顱內外動脈搭橋術聯合BMMNCs治療缺血性腦卒中療效觀察*

王 華，張小廣

1.河南大學第一附屬醫院神經內科，河南 開封 475000；

2.河南大學第一附屬醫院神經外科，河南 開封 475000

如今，隨著我國逐漸步入人口老齡化社會，人們的生活水平提高，使得腦梗死發病率顯著上升。腦梗死具有較高的致殘率、致死率，臨床上尚未出現明顯的治療手段，主要是通過手術、藥物治療方式改善患者病情［1-2］。目前，臨床上尚未找到能夠提高梗死區域腦神經細胞再生的方式，而干細胞作為神經細胞再生的理想細胞，骨髓單個核細胞（BMMNCs）又是神經干細胞的理想來源，因此國內外專家不斷的探討骨髓單個核細胞在神經細胞再生中的應用價值。在本次研究中，為了解BMMNCs在缺血性腦血管病患者中應用效果，對醫院收治的80例缺血性腦血管病患者展開分析，報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇于2016年1月—2018年1月間河南大學第一附屬醫院收治的缺血性腦血管病患者80例作為研究對象，將80例缺血性腦血管病患者隨機分為對照組和觀察組，每組各40例。

納入標準：（1）腦梗死發病時間范圍＜3周；（2）年齡范圍：18～70歲；（3）發病時頭顱MRI證實存在明顯的腦梗死病灶，面積＞2 cm2；（4）有神經功能障礙，NIHSS評分≥6分；（5）CTP顯示血管閉塞相關區域存在低灌注。

排除標準：（1）年齡＜18歲，年齡＞70歲；（2）存在多種內科疾病，不能耐受手術或有外科手術禁忌證患者；（3）妊娠期女性；（4）新發大面積腦梗死3周或腦梗死合并腦疝患者；（5）煙霧病腦出血3個月內；（6）既往存在血液系統病史，存在嚴重出血傾向；（7）患者及其家屬不同意本次研究。

對照組：男性22例、女性18例，年齡34～67歲，平均年齡（54.7±4.6）歲，病程3～12 d，平均病程（6.7±1.4）d；觀察組：男性病例數23例、女性病例數17例，年齡36～68歲，平均年齡（54.9±4.8）歲，病程4～14 d，平均病程（6.8±1.3）d。對比兩組患者的性別、年齡、病程等一般資料，差異無統計學意義（P＞0.05）。

1.2 方法

對照組開展顱內外血管搭橋手術+血清注射；觀察組開展顱內外血管搭橋手術+BMMNCs經搭橋血管注射。

顱內外血管搭橋手術方式：了解顳淺動脈走向，在外耳道上6 cm左右做骨窗，對大腦中動脈的M2或M3進行吻合，采取后期處理［3］。

制備BMMNCs：在無菌條件下，穿刺患者髂前上棘，抽取其骨髓60 ml，將其搖勻以后，骨穿針使用肝素沖管，使用無菌試管給予肝素抗凝。用Hanks平衡鹽溶液稀釋骨髓懸液1倍，1 500 r/min離心10 min，除去上層脂肪細胞，再用Hanks液稀釋骨髓懸液1倍［4］。取淋巴細胞分離液［密度（1.017±0.001）g/ml］放入空離心管中。將去脂肪的骨髓懸液沿試管壁緩緩加入，使骨髓懸液重疊于分離液上，骨髓懸液與分離液體積比例約為2∶1。以2 000 r/min低溫離心30 min，離心后管內容物分為3層，上層為血漿和血小板，中層為分離液，底層為紅細胞和多核細胞。在上中層液體界面處可見到乳白色渾濁的單個核細胞層，呈白膜狀，用毛細吸管輕輕插到白膜層，沿試管壁吸取單個核細胞，移入另一試管。加Hanks液清洗細胞，1 500 r/min離心10 min后棄上清液，再加Hanks液使細胞重懸，離心清洗3次［5］。加血清培養液把細胞制成懸液，計數，備用。顱內外血管搭橋及自體BMMNCs移植步驟：（1）取患側顳淺動脈分支與大腦中動脈皮層枝進行端側吻合；（2）吻合成功后，將顳淺動脈近心端臨時阻斷，在阻斷處以遠穿刺顳淺動脈，注射目標液體（實驗組注射含有BMMNCs的液體，對照組注射與其外觀相同的血清液），阻斷時間控制在10 min以內［6］。

1.3 觀察指標

在術前及術后3、6、12、24個月內對患者進行NIHSS評分，對比治療前后兩組患者腦梗死面積差值。另外兩組患者術后每個月均電話隨訪1次，確定是否出現明顯的不良事件。NIHSS評分標準：0～1分正?；蚪跽?；1～4分輕度卒中/小卒中；5～15分中度卒中；15～20分中度、重度卒中；21～42分重度卒中。

1.4 統計學方法

數據采用SPSS 23.0軟件進行統計分析，計量資料以均數±標準差（±s）表示，組間比較采用t檢驗；計數資料以例數和百分比（%）表示，組間比較采用χ2檢驗，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

術前，兩組患者NIHSS評分對比差異無統計學意義（P＞0.05）；術后3、6、12、24個月患者NIHSS評分與對照組比較差異有統計學意義（P＜0.05），見表1。

表1 兩組患者NIHSS評分對比（±s） 分

表1 兩組患者NIHSS評分對比（±s） 分

組別對照組（n=40）觀察組（n=40）tP術前16.55±1.49 16.59±1.20 0.132 0.895術后3個月15.30±1.25 13.07±0.87 9.261 0.000術后6個月12.47±1.12 9.20±0.98 13.897 0.000術后12個月10.75±1.43 8.53±0.57 9.121 0.000術后24個月9.43±1.75 6.86±0.40 9.055 0.000

治療前兩組腦梗死面積分別為：觀察組（1.59±0.23）cm2、對照組（1.60±0.26）cm2，對比并無統計學差異性（t=0.182，P＞0.05）；治療后，觀察組腦梗死面積為（0.78±0.05）cm2，明顯小于對照組的（1.05±0.12）cm2，組間數據對比（t=13.136，P＜0.05）。

隨訪12個月，觀察組出現2例不良事件，1例腦梗死再發生、1例癲癇，不良事件發生為5.00%。隨訪12個月，對照組患者中，出現8例不良事件，其中3例腦梗死、2例腫瘤形成、3例癲癇，不良反應發生率為20.00%，組間數據對比（χ2=4.1143，P＜0.05）。

3 討論

作為人口大國，我國如今已經步入老年化社會［7］。老年人群是腦血管疾病高發人群，其中腦卒中是僅次于心血管疾病、惡性腫瘤疾病導致患者死亡的疾病。缺血性腦卒中發生率往往要高于出血性腦卒中，很多患者會喪失生活自理能力或勞動能力。缺血性腦卒中會導致患者出現語言功能障礙、肢體運動障礙等，這些臨床表現往往會嚴重危害到患者的工作、身心健康［8-9］。臨床上不斷的在探索合適的治療方式以改善患者病情，恢復腦組織、血管病變情況。常見的藥物治療雖然能夠達到一定效果，但是對于恢復損傷細胞并無明顯優勢［10］。而BMMNCs作為一種有分化能力的細胞，大量存在于骨髓中，是干細胞較為理想的來源。干細胞是神經細胞再生的理想細胞，但是干細胞往往制作過程復雜，而且要求較為嚴格，如果進行體外培養會導致污染機率增加［11］。

相較于傳統的干細胞，BMMNCs能夠更容易提取、生物特性能夠最大程度保留。在國外的研究中，Helder Teixeira de Freitas將骨髓單個核細胞應用于35只皮質損傷后的大鼠，起到了促進神經細胞再生的效果，西班牙Francisco Moniche醫生等已經在進行BMMNCs治療腦梗死的臨床試驗，他們采用靜脈注射或微導管注射的方法將含有BMMNCs的液體注入患者體內，檢測其神經生長因子及神經功能恢復情況。相關研究均證實BMMNCs存在較高的安全性，而且不會對患者造成的較大的傷害［12］。

因此，在本文中，對觀察組患者在采取顱內外血管搭橋術治療的同時，給予BMMNCs治療，觀察組患者的NIHSS評分顯著低于對照組，而且觀察組患者治療后的梗死面積低于對照組，不良事件發生率小于對照組。

綜上所述，在顱內外動脈搭橋術治療的同時，采取BMMNCs治療，有助于改善患者神經功能缺損癥狀，減少不良事件發生率，提高治療效果，建議推廣。