野生藍果忍冬多酚鑒定及其抗氧化、降血糖活性

喬錦莉，張 妍,3，劉 佩，郭良川，霍俊偉,3,

（1.東北農業大學園藝園林學院，黑龍江 哈爾濱 150030；2.寒地小漿果開發利用國家地方聯合工程研究中心，黑龍江 哈爾濱 150030；3.東北農業大學 農業農村部東北地區園藝作物生物學與種質創制重點實驗室，黑龍江 哈爾濱 150030）

藍果忍冬（Lonicera caeruleaL.）是屬于忍冬科（Caprifoliaceae）忍冬屬的落葉灌木[1-2]，起源于亞洲東北部和中亞山區，在中國主要分布在東北、華北和西北地區[3]，其野生資源主要分布于大興安嶺、小興安嶺以及長白山等地[4]，小興安嶺地區分布的藍果忍冬野生資源遠離工業區，植物生長過程中受到污染的可能性更小，植物資源更加原生態，更為符合人們對健康食品的追求，具有很高的食用、經濟和研究價值[5]。

多酚是植物中重要的次生代謝物質和天然的強還原性物質，具有抗氧化、抗心血管疾病、抗糖尿病等生物活性[6]。藍果忍冬果實中含有豐富的多酚類物質，已被發現在抗氧化和抗糖尿病等方面具有生物活性。在抗氧化方面，Rop等[7]對不同的藍果忍冬栽培品種進行實驗，測定其抗氧化活性，篩選出抗氧化活性較高的藍果忍冬栽培品種。藍果忍冬所含的多酚物質能夠抑制或者減緩自由基的生成，阻止氧化反應的發生，使自由基能夠維持相對平衡的狀態，保護機體免受損傷；在抗糖尿病方面，多酚通過控制淀粉由α-淀粉酶水解為麥芽糊精和麥芽糖、由α-葡萄糖苷酶水解為葡萄糖的速率，即抑制α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶的活性[8]，可以有效地調控糖尿病人餐后血糖水平（主要針對II型糖尿?。9]。實驗發現藍果忍冬所含的生物活性物質可以降低血糖、減少肝臟損傷[10]。藍果忍冬野生資源豐富，了解藍果忍冬野生資源的生物活性成分，分析其抗氧化與抗糖尿病方面的生物活性，有利于填補這方面研究的空白，并為培育高藥食功效的藍果忍冬提供參考和理論基礎。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

藍果忍冬果實產自小興安嶺地區，隨機選取3 株藍果忍冬植株上完全成熟的果實，于－20 ℃冰箱中保存，用于后續實驗。

甲醇、鹽酸、乙酸乙酯、乙腈、甲酸、醋酸銨（均為色譜級） 加拿大Simark公司；氯化鉀、乙酸鈉 國藥集團化學試劑有限公司；1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl，DPPH）、2,2'-聯氨-雙(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)（2,2'-azinobis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid)，ABTS）、熒光素、2,2'-偶氮二(2-甲基丙脒)二鹽酸鹽、水溶性VE（Trolox）、六水合氯化鐵（FeCl3·6H2O）、七水合硫酸亞鐵（FeSO4·7H2O）、2,4,6-三(2-吡啶基)三嗪、沒食子酸（gallic acid，GA）（純度≥98%）、福林-酚試劑北京博奧拓達科技有限公司；α-淀粉酶（10 U/mg）、α-葡萄糖苷酶（10 U/mg）、脂肪酶（30 U/mg）、玉米淀粉、阿卡波糖 美國Sigma公司；矢車菊素-3-葡萄糖苷（cyanidin-3-glucoside，C3G）（純度≥99%） 上海安普實驗科技股份有限公司。

1.2 儀器與設備

EPOCH 2型酶標儀 美國Bio-Teck公司；ExionLC型液相色譜質譜聯用儀 美國AB SCIEX公司；Luna C18分析色譜柱 美國Phenomenex公司；C18Sep-Pak固相萃取柱 美國Waters公司；LC-20 AD型高效液相色譜（high performance liquid chromatography，HPLC）儀 日本島津公司；H1750R型凍干機 北京亞太科隆公司；TGL-16型離心機 湖南湘儀動力測試儀器有限公司；HZQ-211C型搖床 上海一恒科學儀器有限公司；AMP-12型固相萃取儀 上海安普實驗科技股份有限公司。

1.3 方法

1.3.1 野生藍果忍冬多酚的提取和分離純化

將采集的藍果忍冬果實真空冷凍干燥后研磨成粉末，過60 目篩后在－20 ℃冰箱中保存。取15 g果實粉末加入100 mL體積分數80%甲醇溶液，室溫條件下搖床振蕩24 h（200 r/min），4 ℃條件下5 000 r/min離心10 min，所得上清液為多酚粗提液。

藍果忍冬多酚粗提液通過固相萃取技術分離純化，參照Kim等[11]的方法將多酚粗提液分離為多糖、非花色苷多酚和花色苷多酚3 個組分。依次加入甲醇溶液（10 mL）和HCl溶液（15 mL 0.01 mol/L）平衡固相萃取柱之后，依次加入15 mL 0.01 mol/L的HCl溶液獲得多糖，40 mL純乙酸乙酯獲得非花色苷多酚，60 mL酸性甲醇溶液（體積分數0.1%HCl的甲醇溶液）得到花色苷多酚。收集洗脫液，35 ℃旋轉蒸發濃縮，將濃縮液過有機膜（0.22 μm），于－20 ℃冰箱中保存備用。取10 μL濃縮液于EP管中，40 ℃烘干12 h，按公式（1）分別計算濃縮液中3 個組分的質量濃度/（mg/mL）。

式中：m為EP管與烘干后的樣品質量/mg；m’為EP管的質量/mg；V為加入的樣品體積（10 μL）。

1.3.2 野生藍果忍冬總酚含量測定

總酚含量測定參照Waterhouse[12]的方法，利用酶標儀在765 nm波長處測定多酚粗提液的吸光度，以沒食子酸標準溶液在765 nm波長處的吸光度繪制標準曲線，標準曲線方程為y＝5.381 5x+0.000 3，R2＝0.992 7，y表示多酚粗提液的吸光度，x表示總酚含量/（mg/100 g），總酚含量以每100 g干質量樣品所含沒食子酸的質量表示，單位mg/100 g。

1.3.3 野生藍果忍冬多酚成分鑒定

將1.3.1節獲得的藍果忍冬多酚粗提液稀釋為質量濃度1 mg/mL的溶液，過0.22 μm有機膜，去除雜質。利用HPLC-三重四極桿-離子阱串聯質譜法對多酚成分進行鑒定[13]，對于花色苷多酚和非花色苷多酚檢測，HPLC儀檢測器均為二極管陣列檢測器，色譜柱均為Luna C18柱（250 mm×46 mm，5 μm）。

花色苷多酚檢測HPLC條件：二元流動相：A相為5%（體積分數，下同）乙腈-1%甲酸，B相為乙腈；梯度洗脫程序：0～20 min，100% A；20～25 min，80% A；25～20 min，60% A；30～35 min，100% B。流速0.6 mL/min、柱溫25 ℃、檢測波長520 nm、進樣量10 μL。

非花色苷多酚檢測HPLC條件：三元流動相：A相為5 mmol/L醋酸銨溶液，B相為20% A（溶劑為純乙腈），C相為60 mmol/L甲酸溶液；梯度洗脫程序：0～12.5 min，14% B和86% C；12.5～17.5 min，16.5% B和83.5% C；17.5～40 min，25% B和75% C；40～60 min，100% A。流速0.6 mL/min、柱溫25 ℃、檢測波長280 nm、進樣量10 μL。

花色苷和非花色苷多酚檢測的質譜條件：電噴霧離子源；花色苷多酚采用正離子模式檢測，非花色苷多酚采用負離子模式檢測；全離子掃描，掃描范圍100～1 000m/z；毛細管電壓4 500 V；碰撞氣體N2；干燥氣體溫度550 ℃；流速0.6 mL/min；霧化氣壓3.0 Bar。

1.3.4 野生藍果忍冬總花色苷含量測定

藍果忍冬果實總花色苷含量測定參照Petrova等[14]的方法，將花色苷多酚濃縮液與氯化鉀緩沖液（pH 1.0）、乙酸鈉緩沖液（pH 4.5）混合，利用酶標儀分別在520 nm和700 nm波長處測定吸光度。以每100 g樣品所含C3G質量表示總花色苷含量。按照公式（2）、（3）分別計算藍果忍冬總花色苷吸光度、總花色苷含量。

式中：Mω為C3G的摩爾質量（449.2 g/mol）；DF為稀釋倍數；V為提取液總體積/mL；ε為摩爾吸光系數（26 900 L/（mol·cm））；m為樣品質量/g；L為光程（1 cm）。

1.3.5 抗氧化活性測定

DPPH自由基清除率的測定參照Brand-Williams等[15]的方法并適當修改，DPPH溶液與樣品混合處理后，利用酶標儀在517 nm波長處測定其吸光度，以不加樣品的體積分數80%甲醇溶液為對照。按照公式（4）計算DPPH自由基清除率，并以DPPH自由基清除率為縱坐標，以Trolox的濃度（100～800 μmol/L）為橫坐標繪制標準曲線：y＝0.160 8x－10.928 0，R2＝0.996 9。

式中：A1為樣品吸光度；A0為對照吸光度。

ABTS陽離子自由基清除率的測定參照Fellegrini等[16]的方法并適當修改，將ABTS工作液與樣品混合后在734 nm波長處測定其吸光度，以不加樣品的體積分數80%甲醇溶液為對照。按照公式（5）計算ABTS陽離子自由基清除率，并以ABTS陽離子自由基清除率為縱坐標，以Trolox的濃度（50～500 μmol/L）為橫坐標繪制標準曲線：y＝0.718 0x+0.667 6，R2＝0.999 4。

式中：A1為樣品吸光度；A0為對照吸光度。

鐵離子還原能力（ferric reducing antioxidant power，FRAP）的測定參照Benzie等[17]的方法，將樣品與FRAP工作液混合后，在30 min時于593 nm波長處測定其吸光度，以不加樣品的體積分數80%甲醇溶液為對照。按照公式（6）計算FRAP，并以FRAP為縱坐標，以FeSO4·7H2O的濃度（100～1 000 μmol/L）為橫坐標繪制標準曲線：y＝0.000 3x+0.018 6，R2＝0.992 2。

式中：A1為樣品吸光度；A0為對照吸光度。

氧自由基吸收能力（oxygen radical absorbance capacity，ORAC）的測定參照Huang Dejian等[18]的方法、在激發波長465～505 nm、發射波長505～555 nm、溫度37 ℃、時間2 h條件下測定其熒光值。按照公式（7）計算熒光衰退曲線下面積（area under curve，AUC），按照公式（8）計算ORAC，并以ORAC為縱坐標，以Trolox的濃度（10～200 μmol/L）為橫坐標繪制標準曲線：y＝0.024 9x+24.717 0，R2＝0.994 6。

式中：f1、f2…fn為兩小時內第n分鐘時的熒光值；AUC0為空白熒光衰退曲線下面積；AUC1為樣品熒光衰退曲線下面積；AUC2為Trolox熒光衰退曲線下面積；ρ0為樣品的質量濃度/（g/L）；c1為Trolox的濃度/（μmol/L）。

1.3.6 抗淀粉酶、抗脂肪酶活性測定

參照Zhang Yan等[19]的方法測定藍果忍冬果實多酚粗提液（濃縮后粗提物在粗提液中的質量濃度為8.13 mg/mL，后續實驗需對其進行稀釋）對淀粉酶（α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶）的抑制活性，以阿卡波糖為對照（不添加多酚粗提液），在660 nm波長處測定樣品的吸光度，每2 min讀取一次，持續2 h，獲得多酚粗提液對α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶的抑制活性的動力學曲線，抑制活性結果以半抑制質量濃度（half-inhibitory concentration，IC50）表示。按照公式（9）計算AUC，按照公式（10）計算抑制率，并以抑制率為縱坐標，樣品質量濃度為橫坐標繪制曲線，計算IC50值。

式中：f1、f2…fn為測定的各時間點的吸光度；AUC1為樣品的抑制曲線下面積；AUC0為對照的抑制曲線下面積。

對脂肪酶的抑制活性測定：參照Zhang Yan等[20]的方法，在410 nm波長處測定樣品的吸光度，每1 min讀取一次，持續1 h，獲得多酚粗提液對脂肪酶的抑制活性的動力學曲線，計算同公式（9）、（10）。

1.4 數據處理與分析

通過Peak View 2.0軟件對高效液相色譜質譜聯用的檢測結果進行鑒定分析，利用SPSS 20.0軟件以及Microsoft Excel軟件進行數據計算和分析，Origin 2019軟件作圖。

2 結果與分析

2.1 野生藍果忍冬果實中多酚成分

野生藍果忍冬果實中花色苷HPLC圖如圖1所示，藍果忍冬果實提取物中花色苷種類豐富，共檢測到8 種。根據圖2的花色苷一級和二級質譜圖、表1的保留時間和質譜數據并結合前人的研究結果分析，這些化合物為矢車菊素、天竺葵素、芍藥素和飛燕草素4 種花色素苷元，相連的糖殘基主要包括葡萄糖苷和蕓香糖苷2 種。根據文獻[21-23]和出峰順序進行推斷，藍果忍冬A1、A2、A3號峰具有相同的二級碎片離子（287m/z），即矢車菊素花色苷的特征離子，A1號峰碎片離子為m/z287、449，失去兩分子葡萄糖苷（162m/z），因此推斷A1號峰為矢車菊素-3,5-二葡萄糖苷。A2號峰分子離子為m/z595，碎片離子m/z287是分子離子失去一分子蕓香糖苷（308m/z）所得，因此A2號峰為矢車菊素-3-蕓香糖苷。同理，A3號峰碎片離子為失去一分子葡萄糖苷所得，A3號峰為C3G。根據文獻[21]進行推斷，m/z271是天竺葵素花色苷的特征離子，鑒定A4號峰為天竺葵素-3-葡萄糖苷。根據峰圖和文獻[21-23]進行推測，A5和A6號峰的碎片離子為m/z301，A5號峰為失去一分子蕓香糖苷，A6號峰為失去一分子葡萄糖苷，因此A5號峰為芍藥素-3-蕓香糖苷，A6號峰為芍藥素-3-葡萄糖苷。A7號峰分子離子為m/z466，碎片離子為m/z303是飛燕草色素花色苷的特征離子，推斷A7號峰為飛燕草素-3-葡萄糖苷，A8與A7號峰特征離子相同，是m/z611失去一分子蕓香糖苷所得，推斷A8號峰為飛燕草素-3-蕓香糖苷。其中保留時間為24.018 min的花色苷（A3號峰）含量最高，表明藍果忍冬果實中C3G的含量最高（占總花色苷含量的91.1%）。Chaovanalikit等[21]在藍果忍冬果實中檢測到了6 種花色苷，同樣發現在這些花色苷中，C3G的含量最高。

表1 野生藍果忍冬果實中花色苷多酚高效液相色譜-三重四極桿-離子阱串聯質譜鑒定結果Table 1 Liquid chromatography coupled to triple quadrupole ion trap mass spectrometric data and tentative identification of anthocyanins polyphenols from wild blue honeysuckle fruit

圖1 野生藍果忍冬果實中花色苷多酚高效液相色譜圖（520 nm）Fig.1 High performance liquid chromatogram of the anthocyanin polyphenols extracts from wild blue honeysuckle fruit detected at 520 nm

圖2 野生藍果忍冬果實中花色苷一級、二級質譜圖Fig.2 Primary and secondary mass spectra of anthocyanins in wild blue honeysuckle fruit

野生藍果忍冬果實中共檢測到20 種非花色苷多酚（圖3），根據表2的保留時間和質譜數據，對比非花色苷的一級和二級質譜圖、參考文獻[21,24-26]和出峰順序進行推斷，和花色苷的推測方法一致，P11、P13、P16號峰具有相同的碎片離子，m/z611是槲皮素的特征離子，蕓香糖苷、葡萄糖苷、鼠李糖苷的相對分子質量分別是308、162和146，因此推斷P11、P13和P16號峰分別是槲皮素-3-蕓香糖苷、槲皮素-3-葡萄糖-7-鼠李糖苷和槲皮素-3-葡萄糖苷。P10號峰是由兩個原花青素單體聚合而成（m/z289），推斷P10號峰所代表物質為原花青素二聚體。P12和P15號峰具有相同的特征離子（m/z285），P12號峰為失去一分子的蕓香糖苷，P15號峰為失去一分子半乳糖苷，因此P12和P15號峰所代表的物質分別為山柰酚-3-蕓香糖苷和山柰酚-3-半乳糖苷。根據一級、二級質譜和出峰時間，P1、P3、P6、P8號峰分別為奎寧酸（m/z191）、檸檬酸（m/z191）、龍膽酸（m/z153）和表兒茶素（m/z289）。其中，P2和P19號峰所代表的物質未知，但推測P2號峰屬于奎寧酸類多酚，P19號峰屬于山柰酚類多酚。在野生藍果忍冬果實中發現含有較多種類的槲皮素、奎寧酸和山柰酚等物質，P7、P12號峰的峰面積最大，即5-咖啡?？鼘幩?、山柰酚-3-蕓香糖苷的含量較高，其中山柰酚-3-蕓香糖苷在非花色苷化合物中占比最大，表明藍果忍冬果實中非花色苷的主要組成成分是綠原酸和黃酮醇類物質，這一結果與Ochmian等[27]的研究結果一致。

表2 野生藍果忍冬果實中非花色苷多酚高效液相色譜-三重四極桿-離子阱串聯質譜鑒定結果Table 2 Liquid chromatography coupled to triple quadrupole ion trap mass spectrometric data and tentative identification of non-anthocyanin polyphenols from wild blue honeysuckle fruit

圖3 野生藍果忍冬果實中非花色苷多酚高效液相色譜圖（280 nm）Fig.3 High performance liquid chromatogram of the non-anthocyanin polyphenols from wild blue honeysuckle fruit detected at 280 nm

2.2 野生藍果忍冬果實中總酚與花色苷含量

本實驗中，野生藍果忍冬果實中總酚含量為82.7 mg/100 g，總花色苷含量為49.8 mg/100 g，謝佳璇[13]對藍果忍冬‘蓓蕾'進行測定，總花色苷含量為37.85 mg/100 g，總酚含量為29.13 mg/100 g，Oszmiański等[26]發現藍果忍冬果實中總酚含量為24.37 mg/100 g，表明野生藍果忍冬在總花色苷和總酚含量方面存在優勢。野生藍果忍冬與其他果實相比也存在優勢，Méndez-Lagunas等[28]測定了草莓中的總酚和總花色苷含量，比較發現藍果忍冬果實中總酚和總花色苷含量是草莓中的10 倍。

2.3 野生藍果忍冬果實多酚粗提液的抗氧化活性

抗氧化活性的測定常用DPPH自由基清除能力法、ABTS陽離子自由基清除能力法、FRAP法和ORAC法，在這些方法中，最關鍵的是測定樣品消除自由基的能力，過量的自由基會對生命大分子和各種細胞器進行攻擊，從而對機體造成一定的損傷，加速機體的衰老，誘導高血壓、糖尿病等相關疾病的產生[29]?？寡趸瘎┠軌蛴行У厍宄龣C體內過量的氧自由基，減輕其對機體的損傷，因此常將抗氧化劑的抗氧化活性作為衡量植物抗氧化性的關鍵指標?？寡趸瘎┏７譃樽柚剐涂寡趸瘎┖蛿噫溞涂寡趸瘎?，植物體內存在的多酚類物質一般屬于斷鏈型抗氧化劑，通過使自由基與氫離子或電子結合，轉化為穩定的非自由基產物[30]。藍果忍冬果實中含有大量的多酚類物質，有研究表明，果實的抗氧化性與花色苷的含量和種類存在顯著相關性[31]。Kahkonen等[32]對C3G的研究中發現，C3G的含量與抗氧化性存在正相關關系。從圖4可知，野生藍果忍冬果實的DPPH自由基清除能力為985 μmol/g，Kusznierewicz等[33]對波蘭的藍果忍冬栽培品種進行抗氧化性測定，不同的藍果忍冬栽培品種DPPH自由基清除能力為93～166 μmol/g，ABTS陽離子自由基清除能力為170～417 μmol/g，本實驗中野生藍果忍冬果實對ABTS陽離子自由基清除能力為512 μmol/g，波蘭的藍果忍冬抗氧化活性低于小興安嶺地區的野生藍果忍冬栽培品種。本實驗中藍果忍冬果實的FRAP為9.6 μmol/g，ORAC為372 μmol/g，Thompson等[34]測定美國栽培的藍果忍冬果實的FRAP為37～113 μmol/g，ORAC為18～104 μmol/g，與本實驗的研究結果接近。

圖4 野生藍果忍冬果實多酚粗提液抗氧化活性Fig.4 Antioxidant activity of polyphenols extracted from wild blue honeysuckle fruit

2.4 野生藍果忍冬果實多酚粗提液對α-淀粉酶活性的抑制作用

2型糖尿病的關鍵表現是餐后高血糖[35]，α-淀粉酶是小腸腸道細胞膜上用于消化碳水化合物的關鍵酶，能夠催化淀粉、糖原和低聚糖α-1,4糖苷鍵的水解[36]。圖5為藍果忍冬果實中的多酚物質對α-淀粉酶的活性抑制作用，以阿卡波糖為對照，當其質量濃度為0.26 mg/mL時表現出對α-淀粉酶的抑制活性（抑制率50%），藍果忍冬果實也對α-淀粉酶表現出抑制活性（IC50為0.39 mg/mL），抑制活性略低于阿卡波糖，但高于沙果提取物（IC50為10.31 mg/mL）[37]、乳苣（IC50為6.904 mg/mL）[38]、蔓越莓（IC50為5.015 mg/mL）、草原櫻桃（IC50為7.555 mg/mL）、軟棗獼猴桃（IC50為14.641 mg/mL）[39]，表明藍果忍冬具有較強的抗α-淀粉酶活性。Phan等[40]研究了多酚對α-淀粉酶活性的抑制效果，證明了多酚具有較強的α-淀粉酶抑制活性，Worsztynowicz等[37]的結果進一步證明了多酚中的花色苷和酚酸類物質是抑制α-淀粉酶活性的主要物質，這些研究表明，多酚化合物作為α-淀粉酶活性抑制劑，可有效降低餐后血糖濃度，并在預防糖尿病及糖尿病的前期治療中發揮重要作用。

圖5 阿卡波糖和野生藍果忍冬果實多酚粗提液對α-淀粉酶活性的抑制作用Fig.5 Inhibitory activity of α-amylase by acarbose and polyphenols extracted from wild blue honeysuckle fruit

2.5 野生藍果忍冬果實多酚粗提液對α-葡萄糖苷酶活性的抑制作用

α-葡萄糖苷酶是小腸腸道細胞膜上用于消化碳水化合物的關鍵酶，能夠將二糖轉化成被小腸吸收的單糖，導致餐后血糖水平急劇升高[41]。食用對α-葡萄糖苷酶活性具有抑制作用的食物能夠有效緩解餐后血糖濃度升高，有利于糖尿病的預防和控制[36]。圖6表示藍果忍冬果實中的多酚物質對α-葡萄糖苷酶的活性抑制作用，以阿卡波糖為對照，根據圖中曲線方程計算出其對α-葡萄糖苷酶的IC50為0.02 mg/mL，藍果忍冬果實對α-葡萄糖苷酶的IC50為0.933 mg/mL，與楊梅（IC50為1.562 mg/mL）[42]和芒果苷（IC50為1.642 mg/mL）[43]相比，具有較強的抗α-葡萄糖苷酶活性。研究表明，5-咖啡?；鼘幩醄44]、二咖啡?；鼘幩醄45]均能夠抑制α-葡萄糖苷酶的活性，這些物質在野生藍果忍冬果實中含量較高，尤其是較高含量的5-咖啡?；鼘幩峥赡苁撬{果忍冬具有較高α-葡萄糖苷酶活性抑制作用的原因。

圖6 阿卡波糖和野生藍果忍冬果實多酚粗提液對α-葡萄糖苷酶活性的抑制作用Fig.6 Inhibitory activity of α-glucosidase by acarbose and polyphenols extracted from wild blue honeysuckle fruit

2.6 野生藍果忍冬果實多酚粗提液對脂肪酶活性的抑制作用

近年來研究發現，肥胖和超重人群糖尿病患病率逐年上升[46]，且肥胖和中心性肥胖程度與糖尿病嚴重程度呈正相關關系[47]。脂肪酶對于甘油三酯的消化起關鍵作用，能將甘油三酯水解成脂肪酸和單甘脂[48]。日常人們攝入的90%的膳食脂肪都是由混合型的甘油三脂組成，在消化過程中，脂肪酶可以水解50%～70%的脂肪[49]。抑制脂肪酶的活性可以減少人體對于脂肪的吸收，從而達到預防糖尿病的作用。植物多酚提取液能與酶聚合從而使酶失去活性，對脂肪酶表現出抑制活性[50]。本實驗中，野生藍果忍冬的多酚粗提液對于脂肪酶具有一定的抑制活性，IC50為12.31 mg/mL。此外，槲皮素在脂肪酶活性抑制方面具有顯著的效果[9]，藍果忍冬果實中檢測到了槲皮素-3-蕓香糖苷和槲皮素-3-葡萄糖苷，這可能是藍果忍冬具有較強抗脂肪酶活性的原因。在關于植物對脂肪酶的活性抑制方面，Slanc等[51]共篩選了106 種食用和藥用植物以抑制胰脂肪酶活性，發現熊果、豌豆、挪威云杉和大葉椴樹具有較強的抑制脂肪酶活性的作用。但目前藍果忍冬對脂肪酶的抑制活性相關的研究較少，尤其是針對野生資源方面，未來可以利用其果實進行抗肥胖食品的開發。

3 結 論

野生藍果忍冬果實中的多酚成分含量豐富，果實中共檢測到8 種花色苷、20 種非花色苷，其中C3G和山柰酚-3-蕓香糖苷含量很高。藍果忍冬具有較強的抗氧化活性，總酚含量達到82.7 mg/100 g，總花色苷含量為49.8 mg/100 g；對α-淀粉酶、α-葡萄糖苷酶、脂肪酶的IC50分別為0.39、0.933 mg/mL和12.31 mg/mL，具有降血糖的作用。