妊娠期糖尿病母親新生兒臍血MMP-9、SICAM-1水平與NBNA的相關性研究

郝麗，殷其改

（連云港市第一人民醫院，江蘇 連云港 222002）

妊娠合并糖尿病是妊娠期最常見的合并癥，孕婦糖尿病嚴重時可導致胎兒宮內慢性缺血缺氧，導致新生兒腦損傷隨之發生。某些炎癥因子參與了腦損傷過程，并產生重要作用。研究表明，基質金屬蛋白酶-9（MMP-9）、可溶性細胞粘附分子-1（SICAM-1）在腦損傷中明顯增高[1]。本實驗監測母親妊娠期合并糖尿病時嬰兒臍血中基質金屬蛋白酶-9（MMP-9）、可溶性細胞粘附分子-1（SICAM-1）表達水平改變情況，同時研究其與NBNA相關性，為早期發現新生兒腦損傷并指導臨床早期干預提供一定的臨床依據。

1 資料與方法

1.1 研究對象 妊娠期糖尿病母親嬰兒及正常對照組嬰兒皆出生于連云港第一人民醫院產科，其中妊娠期糖尿病母親嬰兒組為實驗組33例，同期孕周相似、血糖正常孕婦所分娩的新生兒50例為對照組。排除：①胎盤早剝；②臍帶脫垂、真結、扭轉；③妊娠合并紫紺型先天性心臟病或伴心功能不全；④較大面積肺部感染；⑤慢性肺功能不全如駝背、哮喘反復發作；⑥重度貧血；⑦妊娠期高血壓；⑧妊娠合并慢性腎炎；⑨新生兒嚴重感染、貧血、先天發育畸形、中樞神經系統畸形、溶血性疾病或先天性心臟疾病。

實驗組男嬰18例，女嬰15例，出生體質量2.54 kg-5.35 kg（3.78±0.64）kg，胎齡37+1周-41+1周（38.57±0.99）周，APgar評分一分鐘3分-9分（8.67±1.08）分；對照組男嬰27例，女嬰23例，出生體質量2.93 kg-4.5 kg（3.45±0.35）kg，胎齡37+4周-41+3周（39.61±1.03）kg，APgar評分一分鐘8分-9分（8.94±0.24）分。實驗組與對照組比較：性別、出生體質量、胎齡差別無統計學意義（P＞0.05）。

1.2 研究方法

1.2.1 標本采集 實驗組及對照組均于生后采集臍靜脈血3 mL，立即于室溫條件下離心，3,000轉/min，離心10 min；分離到血清存放于-70oC冰箱等待統一檢測。

1.2.2 MMP-9、SICAM-1的檢測 選用上海西唐生物科技有限公司MMP-9、SICAM-1試劑盒，采用酶聯免疫雙抗夾心法（ELISA法）進行檢測，嚴格按照試劑盒要求方法進行檢測。

1.2.3 NBNA測定 NBNA測試由受過專門培訓的醫生采用鮑秀蘭等制定的20項NBNA測定方法進行測評：評價有無腦損傷及腦損傷程度。

表1 實驗組與對照組MMP-9、SICAM-1水平比較（Mean±SD,ng/mL）

表2 實驗組與對照組NBNA得分比較（M,P25-P75）

1.3 統計數據分析 采用SPSS 17.0版統計軟件進行數據統計學分析。MMP-9、SICAM-1用均數±標準差（Mean±SD）表示，組間比較采用矯正t檢驗；NBNA呈偏態分布，用中位數（M）及四分位數間距（P25-P75）表示，兩組比較采用秩和正態近似法檢驗；實驗組MMP-9、SICAM-1與NBNA相關性分析采用Spearman秩相關分析。以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 實驗組MMP-9、SICAM-1含量較正常對照組升高，差別有統計學意義（P＜0.05）。見表1。

2.2 實驗組NBNA得分較對照組降低，差別有統計學意義（P＜0.05）。見表2。

2.3 實驗組與對照組MMP-9、SICAM-1分別與NBNA得分進行Spearman秩相關分析，實驗組兩者均呈負相關，相應秩相關系數rs分別為-0.618；-0.549；對照組無明顯相關性。見表3。

3 討論

妊娠期糖尿病對新生兒造成的諸多不良影響，常表現為新生兒低血糖、生后體質量大、呼吸障礙等疾病，但近年研究顯示由于孕婦糖尿病嚴重時胎盤血管可發生痙攣、硬化、狹窄，導致絨毛間血流灌注不足，嚴重者可出現胎兒宮內缺血缺氧[2]，進而可造成畸形胎兒、流產、死胎、早產等情況的發生[3]。胎兒宮內缺血缺氧是否會引起胎兒腦損傷并延續至生后，目前尚無較大樣本的臨床報道。本實驗對早期預測妊娠期糖尿病母親新生兒腦損傷的發生具有重要的現實意義。

多項研究顯示，當胎兒或新生兒期缺血缺氧時，壞死的腦細胞釋放出一些蛋白質及細胞因子，如基質金屬蛋白酶MMP-9、MMP-2、S100B蛋白、SICAM-1、半胱氨酸蛋白酶-3（caspase-3）、神經元特異性烯醇化酶（NSE）、髓鞘堿性蛋白（MBP）等，這些蛋白質及細胞因子可在血液中檢測到，研究這些指標有助于了解是否存在腦損傷及腦組織損傷的范圍、程度。

基質金屬蛋白酶（matrix metalloproteinases,MMPs）是一類結構與氨基酸組成相似，依賴鋅離子的蛋白水解酶，迄今為止已經發現了26種。其具有降解多種細胞外基質（extracellular matrx,ECM）成分的功能，具有不同程度的特異性。近年來，MMPs被認為參與了腦卒中后的病理生理過程，腦缺血時MMPs上調并且可以直接導致神經元死亡，而應用廣譜MMPs抑制劑或抗體可減少腦梗死的體積。研究發現在短暫局灶性腦缺血鼠模型中MMPs（尤其是MMP-9、MMP-2）的異?；钴S直接導致神經元程序性死亡和腦損害，腦缺血缺氧后蛋白溶解酶包括MMPs和纖溶酶等通過降解基底膜成分，使微血管通透性增加，血腦屏障（blood brain barrier,BBB）完整性被破壞。而血腦屏障的開放是腦缺血再灌注后腦水腫、炎性細胞浸潤進而導致神經細胞死亡的重要原因。所以，MMPs與腦損傷的關系逐漸為人們所重視，尤其是MMP-9、MMP-2與缺氧缺血性腦損傷關系密切[4]。我們的實驗證實，在糖尿病母親嬰兒臍血血清中MMP-9明顯升高，且與NBNA得分負相關，說明腦損傷程度越重，升高越明顯，因此，MMP-9可作為缺氧后腦損傷的一項監測指標。

細胞粘附分子是細胞合成的，介導細胞間或細胞與細胞基質間接觸和結合的分子總稱，細胞粘附分子-1（intercellular adhesion molecule,ICAM-1）為90 ku-115 ku單鏈跨膜糖蛋白，是免疫球蛋白超家族主要成員，中樞神經系統內多種腦損傷中起重要作用。研究表明缺血性腦損傷時，內皮細胞通過上調ICAM-1等粘附分子加重炎癥反應，這些粘附分子與血循環中的白細胞結合并促使白細胞進入中樞神經系統，白細胞進入中樞神經系統釋放多種炎癥介質、蛋白水解酶等細胞毒性物質，導致血腦屏障破壞、腦組織水腫及神經元變性壞死，造成缺血后腦組織嚴重的病理改變[5]。ICAM-1可以從細胞表面脫落，成為可溶性ICAM-1（SICAM-1），測體液中SICAM-1水平可以反映ICAM-1含量。有文獻已報道[6]，嚴重腦外傷及急性腦梗死患者血清sICAM-1水平明顯升高，隨病情好轉逐漸下調，ICAM-1可能通過募集炎癥細胞、釋放細胞毒物質等引起腦組織的持續性損傷。本研究表明，在糖尿病母親嬰兒臍血血清中SICAM-1明顯升高，且與NBNA得分負相關，說明腦損傷程度越重，升高越明顯，因此，SICAM-1可作為缺氧腦損傷的一項監測指標。

綜上所述，MMP-9、SICAM-1在妊娠糖尿病母親所產新生兒臍血中表達明顯上升，且與新生兒NBNA評分呈負相關。臍血MMP-9、SICAM-1可作為新生兒腦損傷的指標，通過監測其水平變化推測新生兒腦損傷程度及預后，為更早知曉干預新生兒腦損傷提供無創監測指標，有重要臨床意義。但其具體作用機制有待于進一步研究探討。