HPLC法測定養陰潤肺糖漿中梓醇的含量

何鳳蘭　鄭曉陽　馮麗萍　黃文鋒

【摘 要】 目的：建立HPLC法測定養陰潤肺糖漿中梓醇的含量。方法：用高效液相色譜法Diamonsil? TM-C18（4.6mm×150mm，0.5μm）色譜柱，以乙腈-0.1%磷酸溶液（1∶99）為流動相，檢測波長為210nm。結果：梓醇的線性范圍為2～18μg·mL-1（r=0.9996）;平均回收率為 99.4%（n=6），RSD=0.6%。結論：該方法專屬性強，快速、方便，分離度好，無其他成分干擾，適合于養陰潤肺糖漿中梓醇的含量測定，值得推廣應用。

【關鍵詞】 HPLC;養陰潤肺糖漿;梓醇

【中圖分類號】R284.2 【文獻標志碼】 A【文章編號】1007-8517（2020）23-0021-03

Determination of Catalpol in Yangyin Runfei Syrup by HPLC

HE Fenglan1 ZHENG Xiaoyang1 FENG Liping1 HUANG Wenfeng2

1.Department of Pharmacy， Yangjiang Peoples Hospital of Guangdong， Yangjiang 529500， China;

2.Guangdong Yangjiang Testing and Inspection Center， Yangjiang 529500， China

Abstract：Objective To establish an HPLC method for the determination of catalpol in Yangyin Runfei Syrup.Methods A Diamonsil TM-C18 （4.6mm×150mm，0.5μm） chromatographic column was used for high performance liquid chromatography with acetonitrile-0.1% phosphoric acid solution （1∶99） as the mobile phase. The detection wavelength was 210nm.Results The linear range of catalpol was 2～18μg·mL-1 （r=0.9996）; the average recovery was 99.4% （n=6） and RSD=0.6%. Conclusion This method has strong specificity， fast， convenient， good resolution and no interference from other components. It is suitable for the determination of catalpol in Yangyin Runfei Syrup， and it is worthy of popularization and application.

Keywords：HPLC;Yangyin Runfei;Syrup Catalol

養陰潤肺糖漿是我院自擬處方中成藥制劑，由地黃、麥冬、玄參、川貝母、白芍、牡丹皮等8味藥材組成[1]，深得廣大患者的認可，銷量較大。養陰潤肺糖漿主治陰虛肺熱引起的咳嗽、咽干、喉痛聲啞、痰中帶血等癥，療效顯著。但其自擬標準中還沒有含量測定項目，地黃在該處方中屬君藥，針對地黃的有效成份是梓醇進行檢測，以控制其內在有效成分，同時將其作為養陰潤肺糖漿的質量控制指標，保證產品質量，提高療效，故增加含量測定項目。本實驗采用HPLC法，能有效分離養陰潤肺糖漿中地黃的主要成分梓醇[2]，很好地控制產品質量。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 SHIMADZU—LC20A型高效液相色譜儀（日本島津，UV檢測器）;FA135S型電子分析天平（上海精密儀器儀表有限公司）;KQ-3200DV型數控超聲波清洗器（昆山超聲儀器有限公司）及各種玻璃儀器[3]。

1.2 試藥 梓醇對照品（批號：110808-200508，中國藥品生物制品檢定所）;供試品：養陰潤肺糖漿（批號：180327，180417，180424），缺地黃的養陰潤肺糖漿（批號：180314，陽江市人民醫院）;乙腈（色譜純）、磷酸（分析純）。

2 方法與結果

2.1 色譜條件與系統適用性試驗 梓醇照高效液相色譜法[4]（通則0512）[5]色譜條件與系統適用性試驗。色譜柱：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，TM-C18（4.6mm×150mm，0.5μm），流動相：乙腈-0.1%磷酸溶液（1∶99）;流速：1.0mL/min;檢測波長：210nm;柱溫：25℃。進樣量10μL，流速1mL·min-1。結果在上述色譜條件下，理論塔板數按梓醇峰計算不低于5000，梓醇分離良好，陰性無干擾，如圖1～3所示。

取供試品溶液10μL，注入高效液相色譜儀中，檢測，記錄供試品色譜圖，結果測得梓醇峰理論塔板數為5230，分離度為2.431，拖尾因子為1.03，符合規定。

2.2 對照溶液的制備 精密稱取干燥至恒重的梓醇對照品10.0mg，加流動相定容至50mL，搖勻，得0.2mg/mL的梓醇對照品溶液;精密量取上述溶液0.5mL，置10mL量瓶中，加流動相至刻度，搖勻，即得濃度為10μg/mL的梓醇對照品溶液。

2.3 供試品溶液的制備 精密量取養陰潤肺糖漿2.0mL，加流動相定容至50mL，搖勻，濾過，取續濾液，即得供試品溶液。

2.4 陰性對照液的制備 本院的投料處方去掉地黃，制法： 按照本院投料處方與工藝，制成缺地黃的養陰潤肺陰性對照糖漿1000mL（批號：180314，陽江市人民醫院），再按“2.3供試品溶液的制備”方法制備缺地黃的陰性對照溶液，注入高效液相色譜儀中，測定，結果陰性糖漿在梓醇峰相應保留時間位置沒有干擾，如圖3所示。

2.5 線性關系考察 精密吸取上述制得的0.2mg/mL的梓醇對照品溶液1、3、5、7、9mL分別置100mL容量瓶中，加流動相至刻度，搖勻，即得2μg/mL、6μg/mL、10μg/mL、14μg/mL、18μg/mL的標準液。分別吸取10μL，注入高效液相色譜儀中，測量峰面積A。以對照品溶液濃度C為橫坐標（X），峰面積A為縱坐標（Y）[6]，繪制標準曲線：Y=5815.5X-3439.1，r=0.9996。結果梓醇在2～18μg范圍內具有良好的線性關系。

2.6 精密度試驗 精密量取對照品溶液10μL，連續進樣6次，測定梓醇的峰面積A，結果平均峰面積為13616.3，RSD=0.14%，結果表明精密度良好。

2.7 重復性試驗 取同一批號（180327，含量為0.2765mg/mL）的養陰潤肺糖漿6份，按“2.3供試品溶液的制備”方法制備供試品溶液，注入高效液相色譜儀中，測定，結果RSD為0.5%，表明本方法重現性良好。

2.8 穩定性試驗 取同一養陰潤肺糖漿（批號：180327）供試品溶液，分別于供試品溶液制備后的0、2、4、6、8h進行測定，結果RSD=0.05%，表明供試品溶液在制備后8h內穩定。

2.9 準確度（加樣回收率）試驗 取已知含量的養陰潤肺糖漿（批號：180327、0.2765mg/mL）各6份，置50mL量瓶中，再分別加入梓醇對照品適量，用流動相稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續濾液，即得加樣回收供試品溶液。吸取供試品溶液各10μL，分別注入高效液相色譜儀中，計算回收率，結果平均回收率為99.4%（n=6），RSD=0.6%，表明本法準確度良好，見表1。

2.10 含量測定 取3批養陰潤肺糖漿，分別按“2.3 供試品溶液的制備”方法制備供試品溶液，吸取供試品溶液各10μL，分別注入高效液相色譜儀中，測定并計算含量，結果見表2。

3 討論

由于梓醇性質的影響，檢測波長選擇210nm;梓醇的吸收峰較大且干擾小，效果較好，故選擇210nm波長。

文獻報道[7]梓醇 HPLC 圖譜中梓醇色譜峰形不太好，與相鄰峰的分離度不高，對實驗結果的準確性易造成影響。本實驗通過實驗進行了合理調整，確定實驗的流動相條件以乙腈-0.1%磷酸溶液（1∶99）為流動相。由于供試品雜質峰比較多，可在供試品制備過程中，先加10mL甲醇，過微孔濾膜（0.45μm），揮干，再加流動相溶解并定容至50mL，供試品雜質濃度降低，達到更理想的分離效果。

本方法快速、方便，分離度好，無其他成分干擾，適合于養陰潤肺糖漿中梓醇的含量測定。

參考文獻

[1]陳華國，陳慶，周欣，等.HPLC測定養陰清肺膏中梓醇含量[J].中國中醫藥現代遠程教育雜志，2007，5（9）：36.

[2]李云，孫利偉，趙小順，等.不同品種地黃干莖中梓醇含量比較[J]. 臨床醫藥實踐雜志， 2009，18（8）：1931-1933.

[3]國家藥典委員會.中國藥典（一部）[M]. 北京：化學工業出版社，2015：125.

[4]國家藥典委員會.中國藥典（四部）[M]. 北京：化學工業出版社，2015：59.

[5]莫慧貞，許則省.對芒果止咳片中馬來酸氯苯那敏的含量測定[J].今日藥學雜志，2009，19（4）：40-41.

[6]羅燕燕，張紹青，索建政，等.高效液相色譜法測定地黃中梓醇的含量[J]. 中國藥學雜志，1994，29（1）：38-40.

（收稿日期：2020-07-02 編輯：程鵬飛）

作者簡介：何鳳蘭（1969-），女，漢族，?？?，主管藥師，研究方向為藥品質量控制。E-mail：he2013lan@126.com