毛細管電泳測定單味石膏及其復方中Na、Ca元素

秦 云 李 祥 陳建偉 夏 怡

南京中醫藥大學藥學院，江蘇 南京 210046

石膏為硫酸鹽類礦物硬石膏族石膏，是《中國藥典》收載的中醫臨床常用藥。生石膏主要成分為CaSO4·2H2O，主要功效為清熱瀉火、除煩止渴。煅石膏主要成分為CaSO4，主要功效為收濕生肌、斂瘡止血。

Na與Ca離子的比例，在體溫調節中有重要作用，Na離子濃度升高，可使體溫升高;Ca離子濃度升高，則可使體溫降低［1］。已有實驗結果表明生石膏的解熱作用可能與調節體內Na/Ca比例有關。

本文運用毛細管電泳法測定生、煅石膏在模擬胃酸pH提取液中Na、Ca元素的溶出率;另外測定白虎湯、去石膏的白虎湯、以煅石膏、化學藥分別代替石膏入白虎湯的Na、Ca含量，考察Na/Ca比值。

測定無機陽離子最為廣泛的方法是原子吸收光譜法［2］，此法操作簡單但常規儀器一次只能測定一種元素。離子選擇電極法［3］選擇性較高，也存在類似的缺點。毛細管電泳(CE)是上世紀八十年代發展起來的一種分析技術，能夠一次完成多種元素的測定，且分析速度快、樣品用量少，在無機離子分析方面得到廣泛的應用［4～6］。

1 儀器與材料

1.1 儀器:高效毛細管電泳儀 (安捷倫公司);未涂層熔融石英毛細管 (55cm×75μm，有效長度47cm，河北永年光纖廠)。

1.2 材料:生石膏，采自湖北應城，粉碎過100目篩;煅石膏，按石膏煅制工藝為粉碎成0.125cm3的小塊，鋪至1cm后，50分鐘由室溫升至650℃后煅制1.5小時粉碎過100目篩，批號SG0105;知母、炙甘草、粳米購自江蘇益豐大藥房，經本校鑒定教研室陳建偉教授鑒定。

咪唑 (上海青析化工科技有限公司，批號071026)，酒石酸 (上海美興化工股份有限公司，批號080501)，鹽酸 (上?；瘜W試劑有公司，批號080302)，NaOH(上海實意化學試劑有限公司，批號20030628)，CaCl2(上海奉賢試劑廠，批號20030710)，NaCl(南京化學試劑080922)。

2 方法

2.1 標準溶液的制備精密稱取NaCl115.5mg，用重蒸水定容至25mL，再取10mL重蒸水定容至100mL，作為Na儲備液。精密稱取CaCl22078mg，用重蒸水定容至25mL，作為Ca儲備液。臨用前用重蒸水稀釋至所需濃度，過0.45μm微孔濾膜，超聲脫氣。

2.2 提取溶劑的配制精密吸取鹽酸234mL，加重蒸水定溶至1000mL，配制成稀鹽酸。精密吸取稀鹽酸16.4mL，加重蒸水定溶至1000mL。此提取溶劑為模擬去蛋白酶的人工胃液酸度。

2.3 供試品溶液的制備

2.3.1 生、煅石膏單味藥各稱取生石膏與煅石膏細粉約3g，精密加入提取溶劑10mL，稱重，37℃水浴提取30min，冷卻至室溫，滴加重蒸水補足重量，抽濾，精密吸取濾液5mL至容量瓶，加重蒸水4.5mL，氨水30μL，并用重蒸水定容至10mL，過0.45μm微孔濾膜過濾，超聲脫氣。

2.3.2 各復方組各復方組精密加60mL重蒸水，稱重，浸泡0.5h，煎煮30min，冷卻至室溫，滴加重蒸水補足重量，抽濾，精密吸取濾液5mL至容量瓶，重蒸水定容至10mL，過0.45μm微孔濾膜過濾，超聲脫氣。各復方組藥味配伍及劑量見表1。

表1 藥味配伍方式Tab.1 Methods of compatibilities

2.4 電泳條件 10mmol/L咪唑，4mmol/L酒石酸，以0.1mol/L的HCl和氨水調節pH至4.5制備電泳緩沖溶液，緩沖溶液超聲脫氣備用。毛細管柱在使用前依次用0.1mol/L鹽酸、0.1mol/L氫氧化鈉、水和緩沖溶液清洗。兩次進樣之間用緩沖溶液沖洗3min，在分離電壓下平衡3分鐘。分離電壓15Kv;進樣時間5s;檢測波長214nm。

2.5 線性考察 精密吸取上述Na儲備液0.1，0.2，0.4，0.6，0.8mL，重蒸水定容至10mL;精密吸取上述Ca儲備液0.1，0.2，0.3，0.4，0.5mL，重蒸水定容至10mL。按上述電泳條件進行測定，以進樣量 (mg/mL)對峰面積(A)進行線性回歸，求得Na元素回歸方程為:Y=3.2586X+0.4671，r=0.9997;Ca元素回歸方程為 Y=5932.08X+43.2778，r=0.9998，結果表明，Na、Ca元素分別在0～14.5313μg/mL，0～1.4977mg/mL之間呈良好的線性關系。

2.6 精密度試驗 分別吸取Na、Ca標準溶液，按上述電泳條件重復進樣6次，測定Na、Ca峰面積，其 RSD值分別為2.25%和1.77%，結果表明精密度較好。

2.7 穩定性試驗取同一批石膏粉末，按“2.3供試品溶液的制備”方法處理后，分別在制備后0，1，2，4，6，8，10，12，24，36h進樣分析，測定Na、Ca峰面積，計算得其RSD值分別為1.4%和1.98%，表明樣品在36小時內穩定性較好。

2.8 重復性試驗 取同一批石膏粉末6份，按“2.3供試品溶液的制備”方法處理后，按上述電泳條件進樣分析，測定Na、Ca峰面積，計算得其RSD值分別為1.97%和2.35%，結果表明該方法重復性較好。

2.9 準確度試驗 取同一批石膏粉末6份，精密吸取Na(181.6410μg/mL)、Ca(29.9532mg/mL)標準溶液適量，加入已知含量的樣品中，按“2.3供試品溶液的制備”方法處理后，按上述電泳條件進行含量測定，并對數據進行處理，求加樣回收率。結果見表2，表3。

表2 Na元素準確度實驗Tab.2 Recovery of Na

表3 Ca元素準確度實驗Tab.3 Recovery of Ca

表4 生、煅石膏Na、Ca元素含量及比值Tab.4 Determination and Ratio of Na and Ca in gypsum and anhydrite

表5 復方中Na、Ca元素含量及比值Tab.5 Determination and Ratio of Na and Ca in compound

3 結果

各供試品溶液過0.45μm微孔濾膜過濾，超聲脫氣，進樣測定分析，結果見表4和表5。

4 討論

本文采用毛細管電泳測定石膏中Ca、Na元素含量，精密度、穩定性好，加樣回收率達到要求。

實驗考察了生、煅石膏在模擬胃酸pH提取液中Na、Ca元素的溶出率和Na/Ca比值。根據臨床用法用量，石膏的水煎液濃度較低，考慮到在服用中石膏混懸進入胃液消化，因此考察了模擬胃液以及模擬胃酸pH范圍的提取液，兩者的區別在于是否加入了胃蛋白酶。實驗結果表明是否加入胃蛋白酶對石膏煎出液的濃度影響不大，這可能是因為胃蛋白酶促進蛋白質的分解，而對無機物的作用不大，因此選擇直接用模擬胃酸pH濃度的溶液37℃提取。通過含量測定發現生石膏的Na+、Ca2+溶出率較煅石膏高，Na/Ca比值較煅石膏低，進一步說明了生石膏解熱功效與Na、Ca含量的多少有關。

實驗考察了白虎湯、去石膏的白虎湯、以煅石膏、化學藥分別代替石膏入白虎湯的Na、Ca含量以及Na/Ca比值，結果發現Ca的含量以復方中最高，化學藥方其次，去石方最低Na/Ca比值;Na/Ca比值則以復方中最低，化學藥其次，去石方最高?？蛇M一步推測石膏解熱作用的物質基礎可能與Na/Ca的比值有關。煅石膏入方劑后溶液中Ca含量較原方及化學藥方低，推測Ca含量的差異可能與硫酸鈣是否帶有結晶水有關;生石膏與煅石膏相比，在方中有增加Ca含量的作用。

復方中成分的含量變化受多方面因素影響，包括藥物之間的作用及體內吸收等，具體解熱機制有待進一步研究。

1.韓濟生.中樞神經介質概論 ［M］.科學出版社，1980:403.

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