4種犬棘球絳蟲檢查方法對比觀察

胡廣衛，蔡金山，馬睿麟，趙全邦，馬占全，李連芳，李　靜（青海省動物疫病預防控制中心，青海西寧810001）中圖分類號：S852.732　　文獻標志碼：B　　文章編號：0529- 6005（2015）10- 0043- 02

4種犬棘球絳蟲檢查方法對比觀察

胡廣衛，蔡金山，馬睿麟，趙全邦，馬占全，李連芳，李靜
（青海省動物疫病預防控制中心，青海西寧810001）
中圖分類號：S852.73+2文獻標志碼：B文章編號：0529- 6005（2015）10- 0043- 02

棘球蚴?。‥chinococcosis）是由棘球屬（Echino?coccus）絳蟲的中絳期幼蟲—棘球蚴寄生于動物和人的內臟所致的一類嚴重危害人體健康和阻礙畜牧業發展的人畜共患寄生蟲病，又稱包蟲?。╤ydatid disease）。本病呈世界性分布，主要流行于歐洲、非洲北部、亞洲、南美洲和大洋洲，在我國主要見于新疆、寧夏、青海、西藏、甘肅、四川阿壩等放牧地區。棘球蚴病的終末宿主以犬科動物為主，棘球絳蟲感染的診斷主要有糞便蟲卵檢查法、剖檢法、氫溴酸檳榔堿瀉下法、糞抗原ELI?SA法、糞便蟲體DNA檢查法[1]和血清抗體ELISA法等。幾種檢查方法中，目前使用較多的仍然為世界衛生組織（WHO）和世界動物衛生組織（OIE）推薦的作為檢測標準的方法—常規的氫溴酸檳榔堿瀉下法和剖檢法，剖檢法最為直觀，也最為準確。除剖檢法之外的另外幾種方法在臨床上也應用較多，各有優劣，但很少有人同時將幾種方法應用同樣的試驗動物在一起進行比較。本試驗以剖檢法為標準，比較了糞便蟲卵檢查法、糞抗原ELISA法和氫溴酸檳榔堿瀉下法的陽性檢出率，為今后的犬棘球絳蟲檢測工作提供依據。

1　材料與方法

1.1材料氫溴酸檳榔堿，購自內蒙古赤峰獸藥廠；蔗糖，犬糞細粒棘球絳蟲抗原ELISA檢測試劑盒，購自珠海海泰生物制劑有限公司；顯微鏡等。

1.2試驗動物28條犬，來自于青海省澤庫、貴南、互助、剛察、同德、海晏和興?？h，為牧羊犬和流浪犬。

1.3方法試驗犬空腹后先進行氫溴酸檳榔堿瀉下法進行檢查，同時收集犬排出的糞便，然后進行剖檢法檢查。收集的糞便標記清楚后-20℃保存，先后在實驗室進行糞便蟲卵檢查和糞抗原ELISA法檢測。

進行所有檢查時要求操作者以及助手穿防護服，戴口罩。操作過程中要避免被犬咬傷或抓傷，試驗完畢后的廢棄物集中進行無害化處理。

1.3.1氫溴酸檳榔堿瀉下法選擇比較安全的場地，將試驗犬拴牢。給空腹12 h的犬灌服氫溴酸檳榔堿，40 min～60 min后，在被檢犬排出大量正常糞便后，會排出標準糞便（無內容物的黏性液體），通過檢查標準糞樣中有無棘球絳蟲而進行棘球絳蟲病的診斷。

糞便收集完后，將犬繼續固定12 h，排出的糞便深埋。所有地面上糞便清除干凈，扔入廢坑，撒入石灰，并用土埋實，以免小孩或犬將坑內廢棄物弄出造成污染。凡被犬糞接觸過的地面、鐵鍬、鐵釬、鐵鏈等一律用噴燈焚燒。

1.3.2糞便蟲卵檢查法飽和蔗糖漂浮法：稱取0.5 g采集于試驗犬的糞便，放入15 mL離心管中，加少量飽和蔗糖液，充分攪拌后，再加飽和蔗糖液至略隆起于試管口，靜置30 min，鏡檢蟲卵計數。

1.3.3剖檢法將試驗犬解剖，從剖檢犬內臟中取出小腸，腸內容物置于盆中用生理鹽水漂洗沉淀，棄去上清數次后，用平皿逐份仔細檢查腸內容物。腸管用剪刀剪開后，用生理鹽水輕輕沖洗，然后肉眼或者放大鏡觀察腸壁內側有無棘球絳蟲并計數。

1.3.4糞抗原ELISA法應用犬糞細粒棘球絳蟲抗原ELISA檢測試劑盒，對采集于試驗犬的糞便進行犬棘球絳蟲病的檢測。

2　結果

試驗結果發現，剖檢法的棘球絳蟲檢出率為64.29%；而瀉下法為17.86%，糞抗原ELISA法為14.29%，糞便蟲卵檢查法最低，為3.57%，見表1。

表1　四種檢查方法棘球絳蟲陽性檢出率對比

3　結論

從結果可以看出，作為評價其他檢測方法的“金標準”[2]，剖檢法的陽性檢出率比其他幾種方法高出很多，但是實際操作起來比較麻煩，可行性不大。相比之下，氫溴酸檳榔堿瀉下法和糞抗原ELISA法的檢出率要低很多，這可能與瀉下法藥物和ELISA檢測試劑有一定關系，但兩者的檢出率比較相近，而且比糞便蟲卵檢查法要高，這與焦偉[3]等的研究比較相近。El-Shehabi F S[4]等在試驗中發現，犬糞抗原ELISA陽性率為剖檢法的61.5%，而本試驗比較低，為22.2%（4/18）。這可能是犬體內棘球絳蟲數量較少的因素，因為El-Shehabi F S等發現當犬體內棘球絳蟲在100條以上時ELISA的敏感性較高。剖檢法能比較直觀的觀察出犬有無棘球絳蟲感染，但現實中意義不大，僅可作為某一地區流行病學調查的一個手段。氫溴酸檳榔堿瀉下法是僅次于剖檢法的檢查方法，但有相當一部分犬只對檳榔堿不敏感，另外存在工作難度大、耗時費力、工作人員易感染蟲卵的潛在危險和對周圍生活環境污染的危險。所以，與氫溴酸檳榔堿瀉下法檢出率相近的糞抗原ELISA法應用起來就比較方便。黃燕[5]等在研究中指出，糞抗原ELISA法與剖檢結果相比，敏感性為92.3% ,特異性為80%，糞抗原在感染后的第2～3周可檢出，在早期診斷野生犬科動物自然感染棘球絳蟲病中也具有很高的應用價值。糞便蟲卵檢查法陽性檢出率不高，在實際應用中意義不大。

幾種檢查方法對犬棘球絳蟲的陽性檢出率差別較大，而且操作的可行性也不同，所以在犬棘球絳蟲病的診斷中要多種檢查方法互補，能有效的彌補不同檢查方法的缺陷，盡可能使檢查結果科學化。

參考文獻：

[1]張亞樓，溫浩，馬旭東，等.家犬糞便中的細粒棘球絳蟲DNA-PCR檢測方法的建立[J] .中國病原生物學雜志，2006，1（5）：363-365.

[2] Eckert J . Predictive values and quality control of techniques for the diagnosis of Echinococcus multilocularis in definitive hosts [J].Acta Tropica，2003，85（2）：157-163.

[3]焦偉，柴君杰，伊斯拉音，等.現場應用糞抗原檢測法診斷犬細粒棘球絳蟲感染的效果評價[J].中國寄生蟲病防治雜志，2003，3（16）：170-171.

[4] El-Shehabi F S，Kamhawi S A，Schantz P M，等.犬細粒棘球絳蟲的診斷：北諾爾當犬及紅狐的糞抗原檢測與尸檢法的對比〔英〕[J].國外醫學寄生蟲病分冊，2007，7（2）：83-90.

[5]黃燕，David H D，Christine A J，等.犬糞便棘球絳蟲抗原的雙抗體夾心酶聯免疫吸附試驗檢測法建立與應用[J].預防醫學情報雜志，2008，24（6）：407-411.

作者簡介：胡廣衛（1982-），男，獸醫師，碩士，從事動物防疫方向，E-mail：qhhgw@sina.com

收稿日期：2014-03-30