復合益生菌制劑對小白鼠生長性能、免疫及抗氧化能力的影響

李敬芳，鄭文香

（廊坊衛生職業學院，河北廊坊 065000）

隨著我國養殖業的發展，動物養殖數量逐年增多，已經形成了集約化、規?；酿B殖模式，在養殖過程中為了更好防治相關的疾病，濫用抗菌藥物，導致許多耐藥細菌出現，降低了抗菌藥物的治療效果，同時也造成肉、蛋、奶等多種畜產品中的藥物殘留，危害著人們健康，成為了公共的衛生問題（張召興，2017；易曉菲，2016）。因此，研發代替抗菌藥物使用的新型添加劑成為了新的研究方向。復合益生菌制劑是由多種類的益生菌經過多種特殊工藝制成的一種活菌制劑，該制劑具有促進動物生長發育、調整腸道內菌群平衡、提高免疫機能等多種優點，被廣泛應用于畜禽養殖中（仲偉光等，2018；胡興義等，2017；劉政，2017）。相關研究表明，益生菌可以替代抗菌藥物使用，具有廣闊的應用前景（李世傳等，2016）。本試驗旨在研究復合益生菌制劑對小白鼠生長性能、 免疫及抗氧化能力的影響，為復合益生菌制劑在臨床進一步的應用奠定基礎。

1 材料與方法

1.1 試驗菌株 復合益生菌制劑主要包括乳酸桿菌、乳雙歧桿、酵母菌，其中乳酸桿菌、乳雙歧桿的活菌數為 9.0×109cfu/g、 酵母菌的活菌數為4.5×109cfu/g，由本試驗制備的干燥固體制劑。

1.2 主要試劑與儀器 免疫球蛋白IgG、IgM、I-gA ELISA Kit 試 劑 盒 、 細 胞 因 子 IL-2、IL-6 ELISA Kit 試劑盒均購于 Elabscience 公司；總抗氧化能力（T-AOC）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）均購于北京中控生物技術有限公司；高速小型離心機均有德國Eppendorf 公司生產；全波長酶標儀由北京凱奧科技發展有限公司生產；常規的試劑及儀器由本實驗室提供。

1.3 試驗設計 采用單因素設計試驗，選擇體質量為（20±2.2）g 健康昆明系小白鼠 120 只（北京維通利華實驗動物中心），隨機分成4 組，每組3 個重復，每個重復5 只，1組為空白對照組飼喂基礎日糧，試驗2、3、4 組分別在基礎日糧中添加0.5%、1.0%、1.5%的復合益生菌制劑，試驗期為56 d。按照常規的飼養方式對試驗小白鼠進行飼養與管理，每個重復組單獨飼養，自由采食和飲水。

1.4 試驗飼糧配比 參考秦哲（2017）的方法配制試驗小白鼠的基礎飼糧，其組成及營養水平見表1。

表1 飼糧組成及營養水平（干物質基礎） %

1.5 指標測定及方法

1.5.1 生長性能測定 在試驗期間斷料12 h，對每個試驗組小白鼠逐個稱重，記錄試驗開始與結束的體重及耗料量。測定平均日增重、平均日采食量、料重比。

1.5.2 免疫及抗氧化能力檢測 在試驗后1、25、56 d，斷料12 h，每個組隨機抽取5 只小白鼠摘眼球取血，離心分離血清。按照說明書測定血清中免疫球蛋 IgG、IgM、IgA 及細胞因子 IL-2、IL-6 的含量，按說明書檢測 T-SOD、GSH-Px、T-AOC 等抗氧化能力指標。

1.6 試驗數據分析 試驗數據用 “平均值±標準差”表示，采用統計學分析軟件SPSS 18.0 對試驗結果進行單因素方差分析，以P ＜0.05 表示差異顯著性。

2 結果

2.1 復合益生菌制劑對小白鼠生長性能的影響由表2 可知，試驗3、4 組小白鼠平均日增重顯著高于 1組 （P ＜ 0.05），與 1組相比分別提高36.9%、30.43%；試驗2 組平均日增重高于1組，差異性不顯著 （P＞0.05），試驗 2、3、4 組之間相比，差異性不顯著（P＞0.05）；試驗 2、3、4 組平均采食量均高于1組，差異性不顯著 （P＞0.05）；試驗 3、4 組料重比顯著低于 1組（P ＜ 0.05），與 1組相比分別降低17.0%、15.6%；試驗2 組低于1組，差異性不顯著 （P＞0.05）；3 個試驗組之間相比，差異性不顯著（P＞0.05）。

表2 復合益生菌制劑對小白鼠生長性能的檢測結果

2.2 復合益生菌制劑對小白鼠免疫指標的影響由表3 可知，在試驗后 1 d，試驗 2、3、4 組血清中IgG 含量均高于 1組，差異性不顯著（P＞0.05）；在試驗后 28、56 d，試驗 3、4 組血清中 IgG 含量均顯著高于 1組 （P ＜ 0.05），與 1組相比分別提高20.3%、20.3%、13.9%、12.8%；試驗 2 組高于 1組，差異性不顯著 （P＞0.05），3 個試驗組之間相比，差異性不顯著（P＞0.05）。在試驗后 1 d，試驗 2、3、4 組血清中 IgA 含量均高于 1組，差異性不顯著（P＞0.05）；在試驗后 28、56 d，試驗 3、4 組血清中 IgA 含量均顯著高于 1組（P ＜ 0.05），與 1組相比分別提高18.0%、16.5%、15.8%、14.4%；試驗2 組高于 1組，差異性不顯著 （P＞0.05），3 個試驗組之間相比，差異性不顯著（P＞0.05）；在試驗后 1、28、56 d，試驗 2、3、4 組血清中 IgM 含量均高于 1組，差異性不顯著（P＞0.05）。

表3 復合益生菌制劑對小白鼠血清中免疫球蛋白含量的檢測結果 ng/mL

由表4 可知，在試驗后 1 d，試驗 2、3、4 組血清中IL-2 含量均高于1組，差異性不顯著 （P >0.05）；在試驗后 28、56 d，試驗 3、4 組血清中 IL-2含量均顯著高于 1組（P ＜ 0.05），與 1組相比分別提高 29.4%、27.5%、18.6%、18.1%；試驗 2 組高于1組，差異性不顯著（P > 0.05），3 個試驗組之間相比，差異性不顯著（P > 0.05）；在試驗后 1、28、56 d，試驗 2、3、4 組血清中 IL-6 含量均高于 1組，差異性不顯著（P > 0.05）。

表4 復合益生菌制劑對小白鼠血清中細胞因子含量的檢測結果 ng/mL

2.3 復合益生菌制劑對小白鼠抗氧化能力的影響 由表5 可知，在試驗后 1 d，試驗 2、3、4 組血清中T-SOD 活性均高于1組，差異性不顯著（P >0.05）；在試驗后 28、56 d，試驗 3、4 組血清中 TSOD 活性均顯著高于 1組（P ＜ 0.05），與 1組相比分別提高 7.8%、7.6%、9.1%、8.9%；試驗 2 組高于 1組，差異性不顯著（P > 0.05），試驗 2、3、4 組之間相比，差異性不顯著（P > 0.05）；在試驗后1、28、56 d，試驗 2、3、4 組血清中 T-AOC、GSH-Px含量均高于1組，差異性不顯著（P > 0.05）。

表5 復合益生菌制劑對小白鼠清中抗氧化能力指標的檢測結果

3 討論

3.1 復合益生菌制劑對小白鼠生長性能的影響相關研究表明, 益生菌富含多種營養物質及消化酶類，可促進飼料在動物體內的消化吸收，提高動物的生長性能。王杰等（2016）報道了復合益生菌制劑可以顯著提高仔豬生長性能。申紅春（2018）報道，復合微生物制劑可以提高肉牛的生長性能。本試驗研究表明，試驗3、4 組小白鼠平均日增重顯著高于 1組 （P ＜ 0.05），料重比顯著低于 1組（P ＜ 0.05），試驗 2、3、4 組平均采食量均高于 1組，差異性不顯著 （P > 0.05），說明了復合益生菌制劑可以提高小白鼠的平均日增重、 平均日采食量、降低料肉比，以1.5%添加為適宜。復合益生菌制劑的添加可以促進小白鼠調節腸道菌群平衡，抑制有害菌的生長，促進消化道內消化酶的分泌，提高飼料在體內的利用率，從而提高小白鼠的生產性能。

3.2 復合益生菌制劑對小白鼠免疫指標的影響免疫球蛋白主要包括IgG、IgM、IgA，其主要的功能為介導體液免疫，其含量變化是評價免疫機能的重要指標之一，IgG、IgA 在抗感染免疫中起著重要作用，IgM 是機體免疫中出現最早的抗體，具有殺菌功能（張召興，2017；胡興義，2017；易曉菲，2016）。IL-2 是介導細胞免疫主要細胞因子，可以刺激機體T 淋巴細胞增殖，在免疫過程中具有重要作用（宋麗霞，2011）。細胞因子 IL-6 是免疫系統中重要的細胞因子，主要參與機體的體液免疫和細胞免疫，促進B 細胞分化、增殖和再次產生免疫應答（宋巴達瑪，2010）。本試驗研究表明，在試驗后 28、56 d，試驗 3、4 組血清中 IgG、IgA、IL-2 含量均顯著高于 1組（P ＜ 0.05），在試驗期間，試驗 2、3、4 組血清中 IgM、IL-6 含量均高于 1組，差異性不顯著（P > 0.05），說明復合益生菌制劑可以誘導小白鼠產生體液免疫和細胞免疫應答，提高其免疫機能。與劉明生等（2018）、胡興義（2017）報道的一致。由于復合益生菌所含的有效活性物質可以刺激小白鼠免疫系統，誘導機體產生抗體與細胞因子，從而增強小白鼠的免疫機能。

3.3 復合益生菌制劑對小白鼠抗氧化能力的影響 機體在新陳代謝過程中會產生多種氧化自由基，這些氧化自由基可以導致細胞發生氧化應激性損傷，給動物機體造成嚴重損傷 （賈青輝等，2017；王傳龍等，2017）。動物體內所含 T-AOC、TSOD、CAT 和GSH-Px 等酶系統具有清除自由基的作用（張建斌等，2018；王傳龍等，2017）。本試驗研究表明，試驗后 28、56 d，試驗 3、4 組血清中 TSOD 活性均顯著高于 1組（P ＜ 0.05），在試驗后1、28、56 d，試驗 2、3、4 組血清中 T-AOC、GSH-Px含量均高于 1組，差異性不顯著（P > 0.05）。說明復合益生菌制劑可以提高小白鼠血清中T-SOD、T-AOC、GSH-Px 活性，因而提高抗氧化能力。與王傳龍等（2017）報道的酵母菌培養物可以提高蛋雞抗氧化性能一致。復合益生菌制劑所含酶類物質激活了體內的酶系統，提高了清除自由基的能力，因而提高其抗氧化能力。

4 結論

本試驗結果表明，日糧中添加1.0%復合益生菌制劑，可以提高小白鼠生長性能、免疫機能及抗氧化能力。