人參莖葉多糖對雛雞小腸黏膜組織發育和免疫細胞的影響

閆曉剛，張芳毓，郎洪彥，金香淑，趙中利，劉 臣

(吉林省農業科學院畜牧科學分院，公主嶺 136100)

人參莖葉多糖對雛雞小腸黏膜組織發育和免疫細胞的影響

閆曉剛，張芳毓，郎洪彥，金香淑，趙中利，劉 臣*

(吉林省農業科學院畜牧科學分院，公主嶺 136100)

為研究人參莖葉多糖(GSLP)對雛雞小腸黏膜組織發育和免疫細胞的影響，選擇600只體重相近(52.79±4.58 g)的7 日齡健康海蘭褐雛雞，隨機分為10個處理，每個處理60 只(3個重復，每個重復20只)，分為正常飼喂組和免疫抑制組，各包括5個處理，GSLP 添加量分別為0、0.2、0.4、0.8 和1.6 g·kg-1，試驗期35 d。飼養期結束后，每個處理中隨機選擇9 只雛雞(每個重復3只)，采集空腸和回腸樣品。結果顯示：(1)GSLP提高了空腸絨毛寬度和表面積(P<0.01)，0.8 g·kg-1GSLP 降低空腸絨毛高度和隱窩深度(P<0.05)，0.8和1.6 g·kg-1GSLP降低回腸絨毛高度和隱窩深度(P<0.01)，GSLP 對絨腺比無顯著影響；(2)空腸絨毛高度(P<0.05)和黏膜厚度(P<0.01)以及回腸絨毛高度(P<0.05)中存在GSLP與免疫狀態之間的交互作用；(3)0.4、0.8 和1.6 g·kg-1GSLP 增加空腸CD3+陽性細胞的面積(P<0.05)，1.6 g·kg-1GSLP提高空腸肥大細胞的數量(P<0.05)，GSLP對免疫細胞的作用存在劑量效應。結果表明，GSLP 對小腸黏膜發育具有一定的促進作用，但對養分吸收機能并無顯著影響；0.4～1.6 g·kg-1GSLP 提高空腸的黏膜免疫水平；GSLP對環磷酰胺前期抑制的空腸絨毛高度和黏膜厚度的發育具有改善作用。

人參莖葉多糖；蛋雛雞；小腸黏膜發育；免疫細胞

動物腸道既是養分消化吸收的主要場所，也是機體免疫系統的重要組成部分。完整和健康的腸道黏膜上皮結構和腸道微生物是抵御病原體入侵的結構屏障；腸道黏膜固有層內的T 淋巴細胞、B 淋巴細胞、杯狀細胞、巨噬細胞和肥大細胞(mast cell，MC)等免疫細胞及其分泌的免疫介質構成了腸道的免疫屏障[1-2]。

植物活性多糖對腸道黏膜發育和機體免疫機能具有廣泛的影響。有研究表明，黃芪多糖可以增加艾維茵肉仔雞小腸絨毛高度和寬度、黏膜厚度、絨腺比和絨毛表面積[3]。淫羊藿多糖和蘆薈多糖對小鼠T淋巴細胞具有有絲分裂原樣作用，能促進T、B 淋巴細胞的增殖，提高機體細胞免疫功能[4-5]。人參多糖對大鼠腸道黏膜淋巴細胞功能具有調節作用，增加大鼠腸道派伊爾節淋巴細胞干擾素-γ(IFN-γ)的分泌水平[6-7]。人參莖葉是人參加工產業的副產品，水溶性多糖成分約占干重的10%以上，化學成分和藥理作用與人參根須基本相同，但是目前其開發和利用并未受到足夠的重視。

幼齡動物腸道健康狀況對全期生產性能表現具有重要的影響。因此，本項研究以正常和環磷酰胺誘導免疫抑制海蘭褐蛋雛雞為試驗動物，觀察人參莖葉多糖(Ginseng stem and leaf polysaccharide，GSLP)對不同免疫水平雛雞腸道黏膜組織發育和免疫細胞的影響，明確其對腸道黏膜發育和免疫的調節效果，從而為GSLP 在畜牧生產中的合理應用提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗材料和試驗動物

GSLP 購買于吉林省宏久生物科技股份有限公司，前期分析結果表明其多糖含量為24.4%，單糖組成為葡萄糖(48.8%)、半乳糖(15.6%)、甘露糖(12.4%)、阿拉伯糖(10.2%)、鼠李糖(7.7%)、半乳糖醛酸(3.1%)和木糖(2.2%)。

采用隨機化完全區組試驗設計，600只7日齡海蘭褐蛋雛雞隨機分為10個處理，每個處理60只(3個重復，每個重復20只)，分為正常飼喂組和免疫抑制組，各包括5個處理。參考李相玲等研究結果[8]，試驗期免疫抑制組雛雞按體重灌服100 mg·kg-1環磷酰胺，正常飼喂組灌服等量生理鹽水，連續7 d。正常飼喂組和免疫抑制組基礎日糧中GSLP 添加量分別為0、0.2、0.4、0.8和1.6 g·kg-1。

1.2 試驗日糧

根據中國雞飼養標準(2004)生長蛋雞0～8周齡營養需要配制試驗日糧。試驗日糧組成及營養水平見表1。

1.3 飼養管理

試驗雛雞每天7:00飼喂1次，自由采食和飲水，采用常規免疫程序進行免疫。

1.4 樣品采集和分析

1.4.1 腸道組織 飼養期結束后，于早飼前分別從每個處理中隨機選擇9只雛雞(每個重復3只)屠宰，采集空腸和回腸樣品，根據待測指標的要求分別進行標記和保存。

1.4.2 小腸黏膜組織形態 試驗雞空腸和回腸的前1/3處取2 cm腸段，用生理鹽水沖洗干凈并及時置于4%中性甲醛溶液固定。常規制備石蠟切片，厚度為6 μm。

小腸絨毛組織形態結構采用蘇木素-伊紅(H.E.)染色，使用Leika 專用顯微鏡進行觀察。利用Leika Application Suite 照相處理軟件和圖像分析系統測量空腸和回腸絨毛高度、隱窩深度和黏膜厚度。每個腸段取4張切片，每個切片選取3個最長腸絨毛的高度及其相應隱窩深度、絨毛寬度和肌層厚度進行測量，取其平均值作為測定結果。絨腺比

表1 試驗日糧組成(風干基礎)和營養水平(干物質基礎)

Table 1 Ingredient composition (air-dry basis) and nutrient levels (DM basis) of trial diet

日糧組成Dietcomposition比例/%Ratio營養成分Nutrients含量/%Contents玉米Corn58.3干物質Drymatter89.06豆粕Soybeanmeal25.9粗蛋白質Crudeprotein19.84魚粉Fishmeal2.3粗脂肪Crudefat4.27大豆油Soybeanoil5.3總能/(MJ·kg-1)Grossenergy17.05玉米胚芽粕Corngermmeal2.0代謝能2/(MJ·kg-1)Metabolizableenergy11.94磷酸氫鈣CaHPO41.7粗纖維Crudefiber3.42石粉Limestone1.4粗灰分Ash5.79食鹽NaCl0.3無氮浸出物Nitrogenfreeextract55.75賴氨酸硫酸鹽Lysinesulphate0.3鈣Calcium1.09蛋氨酸Methionine1.5總磷Totalphosphorus0.71維生素和微量元素Vitaminsandtraceelements預混料1Premix1.0合計Total100

1.每千克預混料含維生素和微量元素：VA 500 kIU、VD3100 kIU、VE 1 000 IU、VK350 mg、 VB1180 mg、VB2360 mg、VB6350 mg、VB121 mg、煙酸 3 500 mg、泛酸 1 000 mg、葉酸 55 mg、生物素 15 mg、氯化膽堿 55 g、CuSO4·5H2O 3.0 g、FeSO4·H2O 25.0 g、ZnSO4·H2O 16.5 g、MnSO4·H2O 24 g、1%碘酸鈣 5.5 g、1% 亞硒酸鈉 3.3 g、1% 氯化鈷 0.4 g、NaHCO350 g。2.代謝能為計算值，其余為實測值和絨毛表面積計算公式如下：

1.Vitamins and microelements per kg of premix：VA 500 kIU，VD3100 kIU，VE 1 000 IU，VK350 mg，VB1180 mg，VB2360 mg，VB6350 mg，VB121 mg，Nicotinic acid 3 500 mg，Pantothenic acid 1 000 mg，Folic acid 55 mg，Biotin 15 mg，Choline chloride 55 g，CuSO4·5H2O 3.0 g，FeSO4·H2O 25.0 g，ZnSO4·H2O 16.5 g，MnSO4·H2O 24 g，1% Ca(IO3)25.5 g，1% Na2SeO33.3 g，1% CoCl20.4 g，NaHCO350 g.2.ME was a calculated value and others were measured values

絨腺比=絨毛高度/隱窩深度

絨毛表面積=2πrh，其中，r：小腸絨毛寬的1/2；h：小腸絨毛高度。1.4.3 小腸上皮內淋巴細胞(iIEL)數量 將上述用于觀察小腸黏膜組織形態的空腸和回腸組織切片進行iIEL計數，方法為計數每100個上皮細胞內的淋巴細胞數量，每個樣品觀察5個視野，取其平均值，并按處理求平均值。

1.4.4 空腸黏膜CD3+陽性細胞面積 空腸黏膜CD3+陽性細胞面積采用免疫組織化學法(IHC)進行測定，試驗過程按照鼠Streptavidin-HRP試劑盒(北京天恩澤生物技術有限公司)說明書操作。內源性過氧化物酶封閉10 min，蛋白質非特異結合位點封閉10 min，一抗(鼠抗雞)工作液孵育60 min，二抗(羊抗鼠IgG-Biotin)工作液孵育10 min，Streptavidin-HRP工作液孵育10 min，二氨基聯苯胺(DAB)顯色(20×，北京天恩澤生物技術有限公司)，蘇木素復染，乙醇梯度脫水透明，中性樹脂封片。利用Leika Application Suite 照相處理軟件和圖像系統分析。每個處理選取5 張切片，每張切片選取10個視野統計。

1.4.5 空腸上皮內杯狀細胞數量 采取空腸卵黃蒂處左右各約1 cm長的腸段，用生理鹽水沖洗干凈并及時置于4%中性甲醛溶液固定24 h，常規制備石蠟切片，高碘酸-西夫(PAS)染色。利用Leika 專用顯微鏡對上述空腸組織切片進行杯狀細胞計數，每個腸段取5根完整腸絨毛(400倍)，在腸絨毛上皮層，從腸絨毛的頂部依次向下計數100個柱狀細胞，同時計數其中的杯狀細胞數量，取平均值，并按處理求平均值。

1.4.6 空腸上皮內MC 數量 采用甲苯胺藍染色法觀察空腸上皮內MC數量，使用Leika專用顯微鏡計數，計數方法為將位于2個鄰近腸腺之間的腸絨毛劃為1個腸絨毛單位，計算10個完整腸絨毛單位固有層中的細胞數目，并求出每個絨毛單位的平均細胞數。

1.5 統計分析

采用SAS 9.2 Mixed程序進行數據統計分析，小腸黏膜組織形態和免疫細胞方差分析模型：

其中，Yijk為自變量ijk觀測值；μ為總平均效應；ρi為GSLPi水平的效應；αj為環磷酰胺j水平的效應；(ρα)k為GSLPi水平與環磷酰胺j水平組合條件下的交互作用的效應；eijk為ijk的隨機誤差分量。

采用SAS 9.2 PROC CCORR程序分析GSLP添加劑與小腸黏膜組織形態和免疫細胞的相關性。不同處理間的顯著性檢驗利用Turkey-Kramer程序進行多重比較，以P<0.01 為差異極顯著，P<0.05 為差異顯著；以P<0.10 為相關性顯著。

2 結 果

2.1 小腸黏膜組織發育

與對照組相比，GSLP顯著提高了空腸絨毛寬度和絨毛表面積(P<0.01)，0.2和1.6 g·kg-1GSLP顯著提高回腸絨毛寬度(P<0.05)；但是0.8 g·kg-1GSLP顯著降低雛雞空腸絨毛高度和隱窩深度(P<0.05)，并且0.2、0.8和1.6 g·kg-1GSLP極顯著降低回腸絨毛高度(P<0.01)，0.8和1.6 g·kg-1GSLP極顯著降低回腸隱窩深度(P<0.01)。

不同添加劑量GSLP對小腸絨毛發育表現出了不同的作用效果，0.8 g·kg-1處理組空腸絨毛高度顯著低于0.4 g·kg-1處理組(P<0.05)，0.2 g·kg-1處理組回腸隱窩深度極顯著高于1.6 g·kg-1處理組(P<0.01)，0.4 g·kg-1處理組極顯著高于0.8 和1.6 g·kg-1處理組(P<0.01)，0.4 g·kg-1處理組回腸黏膜厚度顯著高于1.6 g·kg-1處理組(P<0.05)。

免疫抑制處理組空腸絨腺比顯著高于正常飼喂組(P<0.05)，而回腸絨毛高度和隱窩深度則極顯著低于正常飼喂組(P<0.01)。小腸絨毛完整性各處理間未觀察到顯著差異?？漳c絨毛高度(P<0.05)和黏膜厚度(P<0.01)以及回腸絨毛高度(P<0.05)中觀察到GSLP 添加水平與雛雞免疫狀態之間存在交互作用(表2，圖1～2)。

2.2 小腸黏膜免疫細胞

0.4、0.8和1.6 g·kg-1GSLP 處理組空腸CD3+陽性細胞面積以及1.6 g·kg-1GSLP處理組MC數量顯著高于對照組(P<0.05)(表3)?？漳ciIEL 數量(R2=0.905 8)、CD3+陽性細胞面積(R2=0.983 4)和MC數量(R2=0.984 5)以及回腸iIEL 數量(R2=0.887 6)隨GSLP 添加水平增加均呈現出二次曲線變化趨勢(表3，圖3～7)。

A～E.正常飼喂組，GSLP添加量依次為0、0.2、0.4、0.8、1.6 g·kg-1；F～J.免疫抑制組，GSLP 添加量依次為0、0.2、0.4、0.8、1.6 g·kg-1，下圖同A-E.Normal feeding treatment，additive levels of GSLP，in sequence，are 0，0.2，0.4，0.8，1.6 g·kg-1；F-J.Immuno depression treatment，additive levels of GSLP，in sequence，are 0，0.2，0.4，0.8，1.6 g·kg-1.The same as bellow圖1 GSLP 對42 日齡雛雞空腸絨毛形態的影響(HE 染色)Fig.1 Effect of GSLP on jejunum morphology of 42 days chicken (HE staining)

正常飼喂和免疫抑制處理組之間免疫細胞數量差異并不顯著，并且各項指標中未發現GSLP 添加水平與雛雞免疫狀態之間的交互作用。

2.3 相關性分析

空腸絨毛寬度(P<0.01)、黏膜厚度(P<0.05)、絨腺比(P<0.10)、絨毛表面積(P<0.01)和回腸絨毛寬度(P<0.05)，空腸iIEL(P<0.05)、CD3+陽性細胞面積(P<0.01)、杯狀細胞(P<0.01)和MC 數量(P<0.01)與GSLP 呈正相關關系；空腸隱窩深度(P<0.10)、回腸絨毛高度(P<0.05)和隱窩深度(P<0.01)與GSLP 呈負相關關系(表4)。

表4 GSLP 與雛雞小腸黏膜組織發育和免疫細胞的相關性分析

Table 4 Correlation analysis between GSLP with small intestinal mucous development and immune cells of chicken

項目Item人參莖葉多糖GSLPP值 Pvalue空腸Jejunum絨毛高度/μmVillusheight0.01000.9256絨毛寬度/μmVilluswidth0.4058<0.0001隱窩深度/μmRecessdepth-0.18890.0746黏膜厚度/μmMucousthickness0.22570.0325絨腺比Villustoglandratio0.20010.0587絨毛表面積/μm2Villussurfacearea0.37980.0002回腸Ileum絨毛高度/μmVillusheight-0.23260.0274絨毛寬度/μmVilluswidth0.24350.0208隱窩深度/μmRecessdepth-0.37450.0003黏膜厚度/μmMucousthickness0.00980.9267絨腺比Villustoglandratio0.14090.1852絨毛表面積/μm2Villussurfacearea0.02840.7902空腸Jejunum淋巴細胞/(個·100細胞-1)Lymphocyte(Number/100cells)0.19800.0152CD3+陽性細胞面積/μm2AreaofCD3+positivecells0.31040.0001杯狀細胞/(個·100細胞-1)Gobletcell(Number/100cells)0.22930.0048肥大細胞/個Mastcell(Number)0.29030.0003回腸Ileum淋巴細胞/(個·100細胞-1)Lymphocyte(Number/100cells)0.09900.2280

圖2 GSLP 對42 日齡雛雞回腸絨毛形態的影響(HE 染色)Fig.2 Effect of GSLP on ileum morphology of 42 days chicken (HE staining)

圖3 GSLP 對42 日齡雛雞空腸上皮淋巴細胞的影響(HE 染色，400×)Fig.3 Effect of GSLP on jejunum epithelium lymphocyte of 42 days chicken (HE staining，400×)

圖4 GSLP 對42 日齡雛雞空腸CD3+ 陽性細胞面積的影響(IHC，200×)Fig.4 Effect of GSLP on jejunum CD3+ positive cell area of 42 days chicken (IHC，200×)

圖5 GSLP 對42 日齡雛雞空腸上皮杯狀細胞的影響(PAS 染色，400×)Fig.5 Effect of GSLP on jejunum epithelium goblet cell of 42 days chicken (PAS staining，400×)

圖6 GSLP 對42 日齡雛雞空腸上皮肥大細胞的影響(甲苯胺藍染色，400×)Fig.6 Effect of GSLP on jejunum epithelium mast cell of 42 days chicken (Toluidine blue staining，400×)

圖7 GSLP 對42 日齡雛雞回腸上皮淋巴細胞的影響(HE 染色，400×)Fig.7 Effect of GSLP on ileum epithelium lymphocyte of 42 days chicken (HE staining，400×)

3 討 論

3.1 小腸黏膜組織發育

小腸黏膜組織形態和結構的完整性是保證飼養養分消化吸收和腸道黏膜免疫功能正常的基礎[9]。小腸絨毛表面積增加會提高飼料養分的吸收率，而絨腺比則反映了小腸的機能狀況，比值增加代表吸收機能的改善[10-11]。隱窩深度減小表明腸黏膜上皮細胞成熟率增加，其分泌功能相應增強[12]。本試驗中，GSLP通過增加空腸絨毛寬度和絨毛表面積，具有提高空腸吸收飼料養分的能力；并且低添加量(0.2 g·kg-1)和高添加量(1.6 g·kg-1)GSLP對回腸絨毛寬度的發育也表現出了積極的促進作用。另外，不同GSLP 添加量對小腸絨毛高度和隱窩深度的作用效果并不一致?？傮w而言，高添加量(≥0.8 g·kg-1)GSLP在降低空腸和回腸隱窩深度，提高小腸黏膜腺體分泌機能的同時，對絨毛高度和黏膜厚度的發育具有負面作用。

空腸是飼料養分吸收的主要場所，隨著腸段的后移，腸絨毛逐漸變小，吸收和分泌功能逐漸減弱。GSLP中大部分多糖在空腸被吸收，其對腸道發育的有益作用表現為增加了空腸絨毛的寬度和表面積，這一結果與黃芪多糖對肉仔雞空腸絨毛發育的作用效果一致[3]。飼料黏度過高引起腸道滲透壓升高，導致絨毛分泌細胞增加，吸收細胞減少[13]。GSLP對回腸絨毛的發育存在劑量效應，可能與GSLP促絨毛發育作用和GSLP 中可溶性非淀粉多糖黏性負面作用的動態平衡有關。0.2 g·kg-1GSLP處理組黏性相對較低，空腸未消化多糖對絨毛發育表現出良好的促進作用；而1.6 g·kg-1GSLP黏性相對較高，導致空腸未消化多糖的比例增加，從而彌補了多糖黏性對回腸絨毛發育的不利影響。

高添加量GSLP 對隱窩深度、絨毛高度和黏膜厚度的影響同樣與其中可溶性非淀粉多糖(如半乳聚糖和甘露聚糖等)的黏性有關。GSLP 導致的黏性增加引起小腸滲透壓升高，相應增加的分泌細胞和減少的吸收細胞則意味著隱窩深度減小，分泌機能增強以及絨毛高度和絨毛厚度的降低[10,12]。雖然不同添加量GSLP 對小腸絨毛各項發育指標具有不同的作用效果，但是各處理間絨腺比差異并不顯著，表明GSLP 對雛雞小腸整體養分吸收機能并無明顯的影響。

試驗前期灌服環磷酰胺對雛雞小腸組織的發育產生了后續的影響，抑制了試驗后期小腸絨毛的生長發育，但是卻促進了小腸黏膜上皮細胞的成熟，提高了腺體的分泌能力和消化機能。環磷酰胺誘發的免疫抑制可以提高胰島素水平，增加機體的合成代謝[14]。但是環磷酰胺的半衰期很短，通常為4～6 h，7 日齡連續灌服1周環磷酰胺對42日齡雛雞小腸分泌機能的影響是否和環磷酰胺提高機體合成代謝的作用有關，目前尚缺乏直接證據。

人參多糖可以對抗環磷酰胺所致的免疫抑制，促進機體免疫功能的恢復[15]。本研究中觀察到的交互作用表明GSLP對環磷酰胺所抑制的空腸絨毛高度和黏膜厚度的發育同樣具有改善作用。但是對于回腸絨毛高度，只有當GSLP的添加劑量較高(1.6 g·kg-1)時才產生作用效果，這可能與不同腸段的消化吸收機能有關，空腸是養分的主要吸收場所，GSLP 中多糖大部分在空腸中被吸收，而回腸只是吸收機能的儲備。

3.2 小腸黏膜免疫細胞

人參多糖可以促進淋巴細胞的增殖轉化，提高 T、B淋巴細胞的免疫活性，增強非特異性免疫系統功能[16-17]。GSLP多糖組成與人參根須基本相同，但是其對小腸黏膜免疫細胞的影響目前并未見相關報道。iIEL具有抑制黏膜超敏反應、中和外源細胞毒作用及分泌淋巴因子等多種功能，并且可以產生溶細胞活性，殺死或清除感染或損傷的上皮細胞，對細菌和病毒感染具有免疫監視的作用[18-19]。CD3分子作為活化T 淋巴細胞的起始信號，在T淋巴細胞被抗原激活的早期過程起重要作用，是成熟T 淋巴細胞的特征性標志，在一定程度上代表了T 淋巴細胞總數[20-21]。因此，小腸iIEL和CD3+T淋巴細胞反映了小腸的免疫狀態。本項研究中，GSLP 雖然對空腸和回腸iIEL 數量無明顯影響，但是當GSLP添加量大于0.4 g·kg-1時，顯著增加了CD3+陽性細胞的面積，表明GSLP具有促進空腸黏膜中T淋巴細胞活化和增殖，提高細胞免疫反應的作用效果。另外，GSLP對空腸iIEL數量、CD3+陽性細胞面積和回腸iIEL數量的作用存在著劑量效應，當添加劑量大于0.8 g·kg-1時，上述免疫細胞數量開始呈現下降趨勢。

腸道黏膜上皮內杯狀細胞可以分泌黏蛋白，黏蛋白連續分布于腸道黏膜表面，形成疏水的黏液層，既可以保護腸道上皮細胞免受機械損傷，又可以包載抗原物質從而利于胰腺分泌的酶進行降解[22]。黏蛋白可以協同分泌型免疫球蛋白 A(SIgA)在腸黏膜表面形成抗感染的抗體黏膜屏障，利用腸蠕動將捕獲的病原微生物和毒素清除體外[23]。GSLP雖然有增加空腸杯狀細胞數量的趨勢，但是試驗組與對照組相比，差異并不顯著。

MC是天然免疫的效應細胞之一，其前體細胞位于腸黏膜固有層中，受到抗原刺激迅速分化成為成熟的MC，通過釋放免疫介質使炎性細胞進入黏膜參與獲得性免疫，在宿主對病原微生物的防御反應中發揮重要作用[24-25]。高添加量(1.6 g·kg-1)GSLP顯著增加了空腸MC的數量，而且添加量與MC數量呈二次曲線相關關系。上述結果表明GSLP可以增強小腸黏膜免疫調節機能，提高免疫力，而且同樣存在劑量效應。GSLP 的劑量效應可能與小腸T淋巴細胞有關，MC在增殖過程中普遍依賴于T淋巴細胞[26]，而本研究中CD3+陽性細胞面積的變化在一定程度上反映了T淋巴細胞的變化趨勢。

3.3 相關性分析

雖然本項研究中各處理之間絨腺比的差異并不顯著，但是相關性分析結果表明GSLP 對小腸黏膜的發育仍然具有一定的促進作用，并且對空腸黏膜發育的作用效果優于回腸。另外，GSLP通過增加空腸iIEL數量和CD3+陽性細胞面積，提高空腸的黏膜免疫水平。

4 結 論

多糖含量為24.4%的GSLP對蛋雛雞空腸和回腸黏膜組織的發育具有一定程度的促進作用，但是對小腸養分吸收機能并無顯著的作用效果。不同添加量GSLP對免疫細胞作用存在劑量效應，綜合GSLP對小腸黏膜免疫細胞的影響，0.4 ～1.6 g·kg-1GSLP可以提高空腸的黏膜免疫水平。環磷酰胺誘導的雛雞前期免疫抑制可以促進小腸黏膜上皮細胞的成熟，提高腺體的分泌機能。GSLP 對環磷酰胺前期抑制的空腸絨毛高度和黏膜厚度的發育具有改善作用。

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(編輯 白永平)

Effects of Ginseng Stem and Leaf Polysaccharide on Small Intestinal Mucous Tissue Development and Immune Cells of Chicken

YAN Xiao-gang，ZHANG Fang-yu，LANG Hong-yan，JIN Xiang-shu，ZHAO Zhong-li，LIU Chen*

(TheBranchAcademyofAnimalScience，JilinAcademyofAgriculturalScience，Gongzhuling136100，China)

To study the effects of ginseng stem and leaf polysaccharide (GSLP) on small intestinal mucous tissue development and immune cells of chicken，600 of 7 days healthy Hy-line Variety Brown chicken (52.79±4.58 g) were freely divided into 10 treatments，60 chicken per treatment (3 replications，20 chicken per replication)，5 treatments were included in normal fed group and others were in immune depressed group.The additive levels of GSLP were 0，0.2，0.4，0.8 and 1.6 g·kg-1in each group based on basal diet.After feeding stage，9 chicken of each treatment (3 per replication) were randomly selected for samples collection of jejunum and ileum.The results showed that：(1) GSLP improved villus width and surface area of jejunum (P<0.01)，0.8 and 1.6 g·kg-1GSLP decreased villus height and recess depth of ileum (P<0.01)，but GSLP had no significant effects on villus to gland ratio；(2) The interactions of GSLP with immune state were observed in jejunum villus height (P<0.05) and mucous thickness (P<0.01)，and ileum villus height (P<0.05)；(3) 0.4，0.8 and 1.6 g·kg-1GSLP increased the amounts of CD3+T lymphocyte(P<0.05)，and 1.6 g·kg-1GSLP increased the amounts of mast cell (P<0.05) in jejunum，and dosage effects were existed in the influence of GSLP on immune cells.In conclusion，GSLP had somewhat improvement on small intestinal mucous tissue development，but had no significant influence on nutrients absorptive function；0.4 to 1.6 g·kg-1GSLP increased the level of jejunum mucous immunization；and GSLP could improve the development of jejunum villus height and mucous thickness depressed by cyclophosphamide in early trial stage.

ginseng stem and leaf polysaccharide；egg laying chicken；small intestinal mucous development；immune cells

10.11843/j.issn.0366-6964.2015.01.019

2014-05-01

吉林省博士后科研啟動基金項目；吉林省現代家禽產業技術體系

閆曉剛(1977-)，男，吉林臨江人，副研究員，主要從事動物營養代謝調控研究，E-mail：yanxiaogang1977@163.com，Tel:0434-6282058

*通信作者：劉 臣，研究員，E-mail:liuchen3199@163.com

S831.5

A

0366-6964(2015)01-0144-12