彝藥滿山香的資源調查和鑒別研究△

郝慶秀，劉超，金艷，張燕，李曉明，康利平，郭蘭萍

(道地藥材國家重點實驗室培育基地，中國中醫科學院 中藥資源中心，北京 100700)

·中藥農業·

彝藥滿山香的資源調查和鑒別研究△

郝慶秀，劉超，金艷，張燕，李曉明，康利平，郭蘭萍*

(道地藥材國家重點實驗室培育基地，中國中醫科學院 中藥資源中心，北京 100700)

目的：對彝藥滿山香藥材的來源、野生植物資源實地調查和樣品采集，性狀和薄層鑒別進行研究，以期為滿山香野生藥材資源的合理利用和保護提供參考。方法：本草考證、實地采樣調查、性狀鑒別和薄層鑒別。結果：滿山香藥材的來源為木蘭科五味子屬植物合蕊五味子的根和藤莖。滿山香植物生長在河谷、山坡常綠闊葉林中或陽光充足的山坡石縫中，成簇生長，種群稀少，蘊藏量??；滿山香植物嫩枝葉呈暗紅色，根莖剝去皮部后顯出鮮艷的粉紅色；藥材粉末呈棕黃色或棕綠色。薄層色譜在365 nm波長下有特征的熒光斑點，在與β-谷甾醇和胡蘿卜苷對照品色譜相應的位置上，顯現相同顏色的斑點，用薄層色譜方法可以方便地鑒別滿山香藥材。

滿山香；資源調查；性狀特征；薄層鑒別；β-谷甾醇；胡蘿卜苷

民族藥作為我國傳統醫藥的一部分，有確切而獨特療效，尤其是對一些頑癥、重癥、危癥有獨特的效果?！皾M山香”為彝族常用藥材，具有舒筋活血、消腫止痛的功能，用于治療骨折、慢性胃腸炎、風濕性關節炎、痛經、外傷出血等癥，彝族醫生常鮮用。目前，云南某制藥廠用滿山香藥材作為原料藥生產的膠囊，用于中風中經絡，瘀血阻絡證的治療[1]。文獻報道滿山香的果實、根莖、葉都有藥效作用[2]，從其藤莖中分離得到的木脂素類化合物具有廣泛的生物學活性，在體外對腫瘤細胞增殖有明顯的抑制作用，對肺癌、鼻咽癌、胃癌、子宮癌等癌癥有療效[3]，其藤莖的總提取物能抑制體外血清誘導的平滑肌細胞增殖，有防治高血壓、動脈粥樣硬化作用[4-5]。目前滿山香同名異物或異名同物的情況比較普遍，全國各地有多種植物作為滿山香藥材的來源使用，不同專著中記載的滿山香藥材基原不同，例如有木蘭科植物合蕊五味子Schisandra.propinqua(Wall.) Baill.var.intermediaA.C.Smith及鐵箍散S.propinqua(Wall.) Baill.var.sinensisOliv.的干燥根和莖[3][6-9]、杜鵑花科白珠樹屬植物滇白珠Gaultheriayunnanensis(Franch.) Rehd根和莖[10-12]、蕓香科九里香屬滿山香MurrayapaniculapaL.Jack根[13]、報春花科植物細梗香草LysimachiacapillipiesHemsl的根莖[14]，這些植物藥材有相似的功效，性狀特征不易鑒別。目前，對滿山香藥材的基礎研究比較薄弱，制藥廠藥材主要來源于野生采集的滿山香植物的根和藤莖，而根莖的長期采伐會對滿山香植物自然資源造成不可逆的破壞。本文開展了滿山香藥材的品種考證、資源調查、鑒別等研究，為滿山香野生資源的保護和利用、保證臨床準確用藥提供參考。

1 來源考證

滿山香(彝族語，軟藤)作為彝藥收載于《云南省藥品標準》[7][15]，來源為木蘭科植物合蕊五味子S.propinqua(Wall.) Baill.var.intermediaA.C.Smith及鐵箍散S.propinqua(Wall.) Baill.var.sinensisOliv.的干燥根和莖?！吨参锩麑崍D考》[16]卷九山草類記載：“滿山香，生南安。黑莖屈盤，葉如椿葉有赭紋，根亦糾曲。俚醫以治跌打損傷、風氣，煎水洗之?！辈⒏綀D(見圖1)，經考證，此種指的是杜鵑花科植物滇白珠Gaultheriayunnanensis(Franch.) Rehd，又名透骨香、搜山虎?！吨参锩麑崍D考》中記載“黃龍藤，生云南山中，藤巨如臂，紋裂成鱗；細蔓紫色，長葉綠潤；開五瓣團花，中含圓珠，殷紅一色，株老則青?！备鶕摃忻枋龊屠L圖(見圖1)，考證其原植物與滿山香S.propinqua(Wall.) Baill.相近或一致。歷版的《中華人民共和國藥典》均未收載滿山香?！吨腥A本草》[17]和《中藥大辭典》[18]分別記載有“黃龍藤”和“小血藤”，其中“黃龍藤”別名滿山香，來源為五味子科植物合蕊五味子(KadsurapropinquaWall；SchisalidrapropinquaWall.var.intermediaA.C.Smith)，“小血藤”來源為五味子科五味子屬植物鐵箍散S.propinqua(Wall.) Baill.var.sinensisOliv.(見圖2)?！恫菽颈惴健穂19]中亦記載有小血藤，來源為木蘭科五味子屬植物鐵箍散S.propinqua(Wall.)Baill.var.sinensisOliv.；《中國植物志》[6](經濟植物手冊)記載滿山香，來源為木蘭科五味子屬植物合蕊五味子S.propinqua(Wall.)Baill.var.intermediaA.C.Smith及其變種鐵箍散S.propinqua(Wall.)Baill.var.sinensisOliv.五味子屬植物的分類學訂正研究的報道[20]，從分布區、葉片形態、葉緣情況、花被片數目和雄蕊數目、花梗長短等方面綜合考察后，把S.propinqua(Wall.) Baill.var.intermediaA.C.Smith、S.propinqua(Wall.)Baill.var.sinensisOliv.等名稱作歸并處理，并定名為S.propinqua。本研究通過查閱本草文獻及相關的植物學著作、以及查閱中國科學院昆明植物研究所標本館有關S.propinqua(Wall.)Baill.標本，認為彝藥滿山香的基源植物應是木蘭科五味子屬植物合蕊五味子S.propinqua，異名有黃龍藤、小血藤、鐵箍散等。整理有關滿山香藥材的傳統藥物學信息見表1。

圖1 《植物名實圖考》中繪滿山香(A)、黃龍藤(B)

圖2 《中華本草》中繪黃龍藤(合蕊五味子)(A)、小血藤(鐵箍散)(B)

表1 滿山香藥材的傳統藥物學信息

2 實地調查和樣品采集

2.1 滿山香的資源與生境特征

滿山香主要分布在云南中部至南部，生于海拔2000～2200 m的河谷、山坡常綠闊葉林中。其變種鐵箍散在陜西、甘肅南部、江西、河南、湖北、湖南、四川、貴州有分布，生于溝谷、巖石山坡林中，海拔500～2000 m[6]。在全國中藥資源普查隊的幫助下，在云南等地進行滿山香野生植物資源調查及樣品采集，發現滿山香野生植物成簇生長，種群稀少，居群內個體數量少，資源蘊藏量較小。滿山香生長環境主要分兩種類型，一是生長在河谷、山坡常綠闊葉林下，在有機質含量較高的腐殖土、濕潤肥沃的生境，植物藤莖發達，無主根，以須根為主；二是生長在山坡石縫中陽光充足的地方，植物枝葉茂盛，主根發達。

2.2 滿山香植物形態特征

A嫩枝，B剝去樹皮藤莖，C花蕾，D花，E聚合果，F制作的標本圖3 植物滿山香的形態特征

實地調查滿山香植物的形態特征(見圖3)，落葉木質藤本，全株無毛，新生枝褐色或暗紅色，有銀白色角質層。葉堅紙質，卵形、長圓狀卵形或狹長圓狀卵形，先端漸尖，基部鈍或漸尖，具疏離的胼胝質齒，近全緣?；ǔ赛S色，單生或2～3朵聚生于葉腋；肉質花托近球形，聚合果，種子近球形或橢圓體形，種皮淺灰褐色，光滑，種臍狹長，長約為寬的1/3，稍凹入?；ㄆ?～7月。與《中國植物志》[6]記載的木蘭科五味子屬植物合蕊五味子滿山香的描述一致。

另據實地調查中發現，當地藥農根據植物的嫩枝葉呈現的暗紅色(當地藥農叫“紅尖尖”)特點在山上尋找滿山香，并根據根和藤莖剝去皮部后呈現出鮮艷的粉紅色的特點確定滿山香。另外，滿山香新鮮莖葉嚼后粘液狀。通過收集了該植物的形態特點、俗稱、藥用部位、療效等信息與表1中文獻描述一致。經實地調查、咨詢當地藥農、藥商和鄉村醫生，以及通過鑒別收集的藥材性狀，表明生產中使用的滿山香是木蘭科五味子屬植物合蕊五味子的根和藤莖。

2.3 樣品采集

本次實地調查共采集10個樣地的滿山香樣品，并制作植物標本11份，標本現保存于中國中醫科學院中藥資源中心，經郭蘭萍研究員考證均為木蘭科五味子屬植物合蕊五味子S.propinqua。同時，走訪調查了國內幾大藥材市場，如云南昆明菊花藥材市場、安徽亳州藥材市場、河北安國藥材市場、廣州清平藥材市場以及江西樟樹藥材市場，均未見有滿山香藥材出售。采集滿山香樣品的信息見表2。

表2 滿山香樣品信息

3 藥材滿山香的性狀特征

滿山香植物的根及藤莖較難折斷，折斷面呈刺片狀，鮮藥材的藤莖和葉片嚼之粘液質較多；根及莖較粗者切斜片，較細者直接切斷，置陰涼通風處晾干。藥材呈長圓柱形、或橢圓形，直徑0.1～3.7 cm不等，表面棕褐色或棕黑色，有縱皺紋及棕黃色皮孔。質地硬脆，略輕，皮部與木部易分離，皮部棕褐色，木部黃白色或棕黃色；髓部紅棕色或呈空洞。藥材氣香，味辛涼、澀。粉末呈棕黃色或棕綠色，嚼之發粘。

4 薄層鑒別

文獻報道[25-27]從滿山香藥材中分離到了五味子丙素、β-谷甾醇、胡蘿卜苷、香草酸、原兒茶酸和紅景天苷等成分，參考研究報道，購買對照品五味子丙素(批號20130510，純度≥98.0% HPLC)、β-谷甾醇(批號20130506，純度≥98.0% HPLC)、胡蘿卜苷(批號20130409，純度≥98.0% HPLC)、香草酸(批號20130506，純度≥98.0% HPLC)、紅景天苷批號20130412，純度≥98.0% HPLC)、原兒茶酸(批號20130511，純度≥98.0% HPLC)，均由北京北研馨綠生物技術有限公司提供。取各對照品適量，加甲醇制成每1 mL含0.1 mg的對照品溶液，取滿山香對照藥材粉末1 g，加氯仿30 mL，超聲提取30 min，濾過，濾液蒸干，殘渣加氯仿1 mL使溶解，作為供試品溶液，參照《中華人民共和國藥典》2010版一部附錄ⅪB薄層色譜法)，通過比較不同展開劑展開效果，最終選擇以環己烷-乙酸乙酯-甲酸(9∶3∶1)為展開劑，于同一硅膠GF254薄層板上點樣，展開，取出，晾干，置于紫外燈(365，254 nm)下檢視，結果見(圖4)。在365 nm波長下，只顯示滿山香對照藥材樣品的熒光斑點，而無對照品熒光斑點(圖4A)；在254 nm波長下，對照品五味子丙素、香草酸和原兒茶酸有斑點，而對照藥材樣品在相應位置似有微弱的斑點，不能肯定是否有此類成分，鑒別專屬性不強；β-谷甾醇，胡蘿卜苷，紅景天苷對照品無斑點(圖4B)。將薄層板噴10%硫酸乙醇液，在105 ℃加熱，致斑點顯現，則對照品β-谷甾醇和胡蘿卜苷可見清晰的斑點，滿山香對照藥材的氯仿提取物和甲醇提取物的色譜中，在β-谷甾醇和胡蘿卜苷相應的位置上顯示相同顏色的斑點(圖4C)。

按以上方法，取不同產地的滿山香藥材粉末1 g，制成供試品溶液。吸取供試品溶液和β-谷甾醇、胡蘿卜苷對照品溶液各10 μL，點于同一硅膠GF254薄層板上展開，在365 nm波長下所有供試品都有明顯的熒光斑點，此斑點為滿山香藥材的特征斑點(見圖5A)，在展開后的薄層板上噴以10%硫酸乙醇液，在105 ℃加熱，致斑點顯現，在日光下檢視，在與β-谷甾醇和胡蘿卜苷對照品色譜相應的位置上，不同產地滿山香藥材樣品的色譜圖上顯現相同顏色的斑點(見圖5B)；用滿山香對照藥材，可以方便地使用上述薄層方法予以鑒別。

5 討論

野生植物資源是中藥和民族藥制藥產業重要的材料來源。目前，滿山香藥材來源于野生植物資源，制藥廠以收購藥農采集的野生滿山香藥材為主，少數民族醫生則四季采集，自采自用。本次調查的滿山香野生植物成簇生長，一般在坡度70度以上的陡坡或陽光充沛的山坡石峰中，居群稀少，居群內個體數量也很少，野生滿山香植物蘊藏量較小，與文獻[6]報道的滿山香分布較廣但蘊藏量相對較小的描述一致。另外，野生滿山香的生長年限不易斷定。當地藥農只能根據其根莖的直徑大小，粗略地估計其生長年限大約在3、5年、或10年、20年不等?！对颇鲜∷幤窐藴省分袧M山香的藥用部位為根及莖，根莖的長期采挖可能導致其資源的破壞，甚至引起地區性滅絕。因此，建議開展滿山香野生植物的人工馴化，進行引種栽培，以保證滿山香藥材資源的持續利用。

本研究薄層鑒別圖譜中，可能含有文獻報道[7-9]的五味子丙素、香草酸和原兒茶酸成分，但是含量低，薄層鑒別不明顯；另外，在本研究條件下，圖譜中未發現紅景天苷對照品的蹤跡，滿山香藥材中是否含有紅景天苷成分，需要改變實驗手段，或利用其它研究途徑予以證實。雖然本研究通過優化提取條件和薄層分離條件，建立了滿山香藥材的薄層鑒別方法。但是，β-谷甾醇和胡蘿卜苷在植物中普遍存在，本文建立的鑒別方法難以反映藥材的質量。并且，不同產地來源的滿山香藥材，薄層色譜上的差異不明顯。對于不同產地來源的滿山香藥材的鑒別，需要通過改進檢測手段(如：遺傳特征鑒別、特征化學成分鑒別等方法)進一步研究。因此，建議開展滿山香藥材的質量標準研究，考察產地、生長年限、采樣季節等條件對藥材質量的影響，建立質量標準對藥材的質量進行控制。

致謝：感謝第四次全國中藥資源普查隊和昆明制藥集團股份有限公司在實地調查和樣品采集過程中提供的幫助，感謝昆明制藥集團股份有限公司提供滿山香對照藥材樣品。

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StudyonResourcesInvestigationandIdentificationofSchisandrapropinqua(Wall.)Baill.

HAOQingxiu，LIUChao，JINYan，ZhangYan，LIXiaoming，KANGLiping，GUOLanping*

(StateKeyLaboratoryBreedingBaseofDao-diHerbs，NationalResourceCenterforChineseMateriaMedica，ChinaAcademyofChineseMedicalSciences，Beijing100700，China)

Objective：To investigate the wild plant resources and establish identification methods for the herb Manshanxiang，an herb of Yi nationality.Methods：Herbal textual research，field investigation，sample collection and morphological characteristics identification，and TLC identification were applied to the study.Results：The source of herb Manshanxiang is the plant roots and cane ofSchisandrapropinqua(Wall.) Baill.(S.propinqua).The reserve of wild plantS.propinquawas low.S.propinquagenerally grows in clusters under the evergreen broad-leaved valley，or in sunny slopes，or in rock crevices.The shoots were in dark red and the rhizome showing bright pink after stripped epidermis.All samples extracts showed characteristics fluorescence spots at wavelength 365 nm，and showed the same color spot compared with the reference substance ofβ-sitosterol and daucosterol on the corresponding position by TLC.Conclusion：The reserve ofS.propinquawas low.The wild plant ofS.propinquahad its characteristic.Herbal medicine ofS.propinquacan be identified by TLC.

Schisandrapropinqua；resources investigation；characteristics；TLC；β-sitosterol；daucosterol

2015-01-05)

國家科技支撐計劃(2012BAI29B02)；國家自然科學基金重點項目(81130070)；國家中醫藥管理局行業科研專項(201107009，201207002)；北京中醫藥薪火傳承3+3工程項目；中國中醫科學院“名醫名家傳承”項目(CM20143001)

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郭蘭萍，研究員，研究方向：中藥資源生態研究；Tel：(010)64014411-2830，E-mail：glp01@126.com

10.13313/j.issn.1673-4890.2015.7.013