雙氯芬酸鈉透皮控釋制劑的研究

（中山大學藥學院，廣東 廣州，510006）

雙氯芬酸鈉（Diclofenac sodium，DCS）是一種臨床常用的非甾體類抗炎藥物，主要作用為抑制花生四烯酸環氧化酶、白三烯以及緩激肽等物質的生成，用于鎮痛及抗炎的治療。目前該藥臨床上使用十分廣泛，主要用于痛經、偏頭痛或者機械損傷后的鎮痛及消炎，還對于關節炎等的疼痛和發熱具有一定的治療效果。將雙氯芬酸鈉制成透皮吸收的緩控釋制劑，可以獲得更加穩定的血藥濃度，提高患者的依從性，更好的發揮其藥效。本實驗應用新型技，使用脂質體-醇質體制做雙氯芬酸鈉制成透皮吸收的緩控釋制劑，經實驗證明，透皮吸收的效果好，控釋作用顯著，相對生物利用度高，現報道如下。

1 對象和方法

1.1 研究方法

1.1.1 制備

使用超聲法與乙醇注入法相結合改良成一種新制備方法，并采用該法制備醇脂質體。醇脂質體處方組成為乙醇、卵磷脂、雙氯芬酸鈉及水。具體操作方法是：稱取處方量的卵磷脂于玻璃瓶中，加乙醇攪拌溶解，雙氯芬酸鈉用雙蒸水溶解并使混合均一。嚴密封合注射器與玻璃瓶，在能夠加入乙醇的同時避免乙醇蒸發。藥物全部溶解之后，再把卵磷脂乙醇溶液加入其中，流速控制在200μl/min，超聲5分鐘，用0.45μm過濾器過濾，制成雙氯芬酸鈉醇脂質體混懸液。

分別取取含量不同的乙醇、磷脂、選擇超聲以及磷脂加入量的柔性輔料泊洛沙姆，其余處方及制備工藝完全相同，分別制成醇脂質體，測定包封率。在單因素分析的基礎上，固定其他輔料的用量，采用正交試驗的設計及方差分析考察對包封率及粒徑分布影響較大的幾種因素，A(乙醇濃度),B(磷脂濃度),C(超聲時間),D（柔性輔料的用量），采用方法分析和直觀分析法對實驗結果進行分析。

1.2 觀察指標

1.2.1 包封率測定

采用超速離心法測定醇脂質體的包封率。按下式計算包封率：

1.2.2 透皮率和體外釋藥性測定

采用漿法測定釋放度，樣品經0.45μm微孔濾膜過濾后測定吸光度。

1.2.3 生物相容性測定

生物利用度的研究方法采用血藥濃度法對相對生物利用度進行評價。計算公式如下：

1.3 統計學分析

本次研究數據采用SPSS16.0軟件進行統計分析，使用用t檢驗計量資料，并且用卡方檢驗計數資料，差異是否具有統計學意義由p＜0.05判定。

2 結果

2.1 制備工藝中各指標對雙氯芬酸鈉包封率影響

實驗結果顯示，四個影響因素對透皮控釋貼劑的綜合影響效果為B＞A＞C＞D，根據評分，得最佳處方為：A3B2C2D1。

表1 正交試驗因素與水平Tab 1 Orthogonal experimental factors and levels

2.2 透皮率和體外釋藥性測定結果

貼劑的初黏力隨著檸檬酸三乙酯的濃度增加而增加，而持黏力則隨著檸檬酸三乙酯的濃度的增加而下降，琥珀酸對黏持力影響不明顯。以黏持力為指標，最優的處方組成為：雙氯芬酸鈉醇脂質體溶液含量10%、丙烯酸樹脂Ⅳ號0.4g，檸檬酸三乙酯0.25g，琥珀酸0.052g，氮酮含量5%。

表2 體外釋放度測定測定結果Table 2 Determination of in vitro release results

2.3 生物相容性結果

計算得出雙氯芬酸鈉透皮控釋貼劑的相對生物利用度為167.20%，說明采用本研究優化后工藝制備的雙氯芬酸鈉透皮控釋貼劑具有較高的生物利用度。

圖1 雙氯芬酸鈉血藥濃度標準曲線Figure 1 standard diclofenac plasma concentration curve

3 討論

由于受人體表皮皮層屏障作用的限制，所以又很多藥物不適宜制成透皮吸收的制劑[1]，其中水溶性和大分子的藥物透皮吸收的吸收率最低[2]。脂質體由于結構比較特殊，所以比較容易透過表皮層，用脂質體包裹藥物，可以增加藥物的透皮效率[3]，因此，用脂質體制備透皮吸收的制劑成為目前研究的熱點，越來越多的研究者在脂質體透皮吸收制劑的研究中取得長足進展[4]，在這一方面，增加脂質體的透皮吸收作用通常是工作的重心[5]。近年來，一種新型的柔性脂質體引起人們的關注，柔性脂質體具有脂質體樣囊泡結構、能增加透皮作用，而且來源廣泛[5]，主要以大豆卵磷脂作為膜材制備，其流動性和變形性良好，十分有利于通過表皮屏障[6]。所以柔性脂質體對透皮吸收制劑的研究開發將起到很大的促進作用，具有良好的研究價值及應用前景[6]。

含醇的脂質體流動性及變形性強，能顯著促進藥物透過表皮屏障，增加藥物在皮膚中的蓄積，并有較高的包封率[8]，是一個高效、長效的透皮載體，毒性小，安全性高。一項針對醇脂質體穩定性的研究結果顯示[9]，醇脂質體的粒徑分布、平均粒徑以及結構兩年內無明顯變化[10]。醇脂質體處方組成為乙醇、卵磷脂、雙氯芬酸鈉及水，用乙醇濃度、磷脂濃度、超聲時間及柔性輔料的用量為因素，試驗的結果表明，四個影響因素對透皮控釋貼劑的綜合影響效果為B＞A＞C＞D，根據評分，得最佳處方為：A3B2C2D1。用正交實驗法進一步篩選優化制備雙氯芬酸鈉醇脂質體的處方，確定最佳處方為乙醇濃度45%，磷脂濃度為1.0g/100ml，超聲時間為10min，柔性輔料的用量為6%。使用優化后工藝制備的雙氯芬酸鈉透皮控釋貼劑平均包封率為93.26%，平均粒徑為76.53nm。