貓眼草揮發油成分的GC-MS分析

王　欣，蘇洪麗，李衛敏，李永衛，王嗣岑*

(1.西安市第一醫院藥劑科，西安　710002；2.西安交通大學醫學部藥學院，西安　710061；3.西安交通大學第一附屬醫院，西安　710061)

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貓眼草揮發油成分的GC-MS分析

王欣1，蘇洪麗2，李衛敏3，李永衛1，王嗣岑2*

(1.西安市第一醫院藥劑科，西安710002；2.西安交通大學醫學部藥學院，西安710061；3.西安交通大學第一附屬醫院，西安710061)

摘要：目的研究貓眼草全草的揮發油成分。方法采用水蒸氣蒸餾法提取貓眼草的揮發油，利用氣相色譜/質譜聯用技術(GC-MS)對揮發油中的化學成分進行分離分析，并采用峰面積歸一化法計算各成分相對百分含量。結果對其中的43種化學成分進行了鑒定，所鑒定的成分占總流出峰面積的75.86%。其中醛類化合物14種，占30.77%；酮類8種，占19.02%；醇類14種，占17.08%。結論本文首次分析了貓眼草全草揮發油成分，為了解貓眼草的化學物質基礎和進一步開發研究提供了依據。

關鍵詞：貓眼草；水蒸汽蒸餾法；氣相色譜/質譜聯用

大戟屬(Euphorbia)為大戟科(Euphorbiaceae)最大的屬，該屬植物主要分布于西南橫斷山區和西北地區。貓眼草(EuphorbialunulataBunge)又名爛疤眼，為大戟科大戟屬植物貓眼草的全草，為多年生草本植物，主要分布于陜北、遼寧、吉林、新疆、河北、山西等地，根為圓柱狀，莖單生或叢生，高30～60 cm，葉線形至卵形[1]；性微寒，味苦，有毒；可祛痰、鎮咳、平喘、拔毒止癢等[2]。已有的研究表明[3-6]，貓眼草中含有黃酮類、萜類、酚酸類及木脂素類等化合物。肖寶紅等[7]發現，貓眼草水提物對Lewis肺癌有明顯的抑制作用，而且該作用呈現劑量依賴關系；王鈺等[8]研究發現，貓眼草中含有大戟素M、大戟苷A、澤瀉醇A、甘遂大戟萜酯D等，具有較強的腫瘤細胞抑制活性，尤其對人肝癌細胞HepG2的抑制能力較強；李榮等[9]發現，貓眼草中的金絲桃苷、quercetin-3-O-(6 ″-galloyl)-β-D-galactopyranoside、quercetin-3-O-(2″-galloyl)-β-D-galactopyranoside和槲皮素有較強的抗氧化活性。國內外關于貓眼草揮發油成分的研究未見報道。為完善對貓眼草中化學成分的研究，開發貓眼草的臨床藥用價值，本文首次采用水蒸汽蒸餾法提取貓眼草全草揮發油，用GC-MS聯用技術對其進行了分離鑒定，以面積歸一化方法測定各成分的相對含量，為進一步開發利用貓眼草資源提供科學的實驗依據。

1儀器與試藥

1.1儀器GC-MS/QP2010 Plus型氣相色譜-質譜聯用儀(日本島津公司)；GC-MS solution色譜工作站和NIST質譜數據庫(日本Shimadzu公司)；揮發油提取器(鄭州中天實驗儀器有限公司)；Concentrator5301低溫旋轉蒸發儀(eppendorf)；YP5102電子天平(上海光正醫療儀器有限公司)。

1.2試藥 藥材采自陜北，經西安交通大學醫學院生藥教研室鑒定為大戟科植物貓眼草EuphorbialunulataBunge的全草；水為蒸餾水；其余試劑均為分析純。

2方法與結果

2.1揮發油的提取取200 g貓眼草，粉碎，加入800 mL水，按照《中國藥典》附錄中揮發油提取方法，使用揮發油提取器蒸餾9 h，收集餾出液濃縮后用于氣質聯用分析。

2.2GC-MS分析2.2.1GC條件色譜柱為Rtx-5MS柱(30 m×0.25 mm×0.25 μm)；載氣為高純氦氣，流速為1.0 mL·min-1；進樣口溫度240 ℃，分流比5∶1；進樣量2 μL；柱溫采用程序升溫，初始溫度為40 ℃，保持5 min，以1.5 ℃·min-1的速率升至80 ℃，保持1 min，再以10 ℃·min-1的速率升至260 ℃，保持5 min。

2.2.2MS條件電子轟擊離子源(EI)，離子源溫度200 ℃；電子能量70 eV；電子倍增電壓(EMV)0.97 kV；GC-MS接口溫度280 ℃；質量掃描范圍m/z：50～800；質譜檢測起測時間(溶劑切斷時間)5 min；質譜圖計算機檢索譜庫：NIST147。

2.3結果采用GC-MS聯用技術對貓眼草揮發油檢測分析，得到其總離子流譜圖，見圖1。經GC-MS聯用儀計算機的NIST譜圖庫自動檢索，得出相應的化學成分，并以峰面積歸一化法測定各成分的相對含量，結果見表1。

圖1貓眼草揮發油總離子流圖

Fig.1 The TIC of the essential oil ofEuphorbialunulataBunge

表1貓眼草揮發油成分的GC-MS分析結果

Tab.1 GC-MS analysis of the essential oil ofEuphorbialunulataBunge

序號保留時間/min化合物分子式相似度/%相對含量/%15.539(cis/trans)-1,2-dimethyl-cyclohexane((順/反)-1,2-二甲基環己烷)C8H16910.2625.7272-methyl-1-penten-3-ol(2-甲基-1-戊烯-3-醇)C6H12O960.2135.900(E)-2-pentenal((E)-2-戊烯醛)C5H8O930.4446.412hexanal(正己醛)C6H12O973.9957.6342,3-dimethyl-1-butanol(2,3-二甲基-1-丁醇)C6H14O960.6367.933furfural(呋喃甲醛)C5H4O2910.3778.8462-hexenal(2-己烯醛)C6H10O972.46

表1(續)貓眼草揮發油成分的GC-MS分析結果

Tab.1(Continued) GC-MS analysis of the essential oil ofEuphorbialunulataBunge

序號保留時間/min化合物分子式相似度/%相對含量/%89.135(Z)-3-hexen-1-ol((Z)-3-己烯-1-醇)C6H12O970.5399.9821-hexanol(正己醇)C6H14O981.221010.9652-heptanone(2-庚酮)C7H14O950.371111.615heptanal(庚醛)C7H14O960.511212.353(E,E)-2,4-hexadiena((E,E)-2,4-己二烯醛)C6H8O930.211314.706methyl-2-oxohexanoate(2-氧代己酸乙酯)C7H12O3912.311415.608(E)-2-heptenal((E)-2-庚烯醛)C7H12O961.201515.773benzaldehyde(苯甲醛)C7H6O981.651617.2173,5,5-trimethyl-1-hexene(3,5,5-三甲基-1-己烯)C9H18901.181717.8681-octen-3-ol(1-辛烯-3-醇)C8H16O982.151818.1836-methyl-5-hepten-2-one(甲基庚烯酮)C8H14O923.171918.952ethylidene-cyclohexane(亞乙基環己烷)C8H14900.892019.329octanal(辛醛)C8H16O900.362120.163trans-2-trans-4-heptadienal(反,反-2,4-庚二烯醛)C7H10O973.442220.7383-(1-methylethyl)-2-cyclopenten-1-one(3-異丙基-2-環戊烯-1-酮)C8H12O850.432320.9513-isopropenyl-2-methylcyclohexanol(2-甲基-3-異丙烯基環己醇)C10H18O810.342421.188eucalyptol(桉油精)C10H18O950.602523.015benzeneacetaldehyde(苯乙醛)C8H8O9612.362624.191(E)-2-octenal((E)-2-辛烯醛)C8H14O951.542724.8433-methyl-benzaldehyde(3-甲基苯甲醛)C8H8O981.882825.2266-methyl-2-(2-oxiranyl)-5-hepten-2-ol(6-甲基2-(2-環氧乙基)-5-庚烯-2-醇)C10H18O2952.222925.442(E,E)-3,5-octadien-2-one((E,E)-3,5-辛二烯-2-酮)C8H12O890.623026.3958-oxo-2-nonenal(8-氧代-2-壬烯醛)C9H14O2840.363126.644trans-2-(2-(5-methyl-5-vinyl)tetrahydrofuran)-2-propanol(反-2-(2-(5-甲基-5-乙烯基)四氫呋喃)-2-丙醇)C10H18O2941.093227.470(E,E)-3,5-octadien-2-one((E,E)-3,5-辛二烯-2-酮)C8H12O920.563328.7893,4,4-trimethyl-2-cyclopenten-1-one(3,4,4-三甲基-2-環戊烯-1-酮)C8H12O8912.673431.014isopinocarveol(異松香芹醇)C10H16O940.413532.6104-(5-methyl-2-furanyl)-2-butanone(4-(5-甲基-2-呋喃基)-2-丁酮)C9H12O2900.943633.589borneol(龍腦)C10H18O910.663733.8603-acetoxy-4-(1-hydroxy-1-methylethyl)-1-methyl-cyclohexene(1-甲基-3-乙酰氧基-4-((1-羥基-1-甲基)乙基)-環己烯)C12H20O3860.643834.231(R)-4-methyl-1-(1-methylethyl)-3-cyclohexen-1-ol((R)-1-異丙基-4-甲基-3-環己烯-1-醇)C10H18O951.123935.083alpha,alpha-4-trimethyl-3-cyclohexene-1-methanol(α,α-1-甲基-4-三甲基-3-環己烯基-1-甲醇)C10H18O964.474038.8702-methoxy-4-vinylphenol(2-甲氧基-4-乙烯基苯酚)C9H10O2903.114140.101(E)-1-(2,6,6-trimethyl-1,3-cyclohexadien-1-yl)-2-buten-1-one((E)-1-(2,6,6-三甲基-1,3-環己二烯基)-2-丁烯醛-1-酮)C13H18O870.264241.7474-(2,6,6-trimethyl-1-cyclohexen-1-yl)-3-buten-2-ol(4-(2,6,6-三甲基-1-環己烯基)-3-丁烯-2-醇)C13H22O920.604343.100spathulenol(斯巴醇)C15H24O911.43

3討論

實驗結果表明，從貓眼草揮發油中鑒定出43種化合物，所鑒定成分占揮發油總流出峰面積的75.86%。其中醛類化合物14種，占30.77%；酮類8種，占19.02%；醇類14種，占17.08%；酚類1種，占3.11%；酯類1種，占2.31%；烯類2種，占1.82%；烷類2種，占1.15%；萜類1種，占0.60%。相對含量較高的依次是3，4，4-三甲基-2-環戊烯-1-酮(12.67%)，苯乙醛(12.36%)，α，α-1-甲基-4-((1-羥基-1-甲基)乙基)-環己烯(4.47%)，正己醛(3.99%)，反-2，4-庚二烯醛(3.44%)，甲基庚烯酮(3.17%)等。醛酮類化合物是化工原料、香料的重要來源。此外，貓眼草揮發油中的桉油精具有抗菌消炎、平喘、鎮咳祛痰等藥理作用[10]，龍腦具有抗炎、抗菌以及抗血栓作用[11]。氣相色譜/質譜聯用(GC-MS)方法分離效率好、靈敏度高、用量少、分析速度快[12]，在揮發油化學成分的分析中已經成為非常重要的手段[13-16]。本實驗結果為研究貓眼草的指紋圖譜、建立質量標準以及合理開發貓眼草資源奠定了一定的基礎。

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基金項目：十二五“重大新藥創制”科技重大專項項目(編號：2012ZX09103201-054)

作者簡介：王欣，女，碩士研究生

*通信作者：王嗣岑，男，教授，博士生導師

doi:10.3969/j.issn.1004-2407.2016.04.008

中圖分類號：R284

文獻標志碼：A

文章編號：1004-2407(2016)04-0353-04

(收稿日期：2015-09-09)

Analysis of essential oil of Euphorbia lunulata Bunge by gas chromatography-mass spectrometry

WANG Xin1， SU Hongli2， LI Weimin3， LI Yongwei1， WANG Sicen2*

(1.Department of Pharmacy,the First Hospital of Xi′an，Xi′an 710002，China；2.School of Pharmacy，Health Science Center，Xi′an Jiaotong University，Xi′an 710061，China；3.The First Affiliated Hospital of Medical College, Xi′an Jiaotong University， Xi′an 710061， China)

Abstract:ObjectiveTo analyze the chemical constituents of the essential oil from the whole plant of Euphorbia lunulata Bunge. MethodsThe essential oil was extracted from Euphorbia lunulata Bunge by steam distillation. The constituents were separated and identified by GC-MS and the relative content of each component was calculated by area normalization method. Results43 compounds of the essential oil were separated and identified，representing 75.86% of the amount. The essential oil obtained shows that aldehydes were found to be the major class (30.77%)，followed by ketones (19.02%)，and alcohols (17.08%). ConclusionIt was the first time to analyze the essential oil from Euphorbia lunulata Bunge，and the results provide important foundation for understanding the constituents and further exploitation of Euphorbia lunulata Bunge.

Key words:Euphorbia lunulata Bunge；steam distillation；gas chromatography-mass spectrometry