ProExc在HPV相關宮頸鱗狀上皮內病變中的表達及意義

閔建芳　楊安強

[摘要] 目的 檢測ProEXC在宮頸鱗狀上皮內病變（SIL）中的表達及高危型HPV DNA檢測，探討其在臨床病理診斷中的意義。 方法 方便選取2013年2月—2015年2月采用免疫組化的方法檢測100例宮頸低級別鱗狀上皮內病變（LSIL）、200例宮頸高級別鱗狀上皮內病變（HSIL）樣本中ProEXC的表達， 采用HC-2法檢測HPV DNA。結果 ProEXC陽性染色定位于細胞核，HPV DNA 1.0 pg/mL為陽性；其中在宮頸LSIL中陽性率為41.0%、62.0%，在宮頸HSIL中的陽性率為69.0%、78.5%，二者相比差異有統計學意義（P<0.01）；在對照組中陽性率為8.3%、10.0%，與宮頸LSIL組和宮頸HSIL組相比，差異有統計學意義（P<0.01）。 結論 宮頸HSIL中ProEXC的高表達，再結合高危型HPV檢測，可能作為輔助診斷宮頸SIL的指標，并能有可能區分宮頸HSIL與宮頸LSIL。

[關鍵詞] 鱗狀上皮內病變；ProEXC；HPV

[中圖分類號] R4 [文獻標識碼] A [文章編號] 1674-0742（2018）02（c）-0001-03

Expression and Significance of and ProEXC in HPV Associated Cervical Squamous Intraepithelial Lesion

MIN Jian-fang1， YANG An-qiang2

1.Department of Pathology， the First Affiliated Hospital of Shihezi University， Shihezi， Xinjiang， 832000 China； 2.Department of Pathology， Wuxi Maternal and Child Health Hospital， Wuxi， Jiangsu Province， 214000 China

[Abstract] Objective This paper tries to investigate the significance of the pathological diagnosis by detect the expression of ProEXC and HR-HPV DNA in cervical squamous intraepithelial lesion（SIL）. Methods From February 2013 to February 2015，100 cases of LSIL， 200 cases of HSIL were convenient collected ProEXC was detected by immunohistochemistry. HR-HPV DNA was detected by HC-2. Results ProEXC positive staining was localized in the nucleus and HPV DNA 1.0 pg/ml for the positive. The positive rate of the LSIL was 41.0%， 62.0% and HSIL was 69.0%， 78.5%， compared to the difference between the two was significant（P<0.01）. The positive rate of control group was 8.3%， 10.0%，LSILand HSIL compared， the difference was significant（P<0.01）. Conclusion The high expression of ProEXC in HSIL， combined with HR- HPV detection， can be used as a index of auxiliary diagnostic SIL， and can distinguish between HSIL and LSIL.

[Key words] SIL； ProEXC； HPV

宮頸癌是女性生殖系統較常見的惡性腫瘤。我國宮頸癌的患病率也呈逐漸升高的趨勢。而對于宮頸癌的防治，早預防、早診斷與早治療是關鍵，因此，我們只有對宮頸鱗狀上皮內病變（SIL）做出正確的診斷，臨床醫生也才能根據該診斷做出相應的治療，最終達到徹底治愈。那么，宮頸SIL的準確診斷及潛在意義在宮頸癌防治中就起到了關鍵作用。ProEXC是拓撲異構酶Ⅱα（TOP2A）和微小染色體修復蛋白2（MCM2）雞尾酒抗體。研究表明[1-2]在宮頸SIL病變中，ProEXC的表達隨著宮頸SIL的級別升高而增高，且與高危HPV（HR-HPV）感染密切相關。2013年2月—2015年2月該研究通過檢測ProEXC在宮頸SIL中的表達，探討ProEXC表達與HR-HPV感染在宮頸SIL診斷中的價值，提高宮頸SIL的診斷正確率，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

方便選取該院手術的宮頸標本共360例。其中宮頸低級別鱗狀上皮內病變（LSIL）100例，宮頸高級別鱗狀上皮內病變（HSIL）200例，正常宮頸對照60例。

1.2 檢測方法

①標本采用10% 中性甲醛固定，制成蠟塊，通過石蠟切片后進行HE染色，最后在光鏡下確定病理診斷及分組。ProEXC檢測采用免疫組化SP法，用已知陽性片做ProEXC陽性對照。通過提前稀釋后，把MCM2與TOP2A混合為雞尾酒抗體，即ProEXC[3]。②采用雜交捕獲Ⅱ代（HC-2）法檢測HPV DNA。

1.3 結果判斷

ProEXC陽性為細胞核染成棕黃色，結果判定依據陽性細胞數及著色強度兩項指標，進行判讀；分為陰性（-）、弱陽性（+）、中度陽性（++）、強陽性（+++）。HC-2判定標準：陰性< 1.0 pg/mL；陽性≥1.0 pg/mL。

1.4 統計方法

應用SPSS 14.0統計學軟件進行處理，計數資料采用百分率表示，采用χ2檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 ProEXC在宮頸SIL中的表達

宮頸SIL組及對照組中ProEXC表達陽性率（見表1），宮頸對照組中ProEXC表達率低于SIL組，差異有統計學意義（χ2=73.65，P<0.01）；ProEXC在宮頸HSIL與LSIL中的表達，差異有統計學意義（χ2=21.72，P<0.01）。ProEXC在對照組中，陽性細胞數很少超過10% ，而且主要分布在近基底層（見圖1），而在宮頸HSIL中，陽性細胞散在分布于上皮1/3以上至上皮全層，陽性細胞數量多少不等，<10%或>90%均可見到（見圖2）。

2.2 HPV DNA在宮頸SIL中的表達

宮頸SIL組及對照組中HPV DNA陽性率（見表2），宮頸對照組中HPV DNA陽性表達低于正常SIL組，差異有統計學意義（χ2 =158，P<0.01）；HPV DNA在宮頸LSIL組的陽性低于宮頸HSIL組，差異有統計學意義（χ2 =9.21，P<0.01）。

3 討論

宮頸癌是女性生殖系統較常見的惡性腫瘤。由于宮頸癌的發生存在著一個較長、可逆的癌前病變區，即宮頸SIL。宮頸細胞學檢查在女性宮頸癌的防治中一直發揮作用，但由于臨床醫生的取樣水平及經驗不同，導致取樣細胞多少不均，進而致其敏感性低及假陰性率高，最后影響到診斷的準確性。通過婦科陰道鏡下取宮頸活檢組織送病理檢查是診斷宮頸SIL的金標準。但國內不同病理醫生對宮頸SIL診斷標準有不同的理解，最后做出的病理診斷出入也很大。因此，希望通過檢測一些特異性標志來幫助病理醫生正確診斷宮頸SIL。

ProEXC是MCM2和TOP2A的雞尾酒抗體[1，3-5]，通過改變DNA空間結構，在DNA生命活動中具有重要作用。TOP2A的表達有賴于細胞周期，在正常細胞中僅見于S期和G2/M期，但在腫瘤細胞中，TOP2A表達率增高且不再依賴細胞增殖周期，其在G0、G1 期即可出現表達[6]，使得在惡性增殖細胞中的表達比良性增生細胞更高。屈王蕾等[2]認為隨著宮頸癌前病變程度的升高，Topo II a蛋白表達隨之上調，且與細胞中高危型HPV的拷貝量呈正相關。MCM 2是MCM復合體的一個組分，它在休眠細胞中低表達，在增生活躍的細胞中高表達，在細胞從G0 進入G1 期之前表達即開始升高，G1末期和S早期達到峰值[7]。研究表明，在高危型HPV感染和宮頸SIL病變時MCM 2過表達[8]，ProEx C將TOP2A和MCM 2聯合使用，可發揮兩個抗體的協同作用，防止單獨應用MCM 2和TOP2A時可能存在的漏標情況，使雞尾酒抗體得到認同[1，3]。研究表明，ProEXC是宮頸HSIL的標志物之一，對宮頸HSIL具有較高的特異性和敏感性，并有助于識別容易進展到宮頸癌的病變[1，3-6]，Pinto等[4]研究顯示，對宮頸HSIL，ProEXC具有較高的敏感性和特異性，對于宮頸非SIL，ProEXC的假陽性率也較低，有利于鑒別反應性上皮改變與宮頸SIL病變。該研究中ProEXC在宮頸HSIL與LSIL中的表達差異均有顯著性，且病變越嚴重陽性表達率越高，進一步證實了ProEXC在宮頸HSIL與LSIL中的診斷意義。

綜上所述，對宮頸鱗狀上皮內病變客觀、正確的分級和病理診斷，對臨床醫生下一步治療以及評價預后是非常重要的。本文結果探討顯示，在宮頸鱗狀上皮內病變中聯合檢測ProEx C和HR-HPV，可能作為輔助診斷宮頸鱗狀上皮內病變的指標，并能有可能區分宮頸HSIL與宮頸LSIL，幫助病理醫生正確診斷宮頸SIL。

[參考文獻]

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（收稿日期：2017-11-21）