氟脲苷聯合化療治療晚期非小細胞肺癌對患者血清中miR-328、miR-499、HE4、CEA和POTEE水平的影響分析

謝 娟，景孌戀

（湖北省漢川市人民醫院腫瘤科，湖北 漢川432300）

肺癌是全球癌癥相關死亡的主要原因，非小細胞肺癌（non-small cell lung cancer，NSCLC）占所有肺癌病例的近85%［1］。臨床研究表明，氟脲苷對幾種實體瘤具有抗腫瘤作用，包括乳腺癌、結腸直腸癌、胃癌、非小細胞肺癌和胰腺癌［2］。QIU等［3］發現成熟miR-499序列中的rs3746444T／C多態性可能通過調節癌癥相關基因的表達而導致預后不良。ZHANG等［4］發現miR-328在肺癌患者血清中呈現高表達的狀態。耿紀群等［5］通過meta分析發現高血清HE4水平是肺癌患者預后不良的標志，尤其是在亞洲肺癌患者中。CEA（serum carcinoembryonic antigen）在晚期非小細胞肺癌血清中表達異常［6］。WANG等［7］發現NSCLC患者血清POTEE水平與TNM分期有關，是潛在的預后因素?；诖?，本研究選取2017年2月至2018年2月我院收治的晚期非小細胞肺癌患者33例采用氟脲苷聯合化療治療，旨在探究氟脲苷聯合化療治療晚期非小細胞肺癌對患者血清中miR-328、miR-499、HE4、CEA和POTEE水平的影響。

材料和方法

1 一般資料

選取2017年2月至2018年2月我院收治的晚期非小細胞肺癌患者66例為研究對象，其中，男性36例，女性30例；年齡27到69歲，平均年齡46.2±7.5歲。腫瘤TNM分期Ⅲ期患者25例，Ⅳ期患者41例。其中鱗癌34例，腺癌32例。所有患者均經病理科和影像學診斷為晚期非小細胞肺癌。所有患者基本資料差異無統計學意義（P＞0.05）。本研究經過本院倫理委員會批準，且所有患者均簽署知情同意書。

排除標準：①同時患有其他器官癌癥的患者。②對本研究所用藥物過敏的患者。③本研究前接受過藥物或手術治療的患者。④同時患有精神疾病的患者。

2 分組

將患者隨機分為對照組和治療組，每組各33例。對照組中男14例，女19例；年齡32～69歲，平均51.2±3.4歲；其中鱗癌13例，腺癌20例；治療組中男22例，女11例；年齡27～61歲，平均41.0±3.7歲；其中鱗癌21例，腺癌12例。兩組人員在年齡、家族史、性別、身高體重、組織學類別等差異無統計學意義，具有可比性。

制度性章程一旦建立，政府只負責執行合作章程、維持市場秩序等問題的處理，轉型為市場服務，具體市場實務一般不需過問[8]?！包S金周”長假對旅游企業的沖擊僅是旅游業面臨的眾多不穩定因素之一，為保障旅游企業在遇到沖擊時能有效運營，成本支出的增加得到控制，需要建立企業協調合作機制。旅游企業間、行業間的合作及協調此時變為主體，提高企業競爭力、共享資源、降低交易費用、降低成本、聯合開發客源市場和旅游精品等是旅游企業間開展合作的目標性動因。企業協調機制包括不同發展策略下的企業間和企業內外部協調方式。

3 藥物和治療方法

所有患者在第1和第8天均給予注射用鹽酸吉西他濱（江蘇豪森藥業集團有限公司生產，規格：1.0g）1000mg／m2，1次／d。此外，所有患者在第1天至第5天靜脈滴注順鉑（江蘇豪森藥業集團有限公司生產，規格：6mL：20mg×5瓶）75mg／m2，1次／d。治療組在此基礎上，在第1天至第5天靜脈滴注氟脲苷（廣東嶺南制藥有限公司生產，規格：0.25g）1500mg／m2，1次／d。兩組均連續治療21 d?；熎陂g給予止嘔及其他對癥處理。

完全緩解（CR）：患者病灶消失；部分緩解（PR）：患者病灶消失 ＞30%；穩定（SD）：患者病灶介于緩解與惡化之間；進展（PD）：病灶進展＞20%，或已轉移?？陀^緩解率（ORR）＝（CR＋PR）／總例數。疾病控制率（CBR）＝（CR＋PR＋SD）／總例數。

4 臨床療效評價

水泥：通常用于GRC中的水泥主要有快硬硫鋁酸鹽水泥、低堿度硫鋁酸鹽水泥、普通硅酸鹽水泥、白色硅酸鹽水泥。泰科石采用的是阿爾博波特蘭水泥，其強度及白度都比普通水泥高。

5 觀察指標

治療前，對照組與治療組血清中miR-328、miR-499、HE4、CEA和POTEE的水平差異無統計學意義（P＞0.05）。治療后，對照組與治療組血清中miR-328、HE4、CEA和POTEE的水平明顯下降，而miR-499的水平明顯上升；同組治療前后比較差異有統計學意義（P＜0.05）。經不同治療后，治療組血清中miR-328、HE4、CEA和POTEE的水平較對照組下降的更顯著，而miR-499的水平上的更升顯著，兩組組間比較差異有統計學意義（P＜0.05）。見表3。

對兩組患者共66例進行不良反應評價，均無死亡病例產生。33例對照組和33例治療組均未出現肌酐升高、脫發、耳毒性和周圍神經毒性的不良反應。相比于對照組，治療組出現的白細胞減少、血小板降低、惡心和嘔吐均明顯減少，且差異具有統計學意義（P＜0.05）；而兩組出現的貧血、肝功ALT／AST升高、血尿和蛋白尿差異無統計學意義（P＞0.05）。見表4。

5.3 Karnofsky（KPS）評分 采用KPS評分對66例我院收治的晚期非小細胞肺癌患者進行功能狀態的評分，總分為100分，分數越低，表示患者健康狀態越差。

統計學軟件為PRISM 7.0，兩組患者的miR-328、miR-499、HE4、CEA和POTEE指標比較采用t檢驗，用表示。臨床治療效果比較選用 χ2檢驗。

6 統計學處理

5.4 不良反應評價 不良反應評價應用Common Terminology Criteria for Adverse Events（CTCAE v.4.03）［8］進行等級評估，分為5個等級，1級（輕度），2級（中度），3級（嚴重），4級（危機生命），5級（死亡）。記錄兩組每周的血常規，血生化肝腎功等情況，并對癥處理。

結 果

1 兩組臨床療效比較

青年教師是學校發展的后備力量，青年教師的專業發展決定著學校的可持續發展，這已經引起了學校的足夠重視，具體表現在為青年教師搭建了一系列的平臺和舞臺，比如師徒結對、課例打磨、校本教研、外出學習等.然而，這一切都是基于外部力量的青年教師的被動成長，缺少青年教師對自己專業成長路徑的自主規劃和系統梳理，本文在具體實踐的基礎上，試圖從初中青年數學教師的視角，借助“教科研+”的主要陣地，自主開展專業論文寫作為切入點，簡單談幾點體會，不當之處，敬請指正.

表1 兩組臨床療效比較

2 兩組KPS評分比較

治療后，對照組和治療組的Karnofsky（KPS）評分均顯著提升，同組治療前后比較差異有統計學意義（P＜0.05）。對照組和治療組的Karnofsky（KPS）評分在治療前比較無統計學意義（P＞0.05），但兩組經不同治療后，治療組的Karnofsky（KPS）評分明顯高于對照組，兩組組間比較差異有統計學意義（P＜0.05）。見表2。

表2 兩組KPS評分比較（）

注：與對照組比較，☆P＜0.05；與治療前比較，*P＜0.05

KPS評分治療前 治療后對照組 33 53.89±7.16 70.13±10.47*治療組 33 54.03±7.33 83.27±12.28組別 n／例☆*

3 兩組血清中miR-328、miR-499、HE4、CEA和POTEE的水平比較

5.1 血清中miR-328和miR-499的水平 采取66例我院收治的晚期非小細胞肺癌患者治療前后的外周血3mL。所有實驗在在取樣后兩小時內開始。miR-328和miR-499的SYBR Green miRNA熒光定量PCR試劑盒購自HaiGene公司（貨號：AP01476，AP01564）。miRNA快速提取試劑盒購自HaiGene公司（貨號：B1802）。miRNA反轉錄試劑盒購自HaiGene公司（貨號：D1801）。使用miRNA快速提取試劑盒抽取外周血的miRNA。使用miRNA反轉錄試劑盒將純化好的總miRNA進行反轉錄。再使用miR-328和miR-499 SYBR Green miRNA熒光定量PCR試劑盒在ABI7500儀器上進行qPCR反應，實驗重復3次。

表3 兩組血清中miR-328、miR-499、HE4、CEA和POTEE的水平比較（）

表3 兩組血清中miR-328、miR-499、HE4、CEA和POTEE的水平比較（）

注：與對照組比較，☆P＜0.05；與治療前比較，*P＜0.05

組別 觀察時間 miR-328 miR-499 HE4（pmol／L） CEA（ng／mL） POTEE（pg／mL）對照組 治療前 3.16±0.42 0.36±0.08 217.21±21.26 5.41±0.35 327.21±47.18治療后 1.85±0.36* 0.87±0.12* 124.27±13.77* 3.17±0.16* 211.37±22.84*治療組 治療前 3.20±0.49 0.37±0.07 220.85±24.15 5.33±0.42 339.71±58.27治療后 1.32±0.31*☆ 1.09±0.15*☆ 55.23±9.35*☆ 2.84±0.31*☆ 163.95±29.61*☆

4 不良反應評價

5.2 血清中HE4、CEA和POTEE的水平 采取66例我院收治的晚期非小細胞肺癌患者治療前后的外周血3mL，行酶聯免疫吸附試驗（enzymelinked immunosorbent assay，ELISA）。HE4的ELISA試劑盒購自廈門研科生物技術有限公司（貨號：XWCEK1908）。CEA的ELISA試劑盒購自帝肯（上海）貿易有限公司（貨號：RE59101）。POTEE的ELISA試劑盒購自北京華夏遠洋科技有限公司（貨號：E3654h）。按照試劑盒說明書，大致方法如下：使用前讓所有試劑恒溫到室溫，使用前輕輕混合所有液體試劑。向孔中加入50～100μL制備的標準品和樣品。蓋板并在室溫下孵育2 h。從孔中徹底吸出或傾倒溶液并丟棄液體。使用噴射洗瓶或自動96孔板洗滌器洗滌孔4次。向孔中加入100μL稀釋的檢測抗體。蓋板并在室溫下孵育1 h。從孔中徹底吸出或傾倒溶液并丟棄液體。洗滌4次。向每個孔中加入100μL稀釋的HRP綴合物。蓋上蓋板并在室溫下孵育30 min。從孔中徹底吸出或傾倒溶液并丟棄液體。洗滌4次。每孔加入100μL生色底物。在室溫下在黑暗中顯影30min。每孔加入100μL終止液?？字械娜芤簯獜乃{色變為黃色。必須在停止反應后30min內評估該板。讀取每個孔在450nm和550nm處的吸光度。從450nm值減去550nm值以校正微孔板中的光學缺陷。使用曲線擬合統計軟件繪制符合標準的四參數邏輯曲線，然后計算測試樣品的結果。

對照組完全緩解7例，部分緩解9例，穩定8例，客觀緩解率為48.48%，疾病控制率為72.73%；治療組完全緩解9例，部分緩解15例，穩定4例，客觀緩解率為72.73%，疾病控制率為84.85%，兩組客觀緩解率和疾病控制率比較差異有統計學意義（P＜0.05），見表1。

表4 兩組方案毒副反應比較（n）

討 論

肺癌被認為是全球癌癥導致死亡的主要原因之一［9］。肺癌的分類基于組織學特征，主要分為兩種亞型：非小細胞肺癌（NSCLC），其占85%的肺癌病例，以及小細胞肺癌（SCLC）；且NSCLC的5年生存率低于15%［10］。氟尿苷是一種細胞生長抑制劑，通過嘧啶核苷磷酸化酶生物轉化為5-氟尿嘧啶，能夠抑制腫瘤細胞增殖和遷徙［11］?；诖?，本文旨在探究氟脲苷聯合化療治療晚期非小細胞肺癌對患者血清NSCLC相關生化因子水平的影響。本研究中，氟脲苷聯合化療治療治療后，對照組和治療組的KPS評分均顯著提升（P＜0.05），且治療組的客觀緩解率、疾病控制率和KPS評分均大于對照組（P＜0.05），治療組的不良反應顯著降低（P＜0.05）。氟脲苷聯合化療治療晚期非小細胞肺癌的客觀緩解率率和疾病控制率分別為72.73%和84.85%。相比于單一的使用鹽酸吉西他濱進行化療治療晚期非小細胞肺癌，氟尿苷聯合鹽酸吉西他濱治療晚期非小細胞肺癌具有較好的療效。因此，其為臨床治療晚期非小細胞肺癌提供了方案選擇。

本文研制的是一種無機泡沫吸波材料，是利用碎玻璃或火山灰等為主要原材料，在其中添加電磁損耗物質，熔融發泡而成的一種隱身材料，如圖7所示。

ZHANG等［4］發現miR-328在肺癌患者血清中呈現高表達的狀態，而miR-499呈現低表達的狀態。最近，一系列流行病學研究評估了成熟miR-499中rs3746444T／C多態性與各種人類疾病風險和預后之間的關聯［12-14］。本研究中，治療后，對照組與治療組血清中miR-328的水平明顯下降（P＜0.05），而miR-499的水平明顯上升（P＜0.05）。經不同治療后，治療組血清中miR-328水平較對照組下降的更顯著，而miR-499的水平上升更顯著（P＜0.05）。ANDO等［15］在評估中認為小鼠miR-499對腫瘤生長有抑制作用，提示了miR-499表達的異常下降是腫瘤發生發展的一個重要因素，暗示了miR-499可作為潛在的分子標志物和臨床療效指標。盡管發現miR-328在肺癌患者血清中高表達，且經過治療后其表達水平明顯降低，但是許多研究發現miR-328能夠靶向不同的基因來促進腫瘤細胞的增殖和遷移［16］。然而，關于miR-328的機制研究未涉及到非小細胞肺癌，期待進一步研究。但是，這并不影響miR-328能作為潛在治療晚期非小細胞肺癌的臨床療效指標。

CEA是參與細胞黏附的糖蛋白，通常在胎兒發育期間產生，多項研究表明CEA能促進癌細胞轉移［17］。以前的研究報道了POTEE在腫瘤進展中起表觀遺傳調控作用［18］。在裸鼠中HE4過表達促進了腫瘤生長［19］。因此，HE4、CEA和POTEE均為促腫瘤因子。本研究發現，經過治療后，對照組與治療組血清中HE4、CEA和POTEE的水平明顯下降（P＜0.05）。并且，氟脲苷聯合化療治療晚期非小細胞肺癌后患者血清中HE4、CEA和POTEE的水平下降地更明顯（P＜0.05）?；颊哐逯械腍E4、CEA和POTEE生化因子的降低進一步證明了氟脲苷聯合化療治療晚期非小細胞肺癌具有較好的療效，與前面KPS評分、客觀緩解率和疾病控制率的臨床指標相符。提示HE4、CEA和POTEE均可作為潛在的治療晚期非小細胞肺癌的臨床療效指標。根據不良反應評價，相比于對照組，治療組出現的白細胞減少、血小板降低、惡心和嘔吐均明顯減少，且差異具有統計學意義（P＜0.05）。提示氟脲苷聯合化療治療方案耐受性好，安全性高。但因本組例數相對較少，因此需進一步加大樣本量獲得更可靠的臨床證據。

爸爸依然篤定地一步步向前走去，好像沒有什么東西會讓他回頭……可是當他走到拐彎處，就在他側身拐彎的剎那，好像不經意似的悄悄回過頭來，很快地瞟了弟弟他們一眼，然后才消失在拐彎處。

綜上所述，氟脲苷聯合化療具有較好的臨床療效，能夠顯著降低miR-328、HE4、CEA和POTEE的水平，提升miR-499的水平，其耐受性好、安全性高，具有一定的臨床推廣應用價值。