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比較研究沙門菌檢驗中不同培養基的檢出效果

2018-01-20 19:47師秀娟
中國醫藥指南 2018年18期
關鍵詞:沙門菌液瓊脂

師秀娟

(新疆博湖縣疾病預防控制中心,新疆 博湖 841400)

沙門菌種類多樣,分別對人、動物、人與動物致病。據研究統計世界上細菌性食物中毒中,由沙門菌引起的中毒最多,其引起人體食物中毒的來源主要是肉類,蛋類、家禽、奶類食品也可引起[1-5]。沙門菌抗原結構較復雜,通常分為菌體抗原、表面抗原、鞭毛抗原等。本研究比較沙門菌檢驗中不同培養基的檢出效果,具體報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料:采集2017年6月~10月市場上180例樣品牛、羊肉,各類90份,分別進行三種不同平板培養基分離培養,A組接種SS瓊脂平板,B組接種HE瓊脂平板,C組接種NLD瓊脂平板。SS瓊脂平板:牛膽鹽8.5 g、牛肉侵出粉5.0 g、枸櫞酸鐵1.0 g、枸櫞酸鈉8.5 g、中性紅0.025 g、硫代硫酸鈉8.5 g、乳糖10.0 g、胨5.0 g、煌綠0.00033 g、瓊脂16.0 g、1000 mL蒸餾水。HE瓊脂平板:牛肉侵出粉3.0 g、氯化鈉5.0 g、蔗糖12.0 g、乳糖12.0 g、蛋白胨12.0 g、水楊素2.0 g、酸性復紅0.1 g、檸檬酸鐵納0.8 g、膽鹽20.0 g、溴麝香草酚蘭0.064 g、硫代硫酸鈉6.8 g、去氧膽酸鈉2.0 g、瓊脂15.0 g、1000 mL蒸餾水。XLD瓊脂平板:牛肉侵出粉3.0 g、蔗糖7.5 g、木糖3.75 g、乳糖7.5 g、硫代硫酸鈉6.8 g、去氧膽酸鈉2.5 g、氯化鈉5.0 g、L-賴氨酸5.0 g、林檬酸鐵鈉0.8 g、苯酚紅0.08 g、瓊脂15.0 g、1000 mL蒸餾水。制法均同常規。

1.2 方法:按照中華人民共和國衛生部中國國家標準化管理委員會標準進行操作和鑒定,用緩沖蛋白陳水(BPW)潤濕15支無菌棉簽均勻涂抹180例樣品牛、羊肉,然后分別放入BPW前增菌液,在(36±1) ℃恒溫培養箱中培養6 h,加入四硫磺酸鈉煌綠增菌液和亞硒酸鹽胱氨酸增菌液,繼續培養18~24 h,取出樣品接種環增菌液中一環,劃線分別接種于A、B、C三組培養18~24 h,觀察三組平板上菌落生長及特征。

1.3 檢驗評價:培養基平板上出現無色透明菌落,有黑色中心表明呈陽性,出現可疑假陽性需要生化、MID細菌以及血清學鑒定。

1.4 統計學方法:本研究中所得數據采用SPSS19.0進行分析,計數資料采用百分率(%)表示,使用χ2檢驗,當P<0.05時,差異有統計學意義。

2 結 果

假陽性是培養基平板上除沙門菌落出現的其他菌落,是對其他菌落抑制能力實驗的重要指標。實驗結果顯示,三組均出現可疑菌落,A組假陽性10份,出現概率為5.55%,B組假陽性17份,出現概率為9.44%,C組假陽性13份,出現概率為7.22%,差異顯著有統計學意義(P<0.05);陽性檢出A組41份,出現概率為22.77%,B組27份,出現概率為15.00%,C組18份,出現概率為10.00%,差異有統計學意義(P<0.05)。得出SS瓊脂平板抑菌能力高于HE瓊脂平板和XLD瓊脂平板,檢出率SS瓊脂平板效果也最好。

3 討 論

隨著社會的發展,醫學的進步,推動著沙門菌鑒定技術的進一步完善。沙門菌病是一種人畜共患的疾病,是一種常見的食物源性致病菌,其鑒定方法主要是依據形態生理生化特征、形態學特征、抗原特征、培養特征、噬菌體特征等。感染沙門菌的人以及帶菌者的糞便污染食品,會導致人發生食物中毒。其癥狀有惡心、頭痛、腹瀉、腹痛、嘔吐、畏寒、乏力、發熱、嗜睡等,持續時間一般為2~3 d。對此應采取以下防范措施:不喝未經處理的水;就餐、便后清洗雙手;接觸每種食物后仔細清洗道具避免感染其他食物;使用微波爐時要使食物內外溫度一致(>165 ℃)。沙門菌在水中繁殖較困難,其最易繁殖溫度為37 ℃,20 ℃以上即可大量繁殖。

通過沙門菌檢驗效果表明,平板分離培養基操作簡單,節省物資,還能增強沙門菌的生長能力,但由于選擇性的檢出效果各培養基不盡相同,不同菌落鑒別也需改變,在實際運用的時候,沒有具體的標準。一般來說,所有的沙門菌不可能由一種培養基檢驗決定,所以實際檢驗中,通常為兩種及兩種以上培養基分離培養,增強檢出率,提高檢驗的科學性。

本研究中采用牛、羊肉做實驗樣品,結果顯示SS瓊脂平板檢出率最高,具有強選擇性,HE瓊脂平板與XLD瓊脂平板具有中選擇性,檢驗應該采用SS瓊脂平板對比HE瓊脂平板或XLD瓊脂平板,提高檢驗沙門菌的科學性。

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