基于RSM法優化黑果腺肋花楸多酚提取工藝及抗氧化活性研究

高凝軒,李 斌,*,劉 輝,孟憲軍,矯馨瑤,雷 月,張 野,劉 元,陳世富,高 峰,劉志強

(1.沈陽農業大學食品學院,遼寧沈陽 110866; 2.沈陽綜合保稅區出入境檢驗檢疫局,遼寧沈陽 116001; 3.遼寧省富康源黑果腺肋花楸科技開發有限公司,遼寧海城 114200; 4.遼寧天惠農業科技有限公司,遼寧鳳城 118100)

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基于RSM法優化黑果腺肋花楸多酚提取工藝及抗氧化活性研究

高凝軒1,李 斌1,*,劉 輝2,孟憲軍1,矯馨瑤1,雷 月1,張 野1,劉 元1,陳世富3,高 峰3,劉志強4

(1.沈陽農業大學食品學院,遼寧沈陽 110866; 2.沈陽綜合保稅區出入境檢驗檢疫局,遼寧沈陽 116001; 3.遼寧省富康源黑果腺肋花楸科技開發有限公司,遼寧海城 114200; 4.遼寧天惠農業科技有限公司,遼寧鳳城 118100)

確定了黑果腺肋花楸多酚的最佳提取工藝,并測定其抗氧化活性。以超聲波輔助提取,對乙醇濃度、液料比、提取溫度、提取時間進行單因素實驗,在此基礎上以提取量為指標,利用響應面法優化工藝條件;通過對DPPH、ABTS及超氧陰離子自由基清除率的測定,評價其多酚類物質的抗氧化活性。結果表明:黑果腺肋花楸多酚最佳提取條件為液料比44∶1 (mL∶g)、乙醇濃度55%、提取溫度45 ℃、提取時間90 min,在此條件下黑果腺肋花楸多酚提取量達19.549 mg/g。黑果腺肋花楸多酚對DPPH、ABTS及超氧陰離子自由基有較強清除作用,并與其質量濃度呈正相關關系,說明其多酚具有良好的抗氧化活性。

黑果腺肋花楸,多酚,響應面法,抗氧化

黑果腺肋花楸,又名野櫻莓、不老莓,屬薔薇科,原產于北美地區,果實為深藍色小漿果,呈圓形,可用于加工果汁、果酒、果醬、罐頭、果脯等食品和飲料,是一種具有極高營養價值與經濟價值的新興小漿果[1-2]。國內外研究結果表明,黑果腺肋花楸果實中富含黃酮、花青素和酚酸等多酚類物質,且多酚含量是目前已知植物果實中含量最高的,每100 g黑果腺肋花楸鮮果中所含多酚可達到2050～2560 mg沒食子酸當量[3]。Bohkyung Kim等人[4]通過對黑果腺肋花楸與9種黑莓、3種樹莓、9種黑加侖、4種紅加侖等漿果進行比較發現,黑果腺肋花楸中總酚的含量是其他漿果的數倍,而花青素含量也明顯高于以上幾種漿果[5]。黑果腺肋花楸多酚組成主要為原花青素聚合物及花青素,分別占總酚含量的66%和25%,綠原酸與新綠原酸含量占總酚含量的7.5%。研究表明,其多酚具有很強的清除自由基、降血脂、降血糖和調節免疫系統等功能[6]。

超聲波輔助提取技術作為一項新型的天然產物輔助溶劑提取技術,與傳統提取工藝相比,利用超聲波所產生的強烈振動、高加速度及強烈的空化效應可加速提取成分進入溶劑,極大的提高提取率,縮短提取時間,避免長時間熱處理對提取物質的影響[7]。本實驗以黑果腺肋花楸凍果為原材料,利用超聲波輔助提取黑果腺肋花楸多酚,運用福林酚比色法測定多酚提取率,在單因素實驗的基礎上,使用響應面法進一步優化黑果腺肋花楸中多酚物質的最佳提取工藝條件。同時通過黑果腺肋花楸多酚進行體外抗氧化活性實驗,分析黑果腺肋花楸多酚對DPPH、ABTS及超氧陰離子自由基的清除能力,評價其抗氧化活性[8-9]。目前國內對于黑果腺肋花楸的食用研究正處于起步階段,對其中多酚類物質的提取及抗氧化活性的研究相對較少,該實驗旨在為黑果腺肋花楸多酚類物質的相關產品生產提供參考,并為黑果腺肋花楸多酚更多藥理作用的后續研究提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

黑果腺肋花楸凍果,采自于遼寧省海城富康源黑果腺肋花楸科技開發有限公司,挑選出無病蟲害和機械損傷且成熟度一致的黑果腺肋花楸富康源1號果實,清洗瀝干后速凍,并于-80 ℃超低溫冰箱中凍藏;維生素C標準品,國藥集團化學試劑有限公司;一水合沒食子酸,福林酚試劑,無水碳酸鈉,無水乙醇,Tris,鹽酸,鄰苯三酚,1,1-二苯基-2-三硝基苯肼,過硫酸鉀,ABTS均為分析純。

SB25-12DTN超聲波清洗機 寧波新芝生物科技股份有限公司;BSA224S分析天平SARTORIUS;JYL-C012九陽料理機 九陽股份有限公司;RE-52AA旋轉蒸發器 上海亞榮生化儀器廠;SHZ-D(Ⅲ)循環水式真空泵 鞏義市予華儀器有限責任公司;V5800紫外分光光度計 上海元析儀器有限公司。

1.2 實驗方法

1.2.1 黑果腺肋花楸多酚類物質的超聲波輔助提取 將黑果腺肋花楸凍果放置常溫解凍,使用料理機打漿。準確稱取5.00 g黑果腺肋花楸果漿倒入燒杯,加入一定體積的乙醇溶液,將燒杯密封,在超聲波條件下加溫提取多酚類物質。抽濾后,使用旋轉蒸發器,在40 ℃下蒸發除去乙醇,將提取液避光密封保存待測。

1.2.2 總酚的測定 總酚的測定采用福林酚比色法,使用一水合沒食子酸作為標準品。分別加入1 mL 50%福林酚試劑、3 mL 7.5%碳酸鈉溶液和5 mL蒸餾水,避光顯色2 h后于765 nm波長下測定吸光度,以吸光度(y)為縱坐標,質量濃度(x)為橫坐標,繪制標準曲線。得線性回歸方程,利用公式(1)計算樣品中多酚含量(mg/g)[10]。

式(1)

式中:C為標準曲線上查出的質量濃度mg/mL;V為待測提取液體積mL;N為提取液稀釋倍數;M為樣品質量g。

1.2.3 超聲波輔助提取黑果腺肋花楸總酚提取的單因素實驗 取黑果腺肋花楸凍果,在常溫下解凍,打漿備用。選取提取溫度、提取時間、乙醇濃度和液料比4個因素作為單因素實驗,以超聲波輔助提取過濾后,使用旋轉蒸發器除去乙醇,測定多酚含量分別考察各單因素對多酚含量的影響[11]。

1.2.3.1 提取溫度對黑果腺肋花楸多酚提取的影響 精確稱取7份5 g黑果腺肋花楸果漿,分別放入燒杯,按40∶1 mL∶g液料比加入55%乙醇溶液,分別在30、35、40、45、50、55、60 ℃下,使用超聲波輔助提取90 min,出去濾渣及乙醇后,分別測定不同提取溫度對黑果腺肋花楸多酚提取的影響。

1.2.3.2 乙醇濃度對黑果腺肋花楸多酚提取的影響 精確稱取7份5 g黑果腺肋花楸果漿,分別放入燒杯,按40∶1 mL∶g液料比加入乙醇溶液,乙醇濃度分別為40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%,使用超聲波輔助提取90 min,提取溫度設為40 ℃,除去濾渣及乙醇后,分別測定不同提取時間對黑果腺肋花秋多酚提取的影響。

1.2.3.3 提取時間對黑果腺肋花楸多酚提取的影響 精確稱取5份5 g黑果腺肋花楸果漿,分別放入燒杯中,按40∶1 mL∶g液料比加入55%乙醇溶液,使用超聲波輔助提取,提取溫度設為40 ℃。分別提取30、60、90、120、150 min,除去濾渣及乙醇后,分別測定不同乙醇濃度對黑果腺肋花楸多酚提取的影響[12]。

1.2.3.4 液料比對黑果腺肋花楸多酚提取的影響 精確稱取8份黑果腺肋花楸果漿,分別放入燒杯中,加入55%乙醇溶液,液料比分別為10∶1、15∶1、20∶1、25∶1、30∶1、35∶1、40∶1、45∶1 mL∶g。使用超聲波輔助提取90 min,提取溫度設為40 ℃,除去濾渣及乙醇,分別測定不同液料比對黑果腺肋花楸多酚提取的影響。

1.2.4 響應面分析法優化工藝條件實驗設計 以單因素實驗結果為基礎,選擇對黑果腺肋花楸多酚提取具有顯著性影響的單因素進行響應面優化實驗[13],根據Box-Behnken實驗設計原理,選擇液料比(X1)、乙醇濃度(X2)、提取溫度(X3)三個單因素,以多酚得率為響應值,利用Design-Expert 8.0進行三因素三水平響應面優化實驗設計,確定黑果腺肋花楸中多酚的最佳提取條件,實驗因素水平編碼見表1[14]。

表1 Box-Behnken響應面設計實驗因子與水平

Table 1 Variables and levels in response surface design

因素水平-101X1液料比(mL∶g)35∶140∶145∶1X2乙醇濃度(%)505560X3提取溫度(℃)404550

1.2.5 抗氧化活性測定

1.2.5.1 黑果腺肋花楸多酚清除DPPH自由基的測定 DPPH自由基抗氧化活性測定的方法參照MoLyneux 等人的方法略有改進,精確配制20、40、60、80、100 μg/mL黑果腺肋花楸多酚溶液及維生素C標準品溶液待測。移取0.1 mL多酚溶液于1.9 mL的DPPH乙醇溶液中(0.1 mmol/L),避光反應5 min,于517 nm處測定吸光度Ai;使用0.1 mL乙醇代替多酚待測液,同法操作,測定吸光度值A0;使用1.9 mL乙醇代替DPPH乙醇溶液,分別加入0.1 mL不同濃度的多酚待測液,同法操作,測得吸光度值Ai0。使用相同方法測定維生素C對DPPH自由基的清除能力作為對照組[15]。

DPPH自由基清除率(%)=[A0-(Ai-Ai0)]/A0×100

1.2.5.2 黑果腺肋花楸多酚清除ABTS自由基的測定 配制140 mmol/L過硫酸鉀溶液與7 mmol/L的ABTS溶液,并移取88 μL過硫酸鉀溶液與5 mL ABTS溶液混合制得ABTS母液,于室溫避光條件下靜置。使用蒸餾水稀釋ABTS母液至734 nm波長下吸光值在0.700～0.720范圍內,并將此吸光值記為A0。精確配制20、40、60、80、100 μg/mL黑果腺肋花楸多酚溶液及維生素C標準品溶液。使用旋渦震蕩器將0.1 mL多酚溶液與1.4 mL ABTS工作液混勻,室溫避光條件下反應6 min,于734 nm波長下測定吸光值Ai。使用相同方法測定維生素C對ABTS自由基的清除能力作為對照組。

ABTS自由基清除率(%)=[(A0-Ai)/A0]×100

1.2.5.3 黑果腺肋花楸多酚清除超氧陰離子自由基的測定 使用鄰苯三酚自氧化體系評價黑果腺肋花楸多酚對超氧陰離子自由基的清除能力。為避免溫度條件影響實驗結果,實驗所需試劑均放置于25 ℃水浴中保溫。精確配制20、40、60、80、100 μg/mL黑果腺肋花楸多酚溶液及維生素C標準品溶液待測,移取0.2 mL多酚溶液于5.7 mL Tris-HCl緩沖液中(50 mmol/L,pH8.20),并加入0.1 mL鄰苯三酚溶液(6 mmol/L)后漩渦混合。在320 nm波長下測定反應物吸光值(時間掃描模式)。反應進行至6 min,測定反應物的吸光度值Ai;使用蒸餾水代替鄰苯三酚作為對照,同法操作,測定吸光度值Ai0。使用等體積蒸餾水代替黑果腺肋花楸多酚溶液,作為自氧化對照組,同法操作,測定吸光度值A0。使用相同方法測定維生素C對超氧陰離子自由基的清除能力作為對照組。

超氧陰離子自由基清除能力(%)=[1-(Ai-Ai0)/A0]×100

1.3 數據統計分析

每個實驗重復處理3次,實驗數據使用Excel 2010進行整理和制圖,并采用SPSS19.0軟件對實驗數據進行分析,顯著性水平為p<0.05。同時采用Design-Expert 8.0軟件進行響應面優化實驗設計和分析。

2 結果與分析

2.1 單因素實驗結果

2.1.1 提取溫度對黑果腺肋花楸多酚提取的影響 由圖1可知,隨著溫度的增加,多酚含量呈先增高后降低的趨勢,當提取溫度達到45 ℃時,多酚提取量顯著高于其他提取溫度(p<0.05)。這是由于隨著溫度的升高,使細胞壁滲透性增強,同時也使得多酚的擴散速率及溶解度增加,進而提高多酚的提取效率[16]。但當溫度超過45 ℃時,隨著溫度的增加,由于溫度過高引起多酚類物質降解,化學結構遭到破壞,使得多酚提取量顯著下降[17]。因此選擇提取溫度40～50 ℃,進行響應面優化實驗。

圖1 提取溫度對黑果腺肋花楸多酚提取的影響Fig.1 Effect of extraction temperature on polyphenols yield注：標注不同字母表示差異顯著(p<0.05),圖2～圖4同。

2.1.2 乙醇濃度對黑果腺肋花楸多酚提取的影響 由圖2可知,乙醇濃度對黑果腺肋花楸多酚提取具有顯著影響(p<0.05)。在乙醇濃度40%～55%的范圍內,隨乙醇濃度的增加,多酚提取量呈上升趨勢,并在55%時出現最大值。而后隨著乙醇濃度的增加,多酚提取量顯著下降。這是由于多酚在植物中常與蛋白質等物質通過氫鍵的形式結合[18],低濃度的乙醇不足以破壞氫鍵結構,或破壞程度不夠,而高濃度乙醇會降低溶劑極性[19]。當乙醇濃度為55%時,溶劑極性與黑果腺肋花楸多酚最為接近,因此選擇乙醇濃度50%～60%,進行響應面優化實驗。

2.1.3 提取時間對黑果腺肋花楸多酚提取的影響 由圖3可知,提取時間在30～90 min時,隨時間的增加,多酚含量逐漸增加,并在90 min時出現最大值。而后,隨著提取時間的增加,多酚含量逐漸減小(p>0.05)。這說明在90 min時,多酚已經被充分提取[20]。隨著處理時間的增加,使得其中一部分多酚被氧化、分解,導致多酚提取量逐漸下降[21]。由于不同提取時間下多酚提取量差異并不顯著(p>0.05),因此在后續的響應面優化實驗中,提取時間選為90 min。

圖3 提取時間對黑果腺肋花楸多酚提取的影響Fig.3 Effect of ultrasound treatment time on polyphenols yield

2.1.4 液料比對黑果腺肋花楸多酚提取的影響 由圖4可知,液料比對黑果腺肋花楸多酚提取存在顯著性差異(p<0.05),在液料比10∶1～40∶1的范圍內,隨液料比的增加,多酚提取量顯著上升,并在液料比為40∶1時出現最大值。當液料比超過40∶1后,隨液料比的增加,多酚提取量開始下降。表明當液料比達到40∶1時多酚類物質已全部溶出,隨著液料比的加大,果渣中糖類與脂類物質的溶出影響了多酚類物質的提取[22]。因此選擇液料比35∶1～45∶1進行后續的響應面優化實驗。

圖4 液料比對黑果腺肋花楸多酚提取的影響Fig.4 Effect of material/liquid ratio on polyphenols yield

2.2 響應面分析法優化工藝條件

2.2.1 響應面實驗設計及結果分析 以單因素實驗結果為基礎,選擇三個對黑果腺肋花楸多酚提取具有顯著性影響的三個單因素(p<0.05)進行后續的響應面優化實驗。根據Box-Behnken實驗設計原理,選擇液料比(X1)、乙醇濃度(X2)、提取溫度(X3)3個單因素,以多酚含量為響應值,利用Design-Expert 8.0進行三因素三水平響應面優化實驗設計,共17個實驗點,中心實驗重復5次,用以估計實驗誤差,結果見表2。其中1～12號實驗為析因實驗,13～17號實驗為中心實驗。

表2 響應面實驗方案及結果

Table 2 Experimental design and results for response surface analysis

實驗號液料比(mL∶g)乙醇濃度(%)提取溫度(℃)多酚含量(mg/g)1-1-101494021-10150653-110177994110160315-10-115523610-1159627-1011855181011751690-1-1128331001-117108110-1115876120111571213000207921400020764150002047416000212151700021053

通過Design-Expert 8.0軟件對表2中實驗結果進行數據擬合并進行方差分析,得出二次回歸模型:Y=20.86-0.28X1+0.99X2+0.78X3-0.47X1X2-0.37X1X3-1.11X2X3-1.70X12-3.20X22-2.27X32。其方差結果見表3。

由表3可知,除液料比、液料比與乙醇濃度的共同作用項、液料比與溫度的共同作用項對響應值影響不顯著外,方程中其他各項對響應值的影響均達到極顯著水平。其各因素對黑果腺肋花楸多酚提取量影響順序為:乙醇濃度(X2)>提取溫度(X3)>液料比(X1)。

表3 黑果腺肋花楸多酚提取量的二次回歸模型方差分析表

Table 3 Analysis of variance for each term of developed quadratic regression model

方差來源平方和自由度均方F值p值顯著性回歸模型10508911685273<00001?X1063106328301364X27871787355500006?X34851485219000023?X1X2090109040500842X1X3054105424501613X2X34931493222500022?X12121311213547900001?X2243201432019510<00001?X322177121779833<00001?失擬項122304150000769純誤差03340082總誤差1066316

圖5 各因素對黑果腺肋花楸多酚提取量影響的響應面Fig.5 Response surface for the effects of cross-interaction on extraction yield of polyphenols from aronia melanocarpa

注:*：差異極顯著(p<0.01)。

根據回歸模型,使用Design-Expert 8.0軟件制得響應面分析圖和等高線圖。從響應面分析圖中可清楚的看出各因素交互作用對黑果腺肋花楸多酚提取量的影響。對多酚提取量影響越大的因素,其曲線走勢會相對越陡。在等高線圖中,各因素對多酚提取量的影響體現在其軸向等高線的密集程度上,軸向等高線越密集,說明該因素對黑果腺肋花楸多酚提取量的影響越顯著[23]。通過比較圖5中響應面分析圖與等高線圖可看出,乙醇濃度對多酚提取量影響最顯著,提取溫度對多酚提取量影響較為顯著,而液料比對多酚提取量的影響最弱。這也與之前方差分析的結果相吻合。

2.2.2 最佳條件的確定及驗證實驗 通過Design-Expert 8.0軟件分析得到最佳黑果腺肋花楸多酚提取工藝條件為:液料比44.49∶1 (mL∶g)、乙醇濃度55.37%、提取溫度45.40 ℃,此條件下多酚提取量的理論值為19.275 mg/g?？紤]到實際操作的可行性,將以上工藝條件調整為液料比44∶1 (mL∶g)、乙醇濃度55%、提取溫度45 ℃。根據此條件進行三組平行實驗,驗證其理論值的可靠性,得黑果腺肋花楸多酚提取量平均值為19.549 mg/g,該實際值與理論值接近且穩定,說明采用響應面優化法得到的最佳工藝條件可靠。

2.3 抗氧化活性測定

2.3.1 黑果腺肋花楸多酚清除DPPH自由基的測定 如圖6所示,在20～100 μg/mL范圍內,黑果腺肋花楸多酚與VC對DPPH自由基的清除能力均隨濃度的上升而增大,基本呈正相關趨勢。當濃度低于68 μg/mL時,黑果腺肋花楸多酚對DPPH自由基的清除能力明顯高于VC;當濃度高于68 μg/mL時,VC對于DPPH自由基的清除能力高于黑果腺肋花楸多酚,隨質量濃度的增加,差距逐漸加大?？芍诠倮呋ㄩ倍喾訉τ贒PPH自由基具有一定的清除能力,但相對于VC清除能力較弱。

圖6 DPPH自由基的測定Fig.6 DPPH free radical scavenging rates

2.3.2 黑果腺肋花楸多酚清除ABTS自由基的測定 如圖7所示,在20～100 μg/mL范圍內,黑果腺肋花楸多酚與VC對ABTS自由基的清除能力均隨濃度的上升而增大,總體上呈直線上升趨勢。但在相同質量濃度下,黑果腺肋花楸多酚對于ABTS自由基的清除能力均高于VC。由此可知,黑果腺肋花楸多酚對ABTS自由基具有一定的清除能力,且清除能力顯著高于VC。

圖7 ABTS自由基的測定Fig.7 ABTS free radical scavenging rates

2.3.3 黑果腺肋花楸多酚清除超氧陰離子自由基的測定 如圖8所示,在20～100 μg/mL范圍內,黑果腺肋花楸多酚與VC對超氧陰離子自由基的清除能力均隨濃度的上升而增大,總體上呈正相關趨勢。當質量濃度低于40 μg/mL時,黑果腺肋花楸多酚與VC對超氧陰離子自由基的清除能力隨質量濃度的上升增幅較大;當質量濃度高于40 μg/mL時,對超氧陰離子自由基的清除能力的增幅逐漸放緩。在相同的質量濃度下,黑果腺肋花楸多酚對超氧陰離子自由基的清除能力略高于VC。

圖8 超氧陰離子自由基的測定Fig.8 Superoxide anion free radical scavenging rates

3 結論

實驗考察了液料比、提取溫度、提取時間、乙醇濃度4個因素對黑果腺肋花楸多酚提取量的影響,其影響順序為乙醇濃度>提取溫度>液料比>提取時間。在單因素實驗的基礎上通過響應面分析法得出黑果腺肋花楸多酚提取最佳工藝條件:液料比44∶1 mL∶g、乙醇濃度55%、提取溫度45 ℃條件下提取90 min。在此條件下多酚提取量可達到19.549 mg/g,與預測值十分接近,證明了響應面優化實驗的合理性,且對今后進一步研究和實際生產具有一定的理論依據及實用價值。

通過測定黑果腺肋花楸中多酚類物質對DPPH、ABTS及超氧陰離子自由基的清除能力,其抗氧化能力與多酚質量濃度基本呈正相關關系。與VC對照發現,其清除自由基的能力在很大程度上高于VC。說明黑果腺肋花楸中多酚類物質具有較強的抗氧化活性,為其后續研究提供了參考,但其多酚組成及各組分含量還有待進一步研究。

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Optimization of extraction process of polyphenols fromAroniamelanocarpaby response surface methodology and antioxidant activity evaluation

GAO Ning-xuan1,LI Bin1,*,LIU Hui2,MENG Xian-jun1,JIAO Xin-yao1,LEI Yue1, ZHANG Ye1,LIU Yuan1,CHEN Shi-fu3,GAO Feng3,LIU Zhi-qiang4

(1.Shenyang Agriculture University,Shenyang 110866,China; 2.Shenyang Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau,Shenyang 116001,China; 3.Liaoning Fukangyuan Aroniamelanocarpa Technology Development Co. Ltd.,Haicheng 114200,China; 4.Liaoning Tianhui Agriculture Technology Co. Ltd.,Fengcheng 118100,China)

Objective:TodeterminetheoptimalextractiontechnologyofpolyphenolsfromAronia melanocarpa,andtodetermineitsantioxidantactivity.Methods:Byusingtheultrasonicassistedextractiontocarryoutsingle-factorexperimentofethanolconcentration,liquidratio,extractiontemperatureandextractiontime,basedontheexperimentalresultsobtained,RSM(ResponseSurfaceMethodology)wasusedtooptimizetheprocessconditions.BydeterminingthescavengingrateofDPPH,ABTSandsuperoxideanionfreeradical,itsantioxidantactivityofpolyphenolswasevaluated.Results:TheoptimalconditionsofextractingpolyphenolsfromAronia melanocarpaweretherawmaterialwitha44-foldvolumeof55%ethanol,extractiontemperature45 ℃,extractiontime,90min.ThescavengingeffectofpolyphenolsofAronia melanocarpaonDPPH,ABTSandsuperoxideanionwasstrong,andthescavengingcapitalwaspositivelyrelatedtothemassconcentrationofpolyphenols.Conclusion:TheamountofextractedpolyphenolsofAronia melanocarpawasupto19.549mg/gundertheoptimalconditions,andthepolyphenolshadstrongantioxidantcapacity.

aroniamelanocarpa;polyphenols;responsesurfacemethodology;antioxidantactivity

2016-04-01

高凝軒(1990-)，男，在讀碩士，研究方向：漿果深加工及功能性成分研究，E-mail：gaoningxuan1990@163.com。

*通訊作者:李斌(1979-)，男，博士，副教授，研究方向：漿果深加工及功能性成分研究，E-mail：libinsyau@163.com。

國家自然科學基金資助(31671863);遼寧省高等學校優秀人才支持計劃資助(2014108)；沈陽農業大學天柱山英才計劃項目資助(2014)；農業部公益性行業(農業)專項經費資助(201303073-04)。

TS255.1

B

1002-0306(2016)19-0249-07

10.13386/j.issn1002-0306.2016.19.040