食管癌組織中和癌旁正常組織Ki67、TS、CerbB-2的表達水平及其臨床意義

鄭海波 彭小雨 吳智勇 傅俊惠

【摘要】 目的 研究食管癌組織和癌旁正常組織中Ki67、TS、CerbB-2的表達水平及其對手術療效和預后的影響。方法 44例食管癌切除術患者， 采用免疫組化檢測食管癌組織和癌旁正常組織的Ki67、胸苷酸合成酶（TS）、CerbB-2水平， 分析食管癌組織和癌旁正常組織Ki67、TS、CerbB-2表達水平的特征及臨床病理免疫組化因素對食管癌術后5年生存率的影響。結果 癌組織Ki67陽性率為95.5%（42/44）， 其中強陽性率為52.3%（23/44）;癌旁正常組織Ki67陽性率為2.3%（1/44）。癌組織TS陽性率為72.7%（32/44）;癌旁正常組織TS陽性率為27.3%（12/44）。癌組織CerbB-2陽性率為11.4%（5/44）;癌旁正常組織CerbB-2陽性率為2.3%（1/44）。癌組織Ki67陽性率遠遠高于癌旁正常組織， TS差別較小， CerbB-2無論癌組織或癌旁正常組織大多為陰性。隨訪至2018年4月底， 全部患者無失訪， 死亡27例， 生存17例， 1、3、5年生存率分別為86.4%（38/44）、54.5%（24/44）、45.5%（20/44）。區域淋巴結轉移陰性患者術后5年生存率高于陽性患者， 癌組織非Ki67強陽性表達患者5年生存率高于Ki67強陽性表達患者， 差異具有統計學意義（P<0.05）。區域淋巴結轉移陽性、癌組織Ki67強陽性表達影響患者術后5年生存率。結論 Ki67水平越高， 腫瘤組織生長越活躍， 術后更容易出現復發轉移。對Ki67高表達及合并淋巴結轉移患者應該給予更積極的輔助放化療。TS、CerbB-2水平對個體化治療指導和預后判斷沒有明確意義。

【關鍵詞】 食管癌; Ki67;胸苷酸合成酶;CerbB-2 ;療效;預后

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2019.05.004

采用以手術為主， 聯合放療化療的綜合治療方法是提高食管癌治療效果的發展趨勢， 但是手術前后放療化療的總體效果提高并不令人滿意。哪些患者能夠從以術前為主的綜合治療中獲益， 以及如何篩選特異性指標用以指導個體化治療成為目前食管癌及其他一些惡性腫瘤的研究熱點[1]。選擇2010年8月～2013年12月本院采用免疫組化檢測44例食管癌切除術后腫瘤標本中腫瘤和癌旁組織的Ki67、TS、CerbB-2水平， 隨訪至2018年4月底， 試圖分析其與食管癌綜合治療效果的相關性， 初步評估這些指標在指導個體化治療的臨床意義?，F報告如下。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 選擇2010年8月～2013年12月于本院行食管癌切除術患者44例作為研究對象， 其中男35例， 女9例;年齡32～76歲， 平均年齡56歲;根治切除術39例， 姑息切除5例;TNM分期Ⅰ期2例， Ⅱ期17例， Ⅲa期25例;術后放療11例， 術后復發放療3例;患者病理類型均為鱗狀細胞癌， 淺肌層2例， 深肌層6例， 肌層外36例;術后病理證實淋巴結轉移癌23例（52.3%）。

1. 2 取材及免疫組化染色方法 手術標本取材取腫瘤組織和食管殘端正常黏膜組織， 免疫組SP檢測試劑盒， DAB顯色試劑盒， 均購自福建邁新生物技術公司。試劑盒Ki67、CerbB-2、TS均為鼠抗人單抗， 邁新公司提供的陽性片作為陽性對照。免疫組化染色步驟嚴格按照說明書操作。

1. 3 免疫組化評分 Ki67陽性表達定位于腫瘤細胞核， 呈棕黃色顆粒。CerbB-2蛋白陽性表達定位于細胞質， 呈棕黃色或深黃色， 兩者都是按陽性細胞所占百分比及著色深淺判定結果。計算陽性細胞百分比， 分為4級， 強陽性+++（>50%）， 陽性++（25%～50%）， 弱陽性+（10%～25%）， 陰性-（<10%）。TS結果判定：胞漿胞核出現棕黃色顆粒+， 深棕色顆粒++， 深黃色顆粒+++。

1. 4 統計學方法 采用SPSS17.0統計學軟件對研究數據進行統計分析。計數資料以率（%）表示， 采用χ2檢驗。P<0.05表示差異具有統計學意義。

2 結果

2. 1 食管癌組織和癌旁正常組織Ki67、TS、CerbB-2表達水平的特征 癌組織Ki67陽性率為95.5%（42/44）， 其中強陽性率為52.3%（23/44）;癌旁正常組織Ki67陽性率為2.3%（1/44）。癌組織TS陽性率為72.7%（32/44）;癌旁正常組織TS陽性率為27.3%（12/44）。癌組織CerbB-2陽性率為11.4%（5/44）;癌旁正常組織CerbB-2陽性率為2.3%（1/44）。癌組織Ki67陽性率遠遠高于癌旁正常組織， TS差別較小， CerbB-2無論癌組織或癌旁正常組織大多為陰性。

2. 2 臨床病理免疫組化因素對食管癌術后5年生存率的影響分析 隨訪至2018年4月底， 全部患者無失訪， 死亡27例， 生存17例， 1、3、5年生存率分別為86.4%（38/44）、54.5%（24/44）、45.5%（20/44）。區域淋巴結轉移陰性患者術后5年生存率高于陽性患者， 癌組織非Ki67強陽性表達患者5年生存率高于Ki67強陽性表達患者， 差異具有統計學意義（P<0.05）。不同性別、浸潤深度、肉眼根治術、TS表達、CerbB-2表達患者5年生存率比較差異無統計學意義（P>0.05）。區域淋巴結轉移陽性、癌組織Ki67強陽性表達影響患者術后5年生存率。

3 討論

3. 1 術后檢測癌組織中Ki67表達水平的臨床價值 目前有較多報道采用免疫組化檢測腫瘤各種標記來預測腫瘤的惡性行為及對各種治療的敏感度 [2-5]， 其中以腫瘤組織的Ki67水平判斷放療敏感度方面應用較廣。Ki67是在細胞增殖周期G1、S、M、G2期出現的核抗原， 以M期最高， 其表達的高低反映了細胞增殖狀態， 因為放射線對增殖期細胞殺傷力較大， 細胞增殖活性越強， 放療的敏感性可能越強。因此， Ki67在食管鱗癌組織中的表達程度可能作為判斷該腫瘤放療敏感性的指標之一， 是食管癌個體化治療方案選擇的重要參考。但是， Ki67水平越高， 腫瘤組織生長越活躍， 容易出現脈管癌栓、淋巴結轉移、雙灶癌， 術后更容易出現復發轉移等。若早期出現遠處轉移， 局部療效并未帶來實際益處， 本組術后病理證實淋巴結轉移者占52.3%， Ki67強陽性占52.3%， 說明放療療效除了可以參考放療敏感指標Ki67水平外， TMN分期情況仍然是最重要的參考依據。在預后方面， Ki67強陽性患者5年生存率更差， 本組資料顯示， 是否有淋巴結轉移和是否Ki67強陽性對術后5年生存率的有顯著影響性， 而不同性別、浸潤深度、肉眼根治術、TS表達、CerbB-2表達患者5年生存率比較差異無統計學意義（P>0.05）。手術后， 對腫瘤Ki67水平高患者及同時合并淋巴結轉移者應該給予更積極的輔助放療、化療。

3. 2 術后檢測癌組織中TS和CerbB-2表達水平的臨床意義

在本組研究中， 癌組織TS陽性率高， 癌旁正常組織陽性率低。理論上組織細胞中TS水平與5-氟尿嘧啶（5-Fu）細胞毒作用呈負相關[6， 7]， 依此推測食管癌組織細胞比正常組織對化療藥5-Fu更加耐藥。檢測腫瘤組織TS水平并據此作為判斷化療敏感性的指標， 實際意義不大。在對預后的影響方面， TS檢測水平并未有顯著性差異。CerbB-2表達在癌組織及正常組織均較低， 對食管癌的個體化治療指導和預后判斷價值不大。

3. 3 同時檢測食管手術標本癌組織和癌旁正常組織腫瘤標志物的價值 一些惡性度較高、較早及較易發生遠處轉移患者到底如何準確界定其更適合手術還是非手術， 本研究試圖通過檢測癌組織和附帶檢測癌旁正常組織腫瘤標志物， 希望發現一些有價值的差異。在Ki67方面， 癌組織中和癌旁正常組織的差異比較大， 反映了癌組織中和癌旁正常組織細胞增殖狀態生物學行為上的差異， 所以， 正常組織如果Ki67水平升高， 或許術后放療、化療有價值。而對檢測腫瘤組織和瘤旁TS和CerbB-2結果的分析統計， 則未發現采取同時檢測的應用價值。

綜上所述， Ki67水平越高， 腫瘤組織生長越活躍， 術后更容易出現復發轉移。對Ki67高表達及合并淋巴結轉移患者應該給予更積極的輔助放化療。TS、CerbB-2水平對個體化治療指導和預后判斷沒有明確意義。

參考文獻

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[2] 任金山， 吳紅芳 Ki67與食管鱗癌放療敏感性的相關研究. 中國現代藥物應用， 2011， 5（8）：37-38 .

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[5] 葛紅， 樊青霞. Caspase-3在食管鱗癌術前放療前后的表達及與放療后病理反應的關系的研究. 臨床醫學， 2007， 27（10）：79-81.

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[7] 卓麗娟. 胸苷酸合酶與5-氟尿嘧啶耐藥的關系. 福建醫科大學學報， 2002， 36（2）：230-231.

[收稿日期：2018-08-10]