食品微生物檢驗中兩種均質方法的比較

□ 邱樂波 連云港市質量技術綜合檢驗檢測中心

樣品均質是對食品微生物進行檢驗過程中的一項重要步驟，與微生物檢出率及檢驗準確性息息相關[1]。

1 資料與方法

1.1 菌種

本次研究會使用金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌與黑曲霉三種菌種。

1.2 儀器

本次研究會使用旋刀式均質器與拍擊式均質器兩種儀器。

1.3 培養基

本次研究會使用瓊脂培養基、瓊脂平板、7.5%氯化鈉肉湯及孟加拉紅培養基四種培養基。

1.4 方法

1.4.1 準備菌液

本次研究會準備金黃色葡萄球菌與大腸埃希菌混懸液與黑曲霉菌孢子懸液，測定全部菌液實際濃度并保證各菌液中菌數含量在50～100 CFU/mL。

1.4.2 制備供試液

1.4.2.1 旋刀式均質方法

于無菌條件下以相關標準為依據利用無菌秤或無菌刻度吸管將固體樣本25g或液體樣本25mL各取出三份，并將樣本分別放入盛有7.5%氯化鈉肉湯、225mL生理鹽水與水的勻漿杯中，通過對均質進行旋轉后得到1∶10比例的樣品菌液，并對金黃色葡萄球菌、霉菌菌落數進行測定，計算出菌落總數。操作過程中將旋刀式均質器的速度保持在每分鐘8000～10000轉，并以樣品實際形態為依據設定旋轉時間，以1～5min為宜。利用無菌刻度吸管將三種樣品勻液分別取出1mL，再采取沿管壁緩慢注入的方式將其分別注入盛有7.5%氯化鈉肉湯、9mL生理鹽水與水的無菌試管中，充分搖晃混勻后得到1∶1000比例的稀釋液。

1.4.2.2 拍擊式均質方法

于無菌條件下以相關標準為依據利用無菌秤或無菌刻度吸管將固體樣本25g或液體樣本25mL各取出三份，將樣本分別放入盛有7.5%氯化鈉肉湯、225mL生理鹽水與水的均質袋中，以實際檢測需要為依據調節拍擊式均質器的拍擊頻率、拍擊間隙與拍擊時間，以1～10 min為宜，并通過制作得出1∶10比例的樣品勻液，對金黃色葡萄球菌、霉菌菌落術進行測定，計算出菌落總數。利用無菌刻度吸管將三種樣品勻液分別取出1mL，再采取沿管壁緩慢注入的方式將其分別注入盛有7.5%氯化鈉肉湯、9mL生理鹽水與水的無菌試管中，充分搖晃混勻后得到1∶1000比例的稀釋液。

1.5 統計學分析方法

以結果P＜0.05定義為有顯著性差異，用均數±標準差表示計量資料并行t檢驗，用%表示計數資料并行X2檢驗，所有數據皆經SPSS19.0軟件進行處理。

2 結果

本次研究共利用兩種均質方法測定了5批質地、類型與特點各不相同的食品樣品，旋刀式均質方法所檢測出的金黃色葡萄球菌、霉菌與菌落總數分別如下。樣品1：金黃色葡萄球菌＜10、霉菌＜10、菌落總數45。樣品2：金黃色葡萄球菌＜10、霉菌25、菌落總數70。樣品3：金黃色葡萄球菌＜10、霉菌40、菌落總數50。樣品4：金黃色葡萄球菌30、霉菌＜10、菌落總數＜10。樣品5：金黃色葡萄球菌＜10、霉菌＜10、菌落總數10。拍擊式均質方法所檢測出的金黃色葡萄球菌、霉菌與菌落總數分別如下。樣品1：金黃色葡萄球菌＜10、霉菌＜10、菌落總數40。樣品2：金黃色葡萄球菌＜10、霉菌30、菌落總數65。樣品3：金黃色葡萄球菌＜10、霉菌45、菌落總數45。樣品4：金黃色葡萄球菌35、霉菌＜10、菌落總數＜10。樣品5：黃色葡萄球菌＜10、霉菌＜10、菌落總數＜10。經對比后發現，與旋刀式均質方法相比，拍擊式均質方法對霉菌項目的檢驗效果更好；與拍擊式均質方法相比，旋刀式均質方法對金黃色葡萄球菌與菌落總數的檢驗效果更好，相關數據經統計學分析后所得結果均表示其具有統計學意義（P＜0.05）。

3 討論

旋刀式均質方法與拍擊式均質方法是目前對食品微生物進行檢驗的主要方式。其中旋刀式均質方法是在無菌均質杯中加入一定量檢測樣品與稀釋液，并在一定時間采用一定轉速均質樣品，從而獲得樣品勻液；拍擊式均質則為在無菌均質袋中加入一定量檢測樣品與稀釋液，并在一定時間內利用拍擊式均質器對其進行拍打，從而獲得樣品勻液。

本次研究結果表明，兩種均質方法應用于食品微生物檢驗過程中，其檢驗結果存在一定差異（P＜0.05），與張秀琴的研究結果（食品微生物檢驗中兩種均質的效果分析）[2]相符，說明在日常對食品微生物的檢測工作當中需依據待檢食品的質地與品種來對均質儀器進行合理選擇，以有效避免食品中微生物在檢測過程中發生變化，對檢驗準確度產生影響。

綜上所述，需根據被檢測食品的具體質地、類型與特點選取合適的均質檢驗方式，以有效提升食品微生物的檢驗準確性。