曹萍 趙娜 馮博洪
摘 要:目的:分析高效液相色譜法(HPLC)在食品中甲醛含量檢測中的應用。方法:從市場上隨機購買某品牌肉類零食,制備樣品溶液和標準溶液,采用HPLC法進行檢測,開展精密度和回收率試驗。結果:①在0~3.0 μg/mL范圍內,HPLC法檢測甲醛線性關系良好;②精密度試驗結果RSD值為0.008 4%<1,說明精密度較高;③加標回收率試驗結果均>90%,說明回收率良好。結論:HPLC法檢測食品中的甲醛含量具有較高的準確性,精密度和回收率良好,可推廣應用。
關鍵詞:食品;甲醛含量;HPLC法;精密度;回收率
甲醛是一種有機化學物,化學式是CH2O,會刺激人體的眼、鼻等部位,常作為化工原料使用[1]。甲醛具有良好的抑菌作用,一些不法商家將其用于食品加工進行防腐,人體攝入后會引起嘔吐、腹痛,嚴重者昏厥死亡,被WHO組織列入一類致癌物清單[2-3]。文章分析了HPLC法檢測食品中甲醛含量的應用效果,以期為食品安全管理工作提供支持。
1 材料和方法
1.1 材料
本研究材料是從市場上隨機購買的某品牌肉類零食。
1.2 儀器
使用儀器主要有HPLC儀、電子秤、恒溫水浴鍋,離心機、組織搗碎機與Welch XB-C18色譜柱等。使用的試劑有100 μg/mL的甲醛標準溶液,甲醇,乙腈,2,4-二硝基苯肼,純化水等。
1.3 制備樣品溶液
使用組織搗碎機將樣品磨碎,在電子秤上精準稱量2 g,將其放置在50 mL離心管中。向離心管內加入磷酸鹽緩沖溶液和2,4-二硝基苯肼-乙腈溶液(兩者比例為1∶1),震蕩離心管促使均勻混合。置于恒溫水浴鍋內,在60 ℃條件下反應60 min,結束后將其取出,自然冷卻至室溫。最后使用離心機進行離心處理,轉速為2 000 r/min,持續時間10 min,取上層清液在濾紙上過濾,上機檢測。
1.4 制備標準溶液
使用50 mL離心管,加入不同體積數的甲醛標準溶液,再加入磷酸鹽緩沖溶液和2,4-二硝基苯肼-乙腈溶液(兩者比例為1∶1)至20 mL,混合均勻后配置成濃度不同的標準溶液,分別是0、0.1、0.5、1.0、2.0 μg/mL與3.0 μg/mL。置于恒溫水浴鍋內,在60 ℃條件下反應60 min,結束后將其取出,自然冷卻至室溫。使用離心機進行離心處理,取上層清液在濾紙上過濾,上機檢測。
1.5 色譜條件
色譜柱是Welch XB-C18,5 μm×4.6 mm×250 mm,流動相是乙腈-水(體積比為7∶3),流速為0.6 mL/min。反應溫度為37 ℃,檢測波長設置為355 nm,進樣量為10 μL,采用等度洗脫。
2 結果與分析
2.1 線性回歸方程
繪制標準曲線,可見在0~3.0 μg/mL范圍內,具有良好的線性關系。以溶液濃度為x軸,以峰面積為y軸,計算回歸方程是:y=430 320x-2 325.6;相關系數r為0.999 6,經實驗測定,最低檢出限為0.08 mg/kg。
2.2 精密度
配置樣品溶液濃度為2.0 μg/mL,按照1.5的條件依次進樣重復3次,得到3個峰面積值,計算相對標準偏差(RSD),評價測定方法的精密度,見表1。結果顯示:3次進樣的峰面積均值為858 362.4,RSD值為0.008 4%<1,說明該測定方法的精密度較高。
2.3 回收率
在磨碎的組織樣品中,分別加入2、10、40 mL甲醛標準溶液,按照1.5的條件依次進樣,每個重復3次,計算加標回收率和RSD值,見表2。結果顯示:平均回收率在90.71%~94.40%,RSD值在0.98%~4.31%,說明回收率良好。
2.4 甲醛測定結果
采用HPLC法檢測9個食品樣本的甲醛含量,包括生鮮豬肉、熏肉、臘肉等,共檢出2個陽性樣本,含量分別是0.08 mg/kg和30.15 mg/kg。
3 結論
甲醛是一種致癌物質,用于食品加工會危害人體安全[3]。本研究采用HPLC法檢測食品中的甲醛含量,結果顯示最低檢出限是0.08 mg/kg,精密度和回收率良好,滿足檢測要求。
參考文獻
[1]李紅英,黃程,李麗霞,等.高效液相色譜法測定豆制品中的甲醛[J].食品安全質量檢測學報,2019,10(4):1071-1075.
[2]呂青骎,滕爽,陳周耀,等.高效液相色譜法檢測肉及肉制品中甲醛[J].食品安全質量檢測學報,2019,10(11):3298-3303.
[3]邵仕萍,相大鵬,李華斌,等.乙酰丙酮衍生化高效液相色譜-熒光檢測法測定食品中的甲醛[J].食品科學,2015,36(16):241-245.