訶子粗提物影響家兔離體小腸運動的試驗

王 軍,張秀鳳,宋予震,霍 軍

(鄭州牧業工程高等?？茖W校,河南 鄭州 450011)

訶子為常用中藥之一,為使君子科植物,訶子的干燥果實又名訶黎勒或隨風子。其主要成分為鞣酸[1]。本品長圓形或卵圓形,長 2～4 cm,直徑2～2.5 cm。表面黃棕色或暗棕色,略具光澤,有5～6條縱棱線及不規則的皺紋,基部有圓形果梗痕。質堅實。果肉厚0.2～0.4 cm,黃棕色或黃褐色。果核 1.5～2.5 cm,直徑 1～1.5 cm,淺黃色,粗糙,堅硬。無臭,味酸澀后甜?，F代藥理試驗證明,訶子具有良好的斂郁澀腸而止瀉、降火利咽、調和藥性、解毒、抑菌、殺滅或抑制惡性腫瘤細胞等作用,臨床應用廣泛,尤其在民族醫學藏藥和蒙藥中最為常用。在藏藥學經典著作《晶珠本草》中,訶子被稱“藏藥之王”。訶子在蒙藥中也是使用頻率最高的藥物[2]。例如訶子的提取物有較強的抑菌作用,臨床上多用于肺部及消化道的感染。訶子在我國資源豐富且具有多方面的藥理活性,在疾病預防、治療以及飼料添加劑等諸方面都不失為一種應用前景廣闊的藥物,具有廣泛的開發價值,尤其是在治療水瀉等胃腸道疾病方面有很重要的作用[3],因此對訶子的作用機理及臨床應用要更進一步的研究。

本試驗設計采用離體家兔小腸灌流,觀察了訶子提取物導致離體小腸平滑肌收縮力的作用,并初步探討了其作用機制。

1 材料、試劑和儀器

試驗材料:訶子粗提物由鄭州牧業工程高等?？茖W校提供。試驗用家兔購自鄭州牧業工程高等?？茖W校實驗動物中心。試驗儀器:恒溫水浴鍋、天平、張力換能器、平滑肌離體灌流裝置、生物信號采集系統、100～1000μL微量移液器。試驗試劑 ∶乙酰膽堿(1∶100000)、酚妥拉明、心得安、臺氏液等。

2 藥液濃度的配置

用天平稱取訶子粗提物1 g置于有刻度的試管中,加入臺式液9mL,搖勻使之充分溶解,所得相當于生藥1 g/mL藥液。

3 試驗方法

3.1 標本制備 將禁食24 h的兔擊暈,快速剖腹,分別剪下十二指腸、空腸和回腸2～3 cm左右,分別放入38℃臺式液中輕輕漂洗,取活動較有規律的一段長2～3 cm的腸段,一端固定于浴管底部的小鉤上,另一端用手術線連接固定于張力換能器的應變簧片上。將標本浸置于含37℃臺式液的浴管中。通過調整使腸管及其連線有一定的緊張度,即有一定的前負荷,一般前負荷為1～4 g。腸段勿牽拉過緊或過松,腸段避免與周圍管壁接觸,以免摩擦[4-6],用塑料管將充滿氧氣的氣囊與浴管底部的進氣管相連,調節塑料管上的螺旋夾,以控制氣流量。

3.2 試驗記錄與加藥 待腸管活動穩定后再用移液器加樣,同時打下標記,以收縮頻率(次/min)幅度和收縮張力(g)為指標,用生物信號采集處理系統通過第3通道紀錄。采用生物統計學方法,所有數據用均值標準差(D)表示,各組均值間的差異性用t檢驗判斷,P＜0.05表示差異顯著,P＜0.01表示差異極顯著。

4 結果與分析

4.1 訶子粗提物對離體小腸平滑肌腸管收縮活動的影響 訶子粗提物1.0 g/mL,可使十二指腸、空腸和回腸的收縮幅度減小、張力明顯降低(P＜0.05),緊張性下降,收縮頻率減慢,但無顯著差異(P＞0.05)(見圖 1、圖 2和圖3),試驗后灌流離體小腸,腸管逐漸又恢復至加樣前正常的波峰。

4.2 訶子的粗提物對十二指腸的作用機制

4.2.1 十二指腸正常情況下先加入乙酰膽堿阻斷膽堿能M受體,然后再逐漸加入1 g/mL訶子的粗提物并且逐漸加大其劑量,可以得知小劑量時與單獨加入1 g/mL訶子的粗提物相比較無明顯差異(P＞0.05),但隨著訶子粗提物劑量的加大差異開始顯著(P＜0.05)(見圖4),表明訶子粗提物對十二指腸的抑制可能由膽堿能M受體介導,但訶子粗提物激活M受體抑制十二指腸的運動與訶子的濃度相關。

4.2.2 用酚妥拉明阻斷腎上腺α受體和用心得安 腎上腺β受體后,再加入1 g/mL訶子的粗提物,可以得知與單獨加入1 g/mL訶子的粗提物相比較,十二指腸張力降低百分率差異極顯著(P＜0.01)(見圖5和圖6)。表明訶子粗提物對酚妥拉明有拮抗作用,其抑制可能是由腎上腺α受體或腎上腺β受體介導。

5 討論

5.1 訶子含有多種化學成分,其主要成分為鞣酸,不同炮制工藝對訶子中鞣酸質含量有影響[9]。本試驗中訶子的粗提物可以使家兔的十二指腸、空腸和回腸的平滑肌有顯著的抑制活動,這一結果與以往的報道訶子具有良好的斂郁澀腸而止瀉[7]相符,可能是與鞣酸的作用相關。

5.2 訶子粗提物對家兔的離體十二指腸、空腸和回腸有明顯抑制作用,可使十二指腸、空腸和回腸的收縮幅度減小、張力明顯降低,緊張性下降,收縮頻率減慢不顯著,表明訶子粗提物可能通過抑制小腸運動的張力使腸管內容物停留時間延長從而發揮其止瀉作用的。

5.3 訶子可用于治療消化系統疾病,如栗福星就報道過訶子對牛腹瀉的治療。這可能與其抑制小腸的收縮活動有關。小腸是消化吸收的主要場所,其機械活動受到神經和體液因素調節,也受中藥中某些化學物質的調節。如β受體激活可使小腸平滑肌舒張,本試驗中用膽堿能可以阻斷M受體,酚妥拉明可以阻斷β受體,心得安可以阻斷α受體 ,然后在兔離體十二指腸中加入訶子粗提物的結果中可推之訶子的作用可能與激活腎上腺α、β受體和膽堿能M受體都有關,但與激活膽堿能M受體與訶子粗提物的濃度相關,從而提示訶子含有抗膽堿能受體成分,但需要在用藥方面應考慮其劑量。訶子對腸管的作用機制與其劑量的使用方面還有待于進一步研究,才能使訶子在開發應用方面有效的利用。

[1]李經緯,余瀛鰲,蔡景峰,等.中醫大辭典[M].北京:人民衛生出版社,1987:821.

[2]王金華,孫芳云,杜冠華,等.訶子的藥理作用研究進展[J].中國民族醫藥雜志,2006,12(6):22-24.

[3]栗福星,劉利勇.巧用訶子治療牛水瀉[J].中國牛業科學,2007,33(2):5.

[4]寧榴賢,曾凡潘,吳興達,等.磁處理黨參藥液對小腸平滑肌收縮活動影響的研究[J].生物磁學,2004,4(3):6-9.

[5]宋士軍,李芳芳,張麗華,等.何首烏對家兔小腸平滑肌收縮活動和電活動的影響[J].河北醫科大學學報,2007,28(2):85-88.

[6]張麗華,宋士軍,孫英,等.魚腥草對家兔小腸平滑肌收縮活動和電活動的影響[J].河北中醫學學報,2007,22(1):3-5.

[7]蘇孝共,朱光輝,王增壽,等.訶子的炮制研究[J].江西中醫學院學報,2006,18(5):49-50.