血小板抗體檢測及其配型在臨床上的應用

韓金玉

(山東省菏澤市中心血站，山東菏澤274000)

血小板輸注是目前臨床治療各種因為血小板數量減少引起的出血性疾病的常用治療措施，然而，隨著臨床大量地使用血小板的情況越來越普遍，反復輸血者可能產生血小板相關抗體及輸血小板無效(refractoriness to platelet transfusion，RPT)，這成為困擾廣大臨床醫師的重大問題。多次輸血和輸血小板的患者可產生血小板抗體，輸注次數和輸注量越多，患者體內產生免疫相關性血小板抗體的概率越高［1］，RPT的發生率也越高。為提高血小板輸注的療效和安全性，本研究旨在分析RPT的主要原因，并試圖尋找解決RPT的方法。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取我血站自2008年12月至2010年12月的住院患者共96例。根據輸血的次數將96例患者分為兩組。其中輸注血小板3次以上的患者50例為A組(包括缺鐵性貧血4例，再生障礙性貧血10例，骨髓增生異常綜合征7例，各種類型白血病29例);首次申請輸血小板的患者46例為B組(包括缺鐵性貧血3例，再生障礙性貧血8例，骨髓增生異常綜合征5例，各種類型白血病30例)。所有患者在輸注血小板前檢測血小板抗體均為陰性。1 U血小板含有血小板數量 ＞4.0×109/L，白細胞計數 ＜2.0×109/L，1 U血小板的總量為70 mL。每10 kg體質量輸注血小板1 U，每周輸注2～3次。兩組患者的性別、體質量、年齡及病情比較具有均衡性(P＞0.05)。

1.2 實驗方法 采用免疫熒光試驗檢測人類白細胞抗原Ⅰ類(human leucocyte antigenⅠ，HLA-Ⅰ)和人類血小板抗原(human platelet antigen，HPA)，分別對血小板HLA-Ⅰ類和HPA抗體進行定性檢測，血小板輸注前進行交叉配型。

1.3 血小板增值計算 采用輸注后校正增值計數(corrected count increment，CCI)作為量化的判斷依據。計算輸注血小板后1 h和24 h的CCI。CCI=(輸注后血小板計數-輸注前血小板計數)×體表面積/輸注血小板總數。若輸注后1 h CCI＞7.5×109/L，或24 h CCI＞4.5 ×109/L 為輸注有效，否則為無效［2］，觀察有無輸血反應。

1.4 統計學方法 采用SPSS 12.5版本統計學軟件包對數據進行處理。等級資料采用秩和檢驗，計數資料采用χ2檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

A組患者中，檢出抗體陽性者30例(其中HLA抗體陽性24例，HPA抗體6例)。B組患者中，檢出抗體陽性者4例(其中HLA抗體陽性1例，HPA抗體3例)，兩組血小板抗體陽性情況比較，差異有統計學意義(P＜0.05)(表1)。將血小板抗體陽性患者34例隨機分成2組，其中一組不作配型，直接輸注ABO同型血小板10 U;另一組進行配型后再輸注相合的血小板10 U，分別檢測輸注血小板后1 h和24 h血小板計數，計算CCI值，并判斷輸注的效果(表2)。配型組與未配型組輸血小板效果比較，差異有統計學意義(Z=4.04，P ＜0.05)。

表1 兩組患者血小板抗體產生情況和抗體陽性率比較

表2 配型組與未配型組輸血小板效果比較

3 討論

引起RPT的原因主要可分為免疫性因素和非免疫性因素，前者主要包括:ABO血型抗原不合、HLA抗原不合、HPA抗原不合。而HLA-Ⅰ類抗體是導致RPT最常見的免疫因素，占所有免疫因素的80%，由HPA抗體引起的RPT約占所有病因的1.7%［3］。大量反復輸血患者產生血小板抗體的概率可高達50%以上。曾有文獻報道，多次輸注血小板的患者血小板相關抗體陽性率為47.4%，且隨輸注次數的增多而升高［4，5］。

關于要說明抗體與輸注無效之間的關系，存在著各種不同的說法。部分原因是由于各種非免疫因素可引起輸注無效。大部分發生RPT輸注無效的個體是女性，可能因為懷孕而致敏。當輸注了HLA和HPA相容的濃縮血小板后血小板計數得到了提升?？偟膩碚f，比較一致地認為，檢測到的HLA和(或)HPA抗體與血RPT是相關的。Kurz等［6］認為，在某些淋巴細胞毒性試驗中陰性但血小板抗原單克隆抗體固定法陽性的HLA抗體影響血小板輸注后的血小板計數增加。研究資料表明，有些RPT的患者并不能證實有抗體存在。有少數患者在既沒有檢測到HLA也沒有HPA抗體的情況下，輸注了匹配的血小板后仍然沒有血小板計數的提升。這種情況可能是非免疫因素影響了輸入的血小板的作用，也有可能存在至今未明確的抗體而引起RPT。還有的患者沒有可檢測的抗體，但在輸注了匹配的血小板后血小板計數得到了明顯的提升，與這種結果有關的科學性的及臨床性的機制還不太清楚。HPA和CD36抗體，不論單獨還是一起與HLA抗體出現，都有臨床意義，因為輸注非相容的血小板后，都能觀察到血小板計數提升很低或有輸血后紫癜的發生［7］。隨著臨床輸血事業日新月異的發展，血小板的使用日益廣泛。血液病患者迅速增加，血站提供血小板的需求量也大大增加。但是，隨著大量使用血小板的情況出現，RPT成為困擾臨床醫師的大問題，多次輸血小板的患者產生血小板抗體的概率高，即反復輸血者可能產生血小板相關抗體及RPT。一般情況下，把監控血小板輸注結果常用的公式，即CCI和血小板回收率作為判別依據，當輸注后1 h CCI＜7.5和20 h CCI＜4.5或1 h回收率 ＜20%，則認為 RPT。RPT有非同種免疫因素和同種免疫因素，非同種免疫因素包括血小板質量、發熱、感染、彌散性血管內凝血、骨髓移植、脾大等因素。另外，血小板上由于存在血小板相關抗原，主要是 HLA-Ⅰ類抗原和HPA，所以針對臨床上出現的RPT的患者，菏澤市中心血站擬對反復輸血小板的患者進行血小板抗體篩查，并對陽性者進行配型后再進行輸注，盡量提高血小板的輸注效果，使有限的資源得到充分合理的利用。

［1］龔建光，單筠.多次輸血小板患者進行血小板抗體篩檢和配型的臨床意義［J］.檢驗醫學與臨床，2009，6(22):1927-1928.

［2］田莉，夏琳，楊桂芳.微柱凝膠免疫技術檢測血小板同種抗體及配型的臨床應用［J］.臨床血液學雜志，2008，21(4):406-408.

［3］閆東河，李廷孝，孫衲廷，等.反復輸血者血小板抗體對血小板輸注效果的影響［J］.中國輸血雜志，2003，16(1):7-8.

［4］劉達莊，陸萍，王建蓮，等.血小板同種抗體與輸血效果［J］.中國輸血雜志，1993，6(2):76.

［5］李嵐，張愛根，李妙珊.血小板輸注無效患者的血小板抗體檢測［J］.中國現代醫學雜志，2008，18(15):2227-2228.

［6］Kurz M，Kn?bl P，Kalhs P，et al.Platelet-reactive HLA antibodies associated with low posttransfusion platelet increments:a comparison between the monoclonal antibody-specific immobilization of platelet antigens assay and the lymphocytotoxicity test［J］.Transfusion，2001，41(6):771-774.

［7］Treleaven J，Gennery A，Marsh J，et al.Guidelines on the use of irradiated blood components prepared by the British Committee for Standards in Haematology blood transfusion task force［J］.Br J Haematol，2011，152(1):35-51.