MASP-2在大腸癌患者血清及組織中的表達及其意義*

劉雪晴，石永威，李志江，劉坤，賈天軍

（河北北方學院醫學檢驗學院 臨床檢驗教研室，河北 張家口 075000）

有研究發現人甘露糖結合凝集素相關絲氨酸蛋白酶2（mannan-binding lectin associated serine protease, MASP-2）在患者血清中的濃度的變化與某些疾病，如慢性感染﹑惡性腫瘤及自身免疫性疾病等存在一定的相關性[1]。近幾年來，隨著飲食結構的改變和人民生活水平的提高，大腸癌的發病率逐年增高，成為臨床上常見的惡性腫瘤，嚴重危害了人類的健康。由于在總體治療效果和預后等方面不盡人意，人們迫切尋求一種新的﹑綜合性的及有效的治療方法來改變這一現象。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2016年1月-2016年7月于河北北方學院附屬第一醫院胃腸外科診斷為大腸癌的患者52例作為癌癥組?；颊呔催M行過放化療，每位患者取癌旁正常組織1例。另選取本院體檢中心年齡﹑性別結構相類似的80例健康人群外周血標本作為對照組。

1.2 方法

1.2.1 MASP-2濃度測定 將所有血清標本和試劑盒提前取出，平衡至室溫，1∶10倍稀釋，嚴格按照試劑盒的操作說明書進行操作。

1.2.2 免疫組織化學法 標本固定﹑脫水﹑透明﹑浸蠟﹑包埋及切片，二甲苯脫蠟，酒精水化，室溫孵育，抗原微波修復。滴加一抗，4℃冰箱過夜。滴加二抗。滴加鏈親合素標記的辣根過氧化物酶，37℃，30min。顯色液顯色，顯微鏡下觀察顯色情況，及時終止。自來水下充分沖洗，蘇木素復染。中性樹膠封片。在顯微鏡下觀察結果。

1.3 統計學方法

數據分析采用SPSS 19.0統計軟件，計量資料以均數±標準差（±s）表示，比較用t檢驗；計數資料以率表示，比較用χ2檢驗；P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組患者MASP-2比較

癌癥組患者血清MASP-2濃度為（303.22±125.76）ng/ml，對照組患者為（482.24±201.24）ng/ml，兩組比較，差異有統計學意義（t=5.766，P=0.001），癌癥組低于對照組。

2.2 癌癥組患者不同臨床病理因素與MASP-2表達的關系

癌癥組不同年齡﹑性別﹑TNM分期﹑淋巴結轉移及癌癥類型患者的MASP-2比較，差異無統計學意義（P＞0.05）；癌癥組低分化患者與高-中分化患者的MASP-2濃度比較，差異有統計學意義（P＜0.05）。見附表。

2.3 兩組患者MASP-2陽性率比較

癌癥組患者MASP-2陽性率為57.69%（30/52），對照組患者為28.85%（15/52），經χ2檢驗，差異有統計學意義（χ2=8.814，P=0.003）。

2.4 大腸癌組織和癌旁正常組織中MASP-2的表達

表達部位在細胞核，呈棕黃色，在癌旁組織中陽性表達少，偶見細胞核呈淡黃色。見附圖。

附表 癌癥組患者不同臨床病理因素與MASP-2的關系

附圖 大腸癌組織和癌旁正常組織中MASP-2的表達（×200）

3 討論

國外有文獻報道顯示大腸癌患者術前血清MASP-2蛋白的濃度和活性高于對照組[2]。甲狀腺乳頭狀癌患者血清中MASP-2的濃度高于甲狀腺瘤和正常人群[3]。MASP-2可能通過惡化炎癥和促進增殖而引起腫瘤的侵襲和轉移，提示血清中MASP-2濃度可作為預測大腸癌復發和存在時間的獨立指標[4-5]。然而關于兩者的相關性，不同研究小組得出的結論存在差異[6]。石燕萍等[7]報道甲狀腺腫瘤患者與健康對照者相比MASP-2濃度增高，但未進一步分析MASP-2濃度與疾病轉歸的影響，也未對其升高具體機制進行闡明。

腫瘤細胞的分化程度是指腫瘤細胞與其相應的正常細胞的相似程度。高分化癌與正常的組織類似，成熟度較高，惡性程度低。低分化癌成熟度較差，惡性程度高。MASP-2在惡性程度高的低分化腫瘤中的濃度高于惡性程度低的高-中分化腫瘤，提示惡性程度越高，表達量越低。大腸癌患者血清中MASP-2濃度較健康人群偏低的結果與國外報道有所出入，這種差異有可能與不同地區﹑不同種族有關，也有可能與實驗人群年齡分布有關，還有可能與樣本量較少有關。

國內最新報道，在胃癌組織中，MASP-2為低表達，而在癌旁組織中高表達[8]。石燕萍等[9]報道MASP-2在甲狀腺乳頭狀癌組織中升高，但在癌旁正常甲狀腺組織中無表達，且與其他臨床資料無明顯相關性。SWIERZKO等[10]報道MASP2在卵巢癌中的表達量高于正常卵巢和良性卵巢腫瘤。VERMA等[11]運用免疫組織化學法檢測了食管鱗狀細胞癌患者在不同階段MASP-2的表達，結果顯示MASP-2主要是在癌癥晚期和轉移的過程中表達，其表達與疾病的進展和腫瘤侵襲性密切相關。有文章報道在卵巢癌中MASP-2的基因表達高于健康對照組，表明MASP-2可能通過補體激活的凝集素途徑參與了卵巢癌的疾病過程[12]。本研究證實MASP-2陽性率在癌癥組中的表達量高于對照組，這與血清中MASP-2濃度檢測結果有所出入，還需進一步研究?？傊甅ASP-2參與了腫瘤的發生和發展。

本研究為深入研究大腸癌的發生﹑發展奠定了實驗基礎。但關于MASP-2在大腸癌侵襲及轉移之間的機制還有待于更進一步的研究。

參 考 文 獻：

[1]VARGA L, SZEPLAKI G, LAKI J, et al. Depressed activation of the lectin pathway of complement in hereditary angioedema[J].Clin Exp Immunol, 2008, 153(1): 68-74.

[2]YTTING H, CHRISTENAEN I J, THIEL S, et al. Pre-and postoperative levels in serum of mannose-binding lectin associated serine protease-2-aprognostic marker in colorectal cancer[J]. Hum Immunol, 2008, 69(7): 414-420.

[3]SHI Y, LIU G, ZHANG H, et al. Expressions and clinical signifiances of mannose-binding lectin (MBL) and MBL-associated serine protease 2 (MASP -2) in patients with thyroid neoplasm[J].Chin Ger J Clin Oncol, 2013, 12(13): 106-108.

[4]KOCSIS J, MESZAROS I, MADARAS B, et al. High levels of acute phase proteins and soluble 70 KDa heat shock proteins are independent and additine risk factors for mortality in colorectal cancer[J]. Cell Stress Chaperones, 2011, 16(1): 49-55.

[5]張海燕. MASP2與腫瘤相關性的研究進展[J]. 免疫學雜志,2015, 31(9): 812-815.

[6]YTTING H, CHRISTENAEN I J, STEFFENSEN R, et al.Mannose-binding lectin (MBL) and MBL-Associated serine protease-2 (MASP-2) genotypes in colorectal cancer[J]. Seand J Immunol, 2011, 73(2): 122-127.

[7]石燕萍, 劉閣玲, 張慧芹, 等. MASP-2 甲狀腺腫瘤患者血清MBL和MASP-2的表達及意義[J]. 廣東醫學, 2012, 33(2):229-230.

[8]段廷旺, 周永寧. MBL/MASP-2/P53在胃癌組織及癌旁組織中的表達情況[J]. 中國社區醫師, 2015, 31(4): 112-113.

[9]石燕萍, 劉閣玲, 張慧芹, 等. MASP-2在甲狀腺腫瘤中的表達及其臨床意義[J]. 中國現代醫藥雜志, 2010, 12(10): 4-6.

[10]SWIERZKO A S, SZALA A, SAWICKI S, et al. Mannose -binding lectin (MBL) and MBL -associated serine protease -2 (MASP-2)in women with malignant and benign ovarian tumours[J]. Cancer Immunol Immunother, 2014, 63(11): 1129-1140.

[11]VERMA A, MATTA A, SHUKLA N K, et al. Clinical significance of mannose-binding lectin-associated serine protease-2 expression in esophageal squamous cell carcinoma[J]. Int J Cancer, 2006,118(12): 2930-2935.

[12]SWIERZKO A S, SZALA A, SAWICKI S, et al. Mannose-binding lectin (MBL) and MBL-associated serine protease-2 (MASP-2)in women with malignant and benign ovarian tumours[J]. Cancer Immunology, Immunotherapy, 2014, 63(11): 1129-1140.