RP-HPLC測定阿那曲唑的含量

楊玉琴 洪麗萍 陳月霞 李競梅 石晶萍 朱佳麗

·實驗研究·

RP-HPLC測定阿那曲唑的含量

楊玉琴 洪麗萍 陳月霞 李競梅 石晶萍 朱佳麗

目的 建立阿那曲唑含量測定的反相高效液相色譜(RP-HPLC)法。方法 色譜柱Agilent XDB-C18柱(150 mm×4.6mm, 5 μm)；流動相為乙腈-水(44:56), 流速1.0 ml/min, 檢測波長210 nm。結果阿那曲唑在5.00~18.00 μg/ml范圍內線性關系良好, r=0.9995。平均回收率為99.69%, RSD為0.3%(n=6)。結論 本方法簡便、準確, 可以用于阿那曲唑的定量分析。

反相高效液相色譜；阿那曲唑；含量測定

阿那曲唑是本公司生產的抗腫瘤類原料藥, 其制劑是艾達(阿那曲唑片), 主要適用于他莫昔芬及其它抗雌激素療法仍不能控制的絕經后婦女的晚期乳腺癌。本文參考原質量標準［1］和藥典方法［2］對測定阿那曲唑含量的方法進行了研究及各項驗證, 結果表明使用RP-HPLC方法可以簡便、準確測定阿那曲唑的含量。

1 儀器與試藥

瑞士Mettler Toledo XP205 電子分析天平, 美國安捷倫公司高效液相色譜儀Agilent1200 Series等。

阿那曲唑對照品(批號為：100770-200401)購于中國藥品生物制品檢定所, 阿那曲唑(批號分別為：13070111, 13080111, 13090111), 試驗用乙腈為色譜純, 配制用水為超純水。

2 方法

2.1 系統適應性試驗和色譜條件 色譜柱為：美國Agilent XDB C18柱(250 mm×4.6 mm, 5 μm)；流動相為：乙腈-水(44：56)；流速1.0 ml/min；檢測波長210 nm；柱溫：30℃；流速：1.0 ml/min。在此色譜條件下, 理論板數以阿那曲唑峰計大于2000, 溶劑不干擾測定, 此色譜條件可行。

2.2 配制對照品溶液 稱取阿那曲唑對照品適量, 用流動相溶解并制成每1 ml含100 μg的對照品貯備液。

2.3 線性關系試驗 分別精密吸取上述對照品貯備液適量,用流動相稀釋制成濃度分別為：5、8、10、12、15、36 μg/ ml的樣品溶液, 按上述色譜條件分別依次進樣20 μl, 橫坐標(X)為阿那曲唑的濃度, 縱坐標(Y)為峰面積積分值, 求得回歸方程為： Y=60.88 X+9.859 相關系數r=0.9995。

結果表明阿那曲唑的濃度和峰面積積分值在5.00~18.00 μg/ml的濃度范圍內呈良好的線性關系。

2.4 精密度試驗 取阿那曲唑對照品溶液(0.01012 mg/ml),進樣體積為：20 μl, 重復進樣6次, 結果阿那曲唑峰面積RSD值為0.1%。

2.5 穩定性試驗 取濃度為0.01015 mg/ml的樣品溶液, 在25℃下放置考察, 精密量取供試品溶液20 μl, 在放置0、2、4、6、8、12 h后分別測定1次, 共測定6次, 記錄峰面積, 阿那曲唑峰面積均值為618.17559, RSD值為0.4%, 結果表明供試品溶液在12 h內穩定。

2.6 重復性試驗 取批號為13120111的樣品, 按照“2.8”項下方法同法制備6份供試品溶液, 結果阿那曲唑含量均值為99.90%, RSD為0.2%。

2.7 加樣回收率試驗 采用加樣回收法。取已知阿那曲唑含量的樣品(13010111、13010211、13010311)適量, 分別精密加入阿那曲唑對照品溶液(0.02 mg/ml)10 ml, 按照“2.8”項下方法同法制備6份供試液, 分別依次進樣20 μl, 計算得平均回收率為99.69%, RSD為0.3%

2.8 樣品含量測定 取本品, 精密稱定適量, 置100 ml量瓶中, 加乙腈約5 ml, 振搖使阿那曲唑溶解, 加流動相稀釋至刻度, 搖勻, 制成每1 ml溶液中約含10 μg的溶液, 用0.45 μm微孔濾膜濾過, 分別依次進樣20 μl, 按外標法計算供試品中阿那曲唑的含量。

3 小結

作者分別選取了不同配置比例的流動相, 不同廠家和規格的色譜柱進行分析驗證, 驗證結果表明選擇最佳色譜條件是：流動相：乙腈-水(44:56)；色譜柱：Agilent XDB C18(150 mm×4.6 mm, 5 μm)；柱溫：30℃；流速：1.0 ml/ min；波長：210 nm。

［1］ 國家食品藥品監督管理局.WSI-(X-085)-2005Z國家藥品標準.

［2］ 國家藥典委員會.中國藥典(二部) .北京：化學工業出版社, 2010:45.

2014-03-14］

225321 泰州, 揚子江藥業集團有限公司質量管理部質量檢測中心

洪麗萍