醋酸氯己定溶液質量標準提升研究

胡文軍，鄧朝暉，李愛紅

（中國人民解放軍廣州軍區聯勤部藥品儀器檢驗所，廣東 廣州 510500）

醋酸氯己定溶液質量標準提升研究

胡文軍，鄧朝暉，李愛紅

（中國人民解放軍廣州軍區聯勤部藥品儀器檢驗所，廣東 廣州 510500）

目的提高醋酸氯己定溶液的質量控制標準。方法建立測定醋酸氯己定溶液中醋酸氯己定含量的高效液相色譜法（HPLC）法。色譜柱：Grace Smart柱（250 mm×4．6 mm，5 m），用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；流動相：0．02 mol／L磷酸二氫鉀溶液（取磷酸二氫鉀2．7 g，加水溶解并定容至1 000 mL，用磷酸調pH至2．5）-乙腈（65∶35）；檢測波長：258 nm。結果醋酸氯己定質量濃度在10．02～160．31 g／mL范圍內與峰面積線性關系良好，回收率為102．47%，RSD為1．60%(n=9)。結論提高后的質量標準可行。

醋酸氯己定溶液；醋酸氯己定；高效液相色譜法

醋酸氯己定溶液是2002年版《中國人民解放軍醫療機構制劑規范》收載的醫院制劑，具有消毒、防腐作用，臨床用于皮膚、黏膜消毒。其處方為醋酸氯己定0．2 g（規格0．02%）或0．5 g（規格0．05%），加水適量，按制備工藝制成1 000 mL，即得[1]。已有文獻報道了采用紫外分光光度法[2]和高效液相色譜(HPLC)法[3-5]測定不同藥物中醋酸氯己定的含量，但后者目前尚未被2010年版《中國藥典(二部)》收載，2002年版《中國人民解放軍醫療機構制劑規范》也是采用紫外分光光度法測定處方中醋酸氯己定含量的HPLC法[6-8]。本試驗中擬建立測定醋酸氯己定溶液中醋酸氯己定含量的HPLC法，以增強測定方法的專屬性和準確度。

1 儀器與試藥

Waters 2695型高效液相色譜儀（美國Waters公司）；XS105型分析天平（梅特勒公司）。醋酸氯己定溶液（規格0．02%，批號為130711-1，130711-2，30711-3；規格0．05%，批號為130711-1，130711-2，30711-3，中國人民解放軍第458醫院提供）；醋酸氯己定對照品（中國藥品生物制品檢定所，批號為100183-201003，含量為96．2%）；乙腈（Merck公司，色譜純），水為純化水，其他試劑均為分析純。

2 方法與結果

2．1 色譜條件

色譜柱：Grace Smart柱（250 mm×4．6 mm，5 μm），用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；流動相：0．02 mol／L磷酸二氫鉀溶液（取磷酸二氫鉀2．7 g，加水溶解并定容至1 000 mL，用磷酸調pH至2．5）-乙腈（65∶35）；檢測波長：258 nm。理論板數按醋酸氯己定峰計算不低于2 000。

2．2 溶液制備

精密稱取醋酸氯己定對照品適量，加水溶解并定量稀釋制成每1 mL中約含25 μg醋酸氯己定的對照品溶液。精密量取樣品5 mL，加水稀釋制成每1 mL含醋酸氯己定25 μg的溶液，即得供試品溶液。取依處方比例，按生產工藝制備所得的不含醋酸氯己定的陰性對照品溶液，按供試品溶液制備方法制成陰性對照品溶液。

2．3 方法學考察

專屬性考察：按擬訂色譜條件，分別注入對照品溶液、供試品溶液和陰性對照品溶液各10 μL進行測定。結果表明，醋酸氯己定分離完全，陰性無干擾(見圖1)。

圖2 高效液相色譜圖

線性關系考察：稱取醋酸氯己定對照品約0．25 g，精密稱定，置250 mL容量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，作為貯備液。分別精密量取貯備液0．5，2，4，5，6，7，8 mL，置50 mL容量瓶，加水制成醋酸氯己定質量濃度分別為 10．02，40．08，80．17，100．21，120．25，140．29，160．3 μg／mL的系列溶液，依法測定，以質量濃度（X）為橫坐標、峰面積（Y）為縱坐標進行線性回歸，得醋酸氯己定的回歸方程 Y=13 160 X+53 121，r=0．999 8(n=7)。結果表明，醋酸氯己定質量濃液在10．02～160．31 μg／mL范圍內與峰面積呈良好的線性關系。

精密度試驗：取醋酸氯己定對照品溶液適量，按擬訂色譜條件，連續進樣6次，記錄色譜圖。結果的 RSD為0．2%(n=6)，表明儀器精密度良好。

重復性試驗：精密量取樣品（規格為0．02%，批號為130711-1）適量，依法制備供試品溶液，按擬訂色譜條件測定含量。結果的RSD為0．2%（n=6），表明方法重復性良好。

回收試驗：分別取醋酸氯己定對照品適量，加75%乙醇配成相當于標示量80%，100%，120%的供試品溶液，各精密量取3份，照擬訂色譜條件測定，計算回收率。結果見表1。

表1 醋酸氯己定加樣回收試驗結果（n=9）

穩定性試驗：取供試品(批號為130712-1)溶液，分別于0，3，6，12，24 h時進樣測定含量。結果的 RSD為0．7%(n=5)，表明供試品溶液在24 h內穩定性良好。

定量限：精密稱取醋酸氯己定對照品適量，加水稀釋制成每1 mL中約含醋酸氯己定0．012 5 μg的溶液。按信噪比為10∶1，測得復方醋酸氯己定的定量限為0．012 5 μg／mL。

2．4 樣品含量測定

采用擬訂方法測定，結果規格為0．02%，批號為130712-1，130712-2，130712-3的樣品含量分別為標示量的 99．42%，99．01%，98．86%；規格為0．05%，批號為130712-1，130712-2，130712-3的樣品含量分別為標示量的 98．47%，100．32%，97．13%，均符合規定。

3 討論

醋酸氯己定為孕激素類藥物，2010年版《中國藥典(二部)》及2002年版《中國人民解放軍醫療機構制劑規范》均采用紫外分光光度法進行含量測定。為減少測定誤差，方便試驗操作，筆者建立了HPLC法測定醋酸氯己定軟膏的含量。經方法學驗證，該法操作簡單、快速可靠，具有良好的線性、回收率和重復性，可用于醋酸氯己定溶液中醋酸氯己定的含量測定。

取醋酸氯己定對照品適量，加水制成每1 mL中含醋酸氯己定約25 μg的溶液，參照紫外-可見分光光度法[6]在200～400 nm波長掃描，根據紫外光譜圖，選擇258 nm為檢測波長。本試驗中對不同比例的流動相進行篩選，結果文中的流動相最佳，保留時間適當，峰形好。

藥典中采用HPLC法進行含量測定時，通常以含量測定時的樣品及對照品色譜圖可用于醋酸氯己定的專屬性鑒別試驗，建議列入質量標準中，以提高檢驗效率。

參考文獻:

[1]中國人民解放軍總后勤部衛生部．中國人民解放軍醫療機構制劑規范[M]．北京：人民軍醫出版社，2002：164．

[2]孫成宏，李云霞．紫外分光光度法測定復方醋酸氯己定涂膜劑中醋酸氯己定的含量[J]．解放軍醫藥雜志，2013，25（8）：91-93．

[3]盧素格，劉紅麗，楊瑞春．高效液相色譜測定皮膚消毒液中醋酸氯己定含量[J]．中國消毒學雜志，2011，28（3）：317-318．

[4]黃鐵花，胡 松，張 耕．HPLC法同時測定復方黃松洗液中鹽酸小檗堿和醋酸氯己定的含量[J]．中國藥房，2013，24（39）：3 709-3 710．

[5]王 璐．高效液相色譜法測定復方替硝唑氯己定含漱液中醋酸氯己定含量[J]．中國藥業，2012，21（15）：53-54．

[6]國家藥典委員會．中華人民共和國藥典（二部）[M]．北京：中國醫藥科技出版社，2010：附錄29-附錄31．

[7]中華人民共和國衛生部．中華人民共和國衛生部消毒技術規范[M]．北京:國家標準出版社，2008：121-122．

[8]張蘇蘅，田曉薇，康阿龍．高效液相色譜法測定施美樂涂膜中醋酸氯己定含量[J]．中國藥業，2013，22（6）：60-61．

Quality Control of Chlorhexidine Acetate Solution

Hu Wenjun,Deng Zhaohui,Li Aihong
(Institute for Drug and Instrument Control of Guangzhou Military Area Command,Guangzhou,Guangdong,China 510500)

Objective To improve the standard of the quality control of Chlorhexidine Acetate Solution．M ethods A method to determine Chlorhexidine Acetate by HPLC was established．The chromatographic column was the Grace Smart Column（250 mm×4．6 mm，5 m）, filled with octadecysilane chemically bonded silca;the mobile phase was monopotassium phosphate 0．02 mol／L(2．7 g to 1 000 mL，pH 2．5)-acetonitrile(65∶35);the detection wauelength 258 nm．Results Chlorhexidine Acetate showed excellent linearity,which were at the range of 10．02～160．31 μg／mL．The average recoveries was 102．47%,RSD was 1．60%(n=9)．Conclusion The methods were simple,sensitive and with good reproducibility and could be used to control the quality of Chlorhexidine Acetate Solution．

Chlorhexidine Acetate Solution;chlorhexidine acetate;HPLC

R927.2；R979.7

A

1006-4931(2015)21-0113-03

胡文軍，男，浙江諸暨人，博士研究生，副主任藥師，研究方向為藥品檢驗，（電話）020-88698373（電子信箱）stars3＠sina．com。

2014-09-30；

2015-03-05)

全軍醫療機構制劑標準提高科研專項課題，項目編號：13ZJZ19-3。