離心處理—氣相色譜法測定黃瓜中多種有機氯農藥殘留

羅俊霞　申戰賓　樊彥超等

摘要： 建立了離心處理-固相萃取-氣相色譜法-電子捕獲檢測器同時測定黃瓜中的六氯苯等9種農藥殘留的方法。該方法是將樣品用乙腈提取，經SPE小柱（弗羅里硅土）凈化，采用電子捕獲檢測器測定，外標法定量，分別對黃瓜進行3個水平（其中7種為0 02、0 04、0 08 mg/kg，敵稗和丁草胺為0 04、0 08、0 16 mg/kg ）的添加回收試驗，平均添加回收率為57 1%～134 8 %，RSD為2 4%～13 0%，方法的最低檢測限為0 000 9～0 027 4 mg/kg，在103的范圍內線性較好，相關系數r≥0 998 7。試驗結果表明，本方法靈敏度高、重復性好，可以作為蔬菜中這幾種農殘的測定方法。9種農藥在黃瓜基質中存在不同程度的基質效應，其中敵稗和丁草胺存在較強的基質抑制效應，其他幾種存在較弱的基質增強效應。

關鍵詞： 黃瓜；農藥；除草劑；電子捕獲檢測器；外標法；基質效應

中圖分類號： TQ450 2+63 文獻標志碼： A

文章編號：1002-1302（2015）08-0299-03

近年來為了節省勞力，有機氯類除草劑在生產中被越來越多的使用，有機氯農藥是一類曾被世界各國廣泛使用的高效、廣譜殺蟲劑，雖然禁用多年，但由于其半衰期長、不易降解，所以長期積存于植物和土壤中，至今仍有檢出 [1-2]。七氯、艾氏劑、狄氏劑、異狄氏劑是氯化環戊二烯殺蟲劑，六氯苯和氯硝胺是殺菌劑，敵稗和丁草胺是除草劑，胺菊酯是擬除蟲菊酯，這些農藥對動物具有致畸、致癌和致突變等毒性 [3]。目前檢測這類農藥較普遍使用氣相色譜法 [4-6]、氣相色譜串聯質譜法 [7-8]；劉長武等在標準NY/T 761—2008《蔬菜和水果中有機磷、有機氯、擬除蟲菊酯和氨基甲酸酯類農藥多殘留的測定》 [9]中列舉了用GC-ECD檢測的農藥種類，但沒有具體的測定數據。為了快速對這幾種農藥進行測定，筆者進行了固相萃取-氣相色譜法-電子捕獲檢測器同時測定黃瓜中的六氯苯等多種農藥殘留的試驗，經過在0 02、0 04、0 08 mg/kg（敵稗和丁草胺為0 04、0 08、0 16 mg/kg）3個水平下的添加回收試驗，結果表明該方法能滿足日常檢測的需要。

1 試驗部分

1 1 試驗儀器與試劑

瓦里安CP3800，配8400自動進樣器和ECD檢測器，其色譜柱為VF-5，30 m×0 32 mm，液膜厚0 25 μm；WH-861型渦旋混合器；天孚牌電子計數天平（DT 500A）；德國Heidolph SilentCrusher M型均質機；美國N-EVAPTM-112型氮吹儀；德國Hettich Universal 302R離心機。

乙腈、正己烷、丙酮為CNW品牌試劑（HPLC級）；NaCl為天津市科密歐化學試劑開發中心生產的綠環牌試劑（分析純級）；農藥標準品七氯（heptachlor）、艾氏劑（aldrin）、狄氏劑（dieldrin）、異狄氏劑（endrin）、六氯苯（hexachlorobenzene）、氯硝胺（dichloran）、敵稗（propanil）、丁草胺（butachlor）和胺菊酯（tetramethrin），濃度均為100 mg/kg，由農業環境保護科研檢測所生產。

1 2 GC條件

進樣口溫度：220 ℃；檢測器溫度：300 ℃；柱溫箱：程序升溫，起始溫度150 ℃，保持0 5 min，以20 ℃/min升至200 ℃，保持2 min，以 0 8 ℃/min升至210 ℃，保持2 min，以 50 ℃/min 升至260 ℃，保持10 min ；柱流量：2 mL/min；分流比：1 ∶ 10；進樣量：1 μL。

1 3 樣品前處理

稱取25 g樣品于250 mL廣口瓶中，在廣口瓶中加入5～7 g NaCl，再加入50 mL乙腈，依照NY/T 761—2008《蔬菜和水果中有機磷、有機氯、擬除蟲菊酯和氨基甲酸酯類農藥多殘留的測定》 [9]的方法，用均質機在8 000～12 000 r/min下均質提取2 min，之后一并倒入2支50 mL的離心管中，放入離心機中在5 000 r/min下離心5 min，移取上層乙腈相10 mL濃縮至近干，用2 mL正己烷定容，之后用弗羅里硅土SPE小柱凈化，再次濃縮至近干，用正己烷定容至5 mL 。根據保留時間定性，用基質匹配標準溶液校正，外標法定量，單點校正。

1 4 標準溶液的配制

分別準確吸取“1 1”節中標準溶液各1 mL，置10 mL容量瓶中，用正己烷定容至10 mL，成為10 mg/kg 的混合標準溶液，備用。用黃瓜樣品基質稀釋成低濃度標準溶液上機測定。

2 結果與分析

2 1 基質效應

9種化合物的色譜圖、用樣品空白基質配制的標準品的色譜圖和黃瓜空白基質的色譜圖分別見圖1、圖2、圖3，由圖1、圖2、圖3可以看出，黃瓜樣品基質中存在一些干擾物，在VF-5的柱子上和六氯苯、敵稗和丁草胺分不開，從而對這3種物質的測定存在較大的影響。其中在敵稗和丁草胺的保留時間附近均有1個較大的倒峰，對二者存在嚴重的基質抑制效應，基質抑制程度隨著標準品濃度的增大而減??；在六氯苯的保留時間附近有1個較小的正峰，使六氯苯有較弱的基質增強效應。其他幾種農藥也存在不同程度的基質增強效應，有待于進一步研究。

2 2 回收率和精密度試驗

分別稱取25 g黃瓜空白樣品，添加9種農藥的混合標準溶液和單標，使添加后六氯苯、氯硝胺、七氯、艾氏劑、狄氏劑、異狄氏劑、胺菊酯的濃度分別為0 02、0 04、0 08 mg/kg，使敵稗和丁草胺的濃度分別為0 04、0 08、0 16 mg/kg，按照“13”節中的步驟進行樣品前處理，每個水平的試樣重復測定12次，根據測定結果計算添加回收率，在12個添加回收中棄去2個離群值，結果見表1。試驗結果（表1）表明，本方法的回收率范圍為57 1%～134 8%，精密度為2 4%～130%。六氯苯、氯硝胺、七氯、艾氏劑、狄氏劑、異狄氏劑、胺菊酯的檢出限在0 08 mg/kg的水平下，敵稗和丁草胺在 0 16 mg/kg 的水平下來計算，計算公式為：

DL=[SX（]3NC[]h[SX）] [10]。

式中：DL代表方法的檢測限（方法可檢測到的最小樣品量）；N代表基線噪聲；C代表樣品濃度；h代表相應的農藥的峰高。

計算結果表明，9種化合物的檢測限為0 000 9～0 027 4 mg/kg， 本方法的回收率、精密度和檢測限均滿足多種農藥殘留檢測分析的要求。

2 3 檢測限和線性范圍

筆者在試驗中分別用正己烷配制了0 001、0 01、0 1、1、10 mg/kg 5個濃度水平的混合標準溶液，9種農藥的線性回歸方程、線性范圍和相關系數見表2 。 因為敵稗和丁草胺的響應較低，在0 001 mg/kg濃度水平下幾乎可以視為沒有響應，它們在0 01～10 mg/kg的范圍內相關系數分別是0 998 8 和0 999 3，其他7種農藥在0 001～10 mg/L范圍內相關系數均小于0 01～10 mg/L的相關系數，線性均不如在0 01～10 mg/L的范圍內的線性好，在0 001～1 mg/kg的范圍內相關系數均大于0998 5；另外用黃瓜空白基質配制了0 01、002、0 04、008、0 16 mg/kg 5個濃度水平的標準品，同樣，敵稗在001、0 02 mg/kg 的濃度水平下，因為基質效應，可以視為沒有響應，在0 04～0 16 mg/kg的范圍內相關系數是0991 2，其他8種農藥在0 01～0 16 mg/kg的范圍內相關系數均大于0993 5?？梢?，用黃瓜空白基質作為介質配制的標準溶液的線性范圍不如用正己烷試劑作為介質配制的標準溶液，但在一定的范圍內其線性可以滿足多種農藥殘留分析的要求；同時，在日常檢測工作中為了避免基質效應帶來的影響，可以用相近濃度的基質匹配標準溶液來進行校正。

3 結論

本方法采用固相萃取的前處理技術，建立了氣相色譜-電子捕獲檢測器測定黃瓜中多種有機氯農藥殘留量的方法，獲得了滿意的分離效果和檢測靈敏度，方法的準確度、精密度、線性范圍、相關系數、檢出限等均能滿足多種農藥殘留分析的要求。但是黃瓜基質在VF-5的柱子上對敵稗和丁草胺的影響較大，建議在檢測工作中用相近濃度的基質匹配標準溶液來進行校正。

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