Wnt信號通路在狼瘡性腎炎發病過程中的作用

許昊 周靜 雷尚文 王銘浩 張凱 王研 梁劉娜 周淑紅

【摘 要】目的：觀察分析Wnt信號通路在狼瘡性腎炎發病過程中的作用。方法：選取本院（在2018年2月-2019年2月）搜集的39例狼瘡性腎炎患者一般資料（均經皮腎臟實施穿刺手術，作為實驗組），再搜集同期我院收治的38例腎癌患者癌旁正常組織的一般資料（作為對照組）。采用統計學分析兩組研究對象腎臟β一catenin mRNA水平（應用實時定量聚合酶鏈式反應檢測方法）、β一catenin蛋白水平（應用Western印跡法加以檢測）。結果：實驗組狼瘡性腎炎患者的腎臟β一catenin mRNA水平、β一catenin蛋白水平顯著高于對照組（P<0.05）。結論：Wnt信號通路可能參與狼瘡性腎炎的發病過程。

【關鍵詞】Wnt信號通路;狼瘡性腎炎;發病過程;作用

【中圖分類號】R593.242【文獻標識碼】B【文章編號】1002-8714（2020）01-0157-02

系統性紅斑狼瘡的臨床表現多樣且病情嚴重程度不一，調查研究顯示，系統性紅斑狼瘡好發于女性人群[1]。系統性紅斑狼瘡的發病機制較為復雜，會產生大量針對自身抗原的抗體，繼而使得組織器官受損。狼瘡性腎炎是系統性紅斑狼瘡累及腎臟組織的腎炎疾病，少數系統性紅斑狼瘡患者以腎臟受累為首發表現。狼瘡性腎炎是導致系統性紅斑狼瘡患者死亡的主要因素。狼瘡性腎炎的臨床表現較為復雜，主要表現在：其一，蛋白尿;其二，血尿;其三，高血壓等。目前來看，雖然深入了解系統性紅斑狼瘡疾病的具體發生機制，但是對于狼瘡性腎炎的進展具體分子機制尚未深入了解。Wnt基因是癌基因，參與胚胎發育以及腫瘤發生的過程，除此之外，Wnt信號在腎臟疾病的發生和發展過程中也起著重大作用。有學者認為，正常機體腎臟的Wnt信號是沉默的，但是腎臟損傷后Wnt信號被激活[2]。Wnt/β一catenin是重要細胞信號的轉導通路，Wnt糖蛋白與Fz蛋白受體有機結合后會在細胞表面聚集，繼而激活β一catenin聚集。最新研究結果顯示，Wnt/β一catenin通路可參與狼瘡性腎炎的發病過程。

1 資料與方法

1.1一般資料

實驗組有30例女患者、9例男患者;平均年齡為（55.3±4.8）歲;病理分型：8例III型、10例IV型、21例V型。對照組中有29例女患者、10例男患者;平均年齡為（57.7±3.4）歲。

1.2方法

應用實時定量聚合酶鏈式反應檢測方法檢測β一catenin mRNA水平，收集細胞，漂洗PBS（磷酸鹽緩沖液），離心，將蛋白質樣品加入凝膠緩沖液中混合均勻，煮沸，再將梳齒插入濃縮膠中，靜置0.5h，備用;在電泳槽內加入緩沖液，用微量加樣器制備好蛋白樣品;將β一catenin抗體稀釋為1：3000，使用β一catenin灰度值表示相對表達水平。

應用Western印跡法加以檢測β一catenin蛋白水平，將各組細胞加入裂解液中，混勻后，室溫下靜置5分鐘;將樣品分成有機相、水相，將水相轉移到新管中進行下一步操作;加入無水乙醇，將溶液與沉淀物轉入吸附柱中;將RNA反轉錄成cDNA，嚴格按照cDNA說明書加以操作。

1.3觀察指標

分析兩組研究對象腎臟β一catenin mRNA水平、β一catenin蛋白水平。

2 結果

實驗組狼瘡性腎炎患者的腎臟β一catenin mRNA水平、β一catenin蛋白水平顯著高于對照組（P<0.05），見表1。

3 討論

有關研究顯示，Wnt信號通路可分為兩種類型：其一，經典信號通路（Wnt/β一catenin）;其二，非經典信號通路[3]。β一catenin信號處于中心位置之中，當Wnt信號通路被激活時，一些因素會使得殘基被糖原合成激酶磷酸化-3β活性被抑制，殘基被糖原合成激酶磷酸化-3β無法使得β一catenin降解。當細胞內的β一catenin數量達到一定程度時間會與TCF（T細胞因子）/LEF（淋巴細胞增強因子）結合，繼而使得某些特定基因表現出增強或減弱。Wnt信號通路在腎臟胚胎組織發育初期產生重大作用，可積極參與腎小管的發育中。多項研究資料顯示，Wnt信號通路參與腎囊腫的形成之中。β一catenin活化在腎細胞癌的有關研究中受到一定程度抑制，因此表明Wnt/β一catenin在腎臟疾病中出現異常表達情況，但是在狼瘡性腎炎患者的發病過程中卻未見諸多報道。本文研究結果顯示實驗組狼瘡性腎炎患者的腎臟β一catenin mRNA水平、β一catenin蛋白水平顯著高于對照組（P<0.05）。有關學者在狼瘡性腎炎患者的發病過程中表明，某種因素激活Wnt信號通路，使得細胞外基質可發生重建，在多次的修復與重建過程中，狼瘡性腎炎的形態學將發生變化。一項動物研究試驗表明，Wnt信號通路將參與狼瘡性腎炎大鼠的發病過程，大鼠的系膜細胞基質增生是其最為明顯變化。Wnt信號通路升高后會誘導MMP（基質金屬蛋白酶）表達，Wnt信號通路在細胞外基質的重建過程中以及狼瘡性腎炎患者的發病過程中產生一定作用。在狼瘡性腎炎的有關模型研究中，Wnt信號通路被激活，將激活下游基質金屬蛋白酶基因。

綜上所述，Wnt信號通路可能參與狼瘡性腎炎的發病過程。

參考文獻

[1] 孫鐵霖，李里，宮亮等.Wnt信號通路在狼瘡性腎炎發病過程中的作用[J].中國老年學雜志，2018，38（20）：4967-4969.

[2] 楊琳琳，程閏夏，林云等.Wnt信號通路在腎小球疾病發生發展中的作用機制研究進展[J].山東醫藥，2017，57（39）：107-110.

[3] 王銘浩，周淑紅，許昊等.WNT信號通路在狼瘡腎炎中的異常表達[J].養生保健指南，2019，12（6）：357.