與剩余量，并觀察豬的生長發育、采食等健康情況。試驗結束時，早晨空腹，前腔靜脈采血10 ml。在未加抗凝的離心管中分別注入4 ml血液，傾斜放置，凝固后立即離心（3000 r/min，10 min），取上清液，分裝后保存于-20℃冰箱中，待測血清生化指標。

1.5 檢測指標與方法

1.5.1 生長性能指標

試驗期間每日記錄飼料消耗，試驗的第1、14、28 d仔豬空腹稱重。計算日增重（ADG）、日采食量（ADFI）和料重比（F/G）。

1.5.2 血液生化指標

測定血清中尿素氮（Blood urea nitrogen，BUN）、乳酸脫氫酶（Lactate dehydrogenase，LDH）和堿性磷酸酶（Alkaline phosphatase，AKP）水平。

樣品由武漢市第七醫院采用日立7020全自動生化分析儀檢測。

1.5.3 血清免疫指標

測定血清中白介素－2（IL－2）、干擾素－γ（IFN－γ）、G 型免疫球蛋白（IgG）、M 型免疫球蛋白（IgM）、A 型免疫球蛋白（IgA）。IL－2采用放免法測定，IFN－γ采用ELISA法測定，免疫球蛋白采用免疫比濁法測定。以上指標由北京華英生物技術研究所檢測。

1.6 數據處理

采用SPSS 11.5統計軟件對數據進行方差分析并作Duncan's法多重比較，結果以平均值±標準差表示，以P＜0.05作為差異顯著性判斷標準。

2 結果與分析

2.1 高核苷酸飼料原料對生產性能的影響（見表2）

表2 各試驗組斷奶仔豬的生產性能（平均值±標準差）

由表2可知，兩組的日增重、日采食量和料重比差異不顯著（P＞0.05）。試驗期第一階段試驗組日增重較對照組提高了7.38%（P＞0.05）；第二階段試驗組日增重低于對照組（P＞0.05）；全期組間無顯著差異。試驗說明，在斷奶2～3周（試驗0～14 d）內高核苷酸飼料原料能提高仔豬日增重。試驗期第一階段試驗組較對照組平均日采食量增加了2.90%（P＞0.05）；試驗第二階段組間日采食量無明顯變化（P＞0.05）；試驗全期組間日采食量無顯著差異。試驗期第一階段試驗組料重比有所降低（P＞0.05）；第二階段試驗組料重比高于對照組（P＞0.05）；試驗全期試驗組料重比低于對照組，組間無顯著差異。

2.2 高核苷酸飼料原料對血液生化指標的影響（見表3）

表3 各試驗組仔豬的血液生化指標（平均值±標準差）

由表3可知，試驗組血清尿素氮含量高于對照組（P＞0.05）；組間乳酸脫氫酶活性無顯著差異（P＞0.05）；試驗組中堿性磷酸酶含量較對照組有顯著提高（P＜0.05）。

2.3 高核苷酸飼料原料對血清免疫指標的影響（見表4）

表4 高核苷酸飼料原料對仔豬血清免疫指標的影響

由表4可知，試驗組血清IL－2和INF－γ水平比對照組分別提高了33.65%和44.45%（P＜0.05）；試驗組IgG、IgM與IgA水平高于對照組，差異不顯著（P＞0.05）。試驗說明，斷奶仔豬日糧中添加高核苷酸飼料原料能提高仔豬的免疫功能。

3 討論

3.1 高核苷酸飼料原料對仔豬生長性能的影響

試驗結果表明，在斷奶早期用高核苷酸飼料原料替代血漿蛋白粉能提高生長性能，并在一定程度上提高采食量和飼料利用率。這與喬建國等（2008）的研究結果基本一致，喬建國等在斷奶仔豬日糧中添加0.25%核苷酸能提高飼料利用率，并有改善日增重和采食量的趨勢。馮尚連等（2000）的研究表明，飼料中添加核苷酸對仔豬和肥育豬有促生長、降低料重比的作用。這可能與動物在受到免疫應激、快速生長和應激時，對核苷酸的需求量增加有關（鄔小兵,2008）。本試驗中，試驗組與對照組相比，高核苷酸飼料能提高仔豬生長性能，但差異均不顯著，這可能是因為本試驗中試驗組采用高核苷酸飼料原料替代部分血漿蛋白粉，血漿蛋白粉從營養角度來講是一種良好的飼料原料，但其生產成本高，更重要的是血漿蛋白粉存在動物性飼料原料同源性污染問題，英國爆發的瘋牛病就是由于飼喂同源性飼料原料而大規模蔓延，采用生物技術制備的高核酸飼料不會產生同源性污染問題。

在試驗第二階段，對照組各項指標均優于試驗組。這可能是隨著試驗的進行，仔豬的斷奶應激和環境應激逐漸減小。同時，仔豬機體各項功能趨于完善，自身合成的核苷酸量已能滿足需求。從仔豬的日糧來看，血漿蛋白的氨基酸組成對于仔豬來說更接近于理想狀態，利于仔豬利用。

3.2 高核苷酸飼料原料對仔豬血液生化指標的影響

3.2.1 高核苷酸飼料原料對血清尿素氮的影響

很多研究均把血清尿素氮水平的高低作為評價仔豬生長表現、體內蛋白質合成、日糧粗蛋白利用效率的指標(D.Torrallardona,2002)。一般認為，血清中尿素氮含量下降意味著蛋白質分解速度的降低，蛋白質沉淀加強，血清尿素氮含量升高表明體內蛋白質分解代謝增強，氮沉積減少（Coma 等，1995；Tagari，1964）。本試驗結果顯示，對照組血清尿素氮含量要低于試驗組，差異不顯著。這可能是由于血漿蛋白粉的氨基酸組成要優于高核苷酸飼料原料中氨基酸組成，血漿蛋白粉中氨基酸更利于被仔豬腸道完整吸收，并進入仔豬血液循環從而使血清尿素氮含量降低；但外源核苷酸能促進胃腸道的發育，這導致了試驗組仔豬生長性能要優于對照組。

3.2.2 高核苷酸飼料原料對血清酶活性的影響

堿性磷酸酶是營養物質代謝的關鍵酶，在骨骼形成以及脂肪代謝過程中起到重要作用。血清堿性磷酸酶活性高低可以反映動物生長速度和生產性能，活性提高有利于提高日增重（伍革民等，1999；楊華等，2001）。據研究，堿性磷酸酶活性與豬的日增重成正比（易國華，1999）。本試驗中試驗組的血清堿性磷酸酶活性比對照組高了13.93%，差異顯著（P＜0.05）。結果與生長性能結果的趨勢一致。乳酸脫氫酶是糖代謝中重要的酶，催化乳酸脫氫成為丙酮酸或丙酮酸還原為乳酸，即參與了能量物質的有氧氧化與無氧酵解。武艷萍等（1995）報道，具有應激敏感性豬的乳酸脫氫酶活性高于正常豬，所以乳酸脫氫酶活性常作為選擇應激抵抗豬的指標之一。

3.3 高核苷酸飼料原料對仔豬血清免疫指標的影響

3.3.1 高核苷酸飼料原料對血清IL－2和IFN－γ的影響

IL－2、IFN和NK細胞組成一個免疫調節網絡參與機體免疫調節。本試驗結果表明，高核苷酸飼料原料能提高血清IFN－γ和IL－2水平，兩種細胞因子均可通過增強細胞毒性T淋巴細胞（CTL）、自然殺死細胞（NK）殺傷活性以及單核巨噬細胞的抗病毒能力，增強機體的免疫功能，這與Kulkarni等（1994）和Yamauchi（1996）等的研究結果一致。Navarro等（1996）試驗結果證明，外源核苷酸能促進T淋巴細胞的增殖反應以及IL－2或IFN的分泌，提高NK細胞和巨噬細胞活性，促進遲發性超敏反應。

3.3.2 高核苷酸飼料原料對血清免疫球蛋白水平的影響

IgA具有粘膜免疫，激活補體旁路。IgM在體內最早產生，但是持續的時間短，它是機體初次接觸抗原物質最早產生的抗體，也有抗菌、抗病毒和中和毒素的功能。在機體受到病原感染后與補體結合，溶解病原體的作用很強，在抗感染中起著“先鋒”作用。IgG是血清中濃度最大、半衰期最長的一類免疫球蛋白，占球蛋白總量的75%～80%，IgG是動物受到抗原刺激后體內產生的能與抗原特異性相互作用的一類球蛋白，是主動免疫后機體產生的主要抗體，動物機體抗感染的主力，在體內發揮抗菌、抗病毒、抗毒素等免疫學活性，在體液免疫中最為重要。因此，斷奶仔豬血清中IgG、IgM和IgA提高，在一定程度上可以減少仔豬腹瀉的發生。

本試驗中試驗組血清免疫球蛋白水平均有高于對照組的趨勢，這說明在斷奶仔豬日糧中添加高核苷酸飼料原料可以在一定程度上提高斷奶仔豬機體的體液免疫功能。

4 結論

①仔豬日糧中添加高核苷酸飼料原料能在仔豬斷奶后14～21 d內提高仔豬生長性能，但斷奶21 d后效果不明顯；②高核苷酸飼料原料能提高仔豬免疫功能。