益腎補氣強身茶對慢性疲勞綜合征小鼠內分泌功能的調節作用

童妍　李歡歡　羅丹　趙煥瑛　羅倫才

【摘 要】 目的：探討益腎補氣強身茶對慢性疲勞綜合征（CFS）小鼠內分泌功能的調節作用。方法：SPF級KM小鼠60只，雌雄各半，隨機分為6組：正常組、模型組、陽性組、益腎補氣強身茶高、中、低劑量組。除正常組外，各組每天上、下午各強制游泳2h，水溫（25±1）℃，水深20cm，各組每天灌胃給藥，連續7d，測定各組的血清三碘甲狀腺原氨酸（T3）、甲狀腺素（T4）、促甲狀腺素（TSH）、雌二醇（E2）、睪酮（T）、黃體生成素（LH）、卵泡刺激素（FSH）、孕酮（PG）、促腎上腺皮質激素（ACTH）、皮質酮（CORT）、醛固酮（ALD）、脫氫異雄酮（DHEA）的含量。結果：與模型組相比，益腎補氣強身茶小鼠血清中ACTH、ALD、 DEHA、CORT、FSH、LH、T4濃度降低，E2、T3濃度升高。結論：益腎補氣強身茶能改善CFS小鼠的內分泌功能。

【關鍵詞】 益腎補氣強身茶;慢性疲勞綜合征;神經內分泌

【中圖分類號】R285.5 【文獻標志碼】 A【文章編號】1007-8517（2020）23-0015-03

Regulatory Effect of Yishenbuqiqiangshen Tea on Endocrine Function in Mice with Chronic Fatigue Syndrome

TONG Yan1 LI Huanhuan1 LUO Dan1 ZHAO Huanying1 LUO Luncai2*

1.College of Life Science and Engineering， Southwest Jiaotong University， Chengdu 610031， China;

2.The Second Peoples Hospital of Liangshan Yi Autonomous Prefecture， Xichang 615000， China

Abstract：Objective To investigate the regulatory effect of Yishenbuqiqiangshen tea on the endocrine function of chronic fatigue syndrome mice. Methods Sixty SPF KM mice， half male and half female， were randomly divided into six groups： normal group， model group， positive group， high， medium and low dose group. In addition to control group， each group was forced to swim for 2 hours in the morning and afternoon， the water temperature was （25±1）℃， and the water depth was 20cm， Each group was administrated by gavage every day for 7 consecutive days. The contents of T3， T4， TSH， E2， T， LH， FSH， PG， ACTH， CORT， ALD and DHEA were measured. Results Compared with the model group， compared with the model group， the concentrations of ACTH， ALD， DEHA， CORT， FSH， LH， T4 in the serum of yishenbuqiqiangjian tea mice decreased， while the concentrations of E2 and T3 increased. Conclusion Yishenbuqiqiangshen tea can improve the endocrine function of mice with chronic fatigue syndrome.

Keywords：Yishenbuqiqiangshen Tea; Chronic Fatigue Syndrome; Neuroendocrine

隨著社會發展，亞健康問題日益突出，而慢性疲勞綜合征（Chronic Fatigue Syndrome，CFS）是亞健康狀態的最主要的表現形式，CFS的特征是慢性持續性疲勞，患者由于極度疲勞使其工作生活和身體健康受到嚴重影響。CFS與高壓力的生活狀態有關，隨著人們生活節奏的加快、生活壓力的增加，CFS的發病率也越來越高，對生活質量產生了嚴重的影響[1]。

后世醫家認為慢性疲勞綜合征當屬于虛勞、郁證等范疇。關于CFS的中醫學病機，大多數學者認為以虛為主，虛實夾雜，與五臟有著緊密聯系，其中脾腎兩臟在疲勞發病中起著重要的作用，慢性疲勞綜合征的根本病機是脾腎虧虛，故其根本治法是補益脾腎。益腎補氣強身茶是涼山彝族自治州第二人民醫院的院內制劑，集調理預防和治療于一體，具有安養五臟、補益脾腎、潤燥通便、降脂通脈功能。方中肉蓯蓉補腎陽、益精血、潤腸通便，黃精補氣養陰、健脾、潤肺、益腎，黃芪補氣養血，用于臟腑功能減退，調節失衡所致的虛煩失眠、虛秘、食欲不振、倦怠無力、體質虛弱、反復感冒、高脂血癥等常見病、多發病，效果顯著。本實驗以CFS小鼠為對象，探究益腎補氣強身茶對CFS小鼠內分泌功能的調節作用，為益腎補氣強身茶的臨床應用和產品開發提供實驗依據。

1 材料與方法

1.1 藥物與試劑 益腎補氣強身茶，涼山彝族自治州第二人民醫院，川藥制字Z20080266;生脈飲，云南白藥集團股份有限公司，國藥準字Z20044150。Mouse? ACTH ELISA KIT，貨號：xl-Em0004;Mouse ALD ELISA KIT，貨號：xlEm0007;Mouse CORT ELISA KIT，貨號：xlEm0551;Mouse DHEA ELISA KIT，貨號：xlEm1041;Mouse E2 ELISA KIT，貨號：xlEm0478;Mouse FSH ELISA KIT，貨號：xlEm0427;Mouse LH ELISA KIT，貨號：xlEm1065;Mouse PROG ELISA KIT，貨號：xlEm0477;Mouse T ELISA KIT，貨號：xlEm0476;Mouse T3 ELISA KIT，貨號：xlEm0468;Mouse T4 ELISA KIT;Mouse TSH ELISA KIT，貨號：xlEm0472;以上試劑盒規格：96孔/盒，abcam生產，鑫樂生物進口分裝。

1.2 動物 昆明種小鼠，雌雄各半，60只，體重為18～22g，購于簡陽達碩動物科技有限公司，合格證號：SCXK（川）2013-24。

1.3 儀器酶標儀，型號，Multlskan? Mk3，賽默飛世爾儀器有限公司生產。

1.4 分組與造模 SPF級昆明種小鼠60只，隨機分為6組：正常組、模型組、陽性組、益腎補氣強身茶高、中、低劑量組，每組10只。各組每天上、下午各強制游泳2h，水溫（25±1）℃，水深20cm，連續7d，同時各組每天灌胃給藥，陽性組生脈飲口服液10mL/kg，益腎補氣強身茶高、中、低劑量組（5.08g/kg、2.54g/kg、1.27g/kg），正常組和模型組給予等體積蒸餾水，連續灌胃7d。

1.5 指標檢測 采用生物素雙抗體夾心酶聯免疫吸附法測定ACTH、CORT、E2、FSH、PROG、T，采用競爭法檢測ALD、DHEA、LH、T3、T4、TSH。

1.6 統計學方法 采用SPSS13.0統計軟件進行處理，實驗數據均以（x±s）表示，先用方差分析，再用q檢驗進行兩兩比較，P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 益腎補氣強身茶對下丘腦-垂體-腎上腺軸的影響 與正常組相比，模型組ACTH、ALD、DHEA含量升高，差異具有統計學意義（P<0.05）。與模型組相比，高劑量組小鼠血清中ACTH、ALD、DHEA濃度降低，具有統計學意義（P<0.05），可見通過益腎補氣強身茶的治療之后，小鼠腎上腺激素水平有所改善。 見表1。

2.2 益腎補氣強身茶對下丘腦-垂體-性腺軸的影響 與正常組相比，模型組血清FSH、LH水平上升，而E2水平下降，小鼠出現下丘腦-垂體-性腺軸紊亂情況，在服用益腎補氣強身茶之后，與模型組相比，高劑量組小鼠血清中FSH、LH濃度降低，E2水平上升。E2的含量與FSH、LH含量負相關。 見表2。

2.3 益腎補氣強身茶對下丘腦-垂體-甲狀腺軸的影響 與正常組相比，模型組小鼠血清T3濃度明顯降低，T4濃度明顯升高，兩組數據均具有非常顯著的統計學意義（P<0.01）。與模型組相比，高劑量組小鼠血清中T3濃度升高，T4濃度明顯降低，具有統計學意義（P<0.05）。 見表3。

3 討論

慢性疲勞是亞健康主要表現形式之一，建立CFS動物模型是研究CFS的基礎[2]。強制游泳法是目前CFS單因素造模的主要方法之一，通過長時間游泳，造成軀體疲勞為主的動物模型?，F代醫學認為，長期的慢性應激是導致或誘發慢性疲勞的重要因素。該方法它既模擬了中醫有關疲勞的發病過程，也符合西醫所認為的由慢性應激導致疲勞的理論[3]。

目前對本病發病機制并不清楚，神經內分泌免疫系統的功能紊亂被認為是CFS的主要發病機理之一[4]，CFS患者除表現為慢性疲勞外，常伴隨有記憶力下降、注意力難以集中、睡眠障礙、頭痛、抑郁、焦慮等精神神經癥狀，說明中樞神經系統與內分泌系統的異常在的發生中扮演著重要的角色。神經系統和內分泌系統是相互協調、相互制約的兩大調節系統，具有調節機體生命活動的功能。有研究者通過對患者的神經內分泌系統進行綜合分析，發現 CFS 患者整體下丘腦-垂體-腎上腺皮質軸和下丘腦-垂體-甲狀腺軸以及各種調節機體代謝的激素水平失調共同導致機體處于一種低代謝狀態，這與患者疲勞的狀態密切相關[1，5-6]。甲狀腺是人體內最大的分泌腺，它分泌的甲狀腺激素T3、T4有促進生長發育過程等重要生理作用。T3中80%是由T4經過脫碘作用轉變而來，這種脫碘過程是在5-脫碘酶作用下完成，當腎臟受到損傷時，5-脫碘酶活性會下降，導致T3含量下降，T4含量上升[7]，有研究表明補腎中藥可促進T4轉化為T3 [8]。腎藏精，《素問》中“腎者主蟄，封藏之本，精之處也?！敝改I與生殖系統功能息息相關，在現代研究中，腎與下丘腦-垂體-靶腺軸腺靶激素水平息息相關，補腎藥通過補腎，從而正相調節內分泌功能，腎精不足主要是下丘腦-垂體-性腺軸產生病理生理學改變，導致內分泌紊亂[9]。

本次實驗結果，CFS模型小鼠ACTH、ALD含量升高，出現下丘腦-垂體-腎上腺功能亢進現象。使用益腎補氣強身茶治療后，治療組小鼠ACTH、ALD、DHEA水平下降，可緩解腎上腺功能亢進，改善小鼠HPA軸功能。血清甲狀腺激素含量較治療前，T3水平有所上升，T4水平有所下降，可能是因為益腎補氣強身茶修復腎臟損傷，促進T4轉化為T3，維持了血中TSH、T3、T4的動態平衡，對下丘腦-垂體-甲狀腺軸系統起到穩定和保護作用。血中TSH治療前后變化不大，可能是益腎補氣強身茶直接作用于腎臟，改善了T3、T4的分泌，而未作用于TSH受體，對TSH的分泌影響不大。CFS模型小鼠內分泌紊亂，導致E2含量下降，通過正反饋使FSH、LH含量升高，E2是雌激素中最主要活性最強的激素，是性腺功能啟動的標志，E2、FSH、LH含量的變化是腎虛證的有效指標，這一結果說明腎虛會導致內分泌紊亂。益腎補氣強身茶組E2水平有所升高，FSH、LH水平有所下降，出現E2抑制FSH、LH的現象，這可能是因為益腎補氣強身茶通過提高E2水平，抑制了FSH、LH的分泌，從而調整小鼠的內分泌功能、緩解小鼠卵巢衰老。

綜上，益腎補氣強身茶能調節神經內分泌系統，增強下丘腦-垂體系統功能，治療慢性疲勞綜合征可能是通過改善應激引起的下丘腦-垂體系統內分泌紊亂，調節失調的激素水平。

參考文獻

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（收稿日期：2020-06-16 編輯：程鵬飛）

基金項目：涼山州科技局應用技術研究開發項目（16YYJS0008）。

作者簡介：童妍（1976-），女，漢族，博士，講師，研究方向為中藥藥理。E-mail：tongyanmail@126.com

通信作者：羅倫才（1964-），男，漢族，本科，主任中藥師，研究方向為民族藥物的開發研究及臨床應用。E-mail：1040710596@qq.com