胃癌患者血清AFP、MG7-Ag、DKK1、TK1、PGⅠ水平檢測及臨床意義

韓霜，施育鵬，李亞妮，陳鎮，王小娟，孫力

西安市紅會醫院消化內科1、消化外科2，陜西 西安 710000

胃癌具有臨床癥狀出現晚、進展速度快、生存率低的特點，其死亡率在世界上位居第二。有研究指出，該病在65歲后的人群中發病呈現明顯升高的趨勢[1]。隨著對胃癌中分子學機制的研究，以及對腫瘤細胞轉移、增殖生長過程中的信號轉到通路作用機制的不斷深入研究，逐漸認識到該病在發生和發展過程中屬于一個多階段、多因素的過程，其中涉及到多種分子、多個基因的水平變化，成為腫瘤靶向治療的研究熱點之一[1-2]。血清甲胎蛋白(AFP)是血液里存在的一項腫瘤標志物，主要用于檢測人體原發性肝癌，或者生殖腺胚胎癌，如睪丸癌、卵巢癌、畸胎瘤等惡性腫瘤疾病[3]。胃癌相關抗原(MG7-Ag)屬于非特異性表面抗原，在健康人體中的含量很低，孟培等[4]研究發現血清MG7-Ag 在胃癌患者中的水平高于身體健康的人體。分泌型蛋白Dickkopf-1(DKK1)在細胞內的異位表達能抑制多種腫瘤細胞的增殖，但有時能在促凋亡因子存在時誘發凋亡，從而決定細胞的分化、增殖、遷移或癌變等特性[5]。胸苷激酶-1(TK1)是細胞增殖標志物，可以監測細胞異常增殖的速度。適用于體檢和癌前病變評估等，可以預估預后生存率、預測復發風險率、評估癌變進程的風險度等。胃蛋白酶原Ⅰ(PGⅠ)主要由胃底腺的主細胞和黏液頸細胞分泌。胃萎縮時會改變蛋白酶原的分泌，因此PGⅠ可作為胃黏膜萎縮的可靠指標[6]。本研究旨在探討胃癌患者血清AFP、MG7-Ag、DKK1、TK1、PGⅠ水平及其臨床意義，現報道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料 回顧性分析西安市紅會醫院消化外科2018年8月至2019年8月收治的110例胃癌患者(觀察組)的臨床資料。納入標準：①患者在胃鏡下病理取到胃癌細胞，并經臨床病理學檢測符合胃癌的診斷標準[7]；②患者出現胃癌相關的上腹痛、脹氣、上消化道穿孔、消化道出血、消化道梗阻等胃癌相關的臨床表現；③腫瘤標記物血清癌胚抗原(CEA)及AFP升高；④患者年齡為50～80歲。排除標準：①血液系統疾??；②乳腺癌、前列腺癌、肺癌等惡性腫瘤疾??；③酗酒、抽煙、熬夜等不良生活習慣；④心功能、肝功能、肺功能及腎功能障礙。選取同期在我院接受體檢的健康人群85例作為對照組。兩組受檢者的一般資料比較差異均無統計學意義(P＞0.05)，具有可比性，見表1。本研究經我院醫學倫理委員會批準。

表1 兩組受檢者的一般資料比較()

表1 兩組受檢者的一般資料比較()

組別 例數 男/女(例)年齡(歲)BMI(kg/m2)觀察組對照組χ2/t值P值110 85 54/56 42/43 0.002 0.965 68.51±1.12 68.40±1.08 0.691 0.491 25.90±2.05 25.78±2.14 0.398 0.691

1.2 觀察指標與檢測方法 (1)比較兩組受檢者的血清AFP、MG7-Ag、DKK1、TK1、PGⅠ水平。兩組受檢者采集靜脈血6 mL，通過離心機在3 000 r/min的狀態下進行離心并分離，提取上層血清液在-80℃的冷凍箱中待檢。采用放射免疫分析法檢測血清AFP、PGⅠ水平，采用酶聯免疫法檢測MG7-Ag、DKK1 水平，采用增強化學發光法檢測血清TK1 水平；以上檢測所需的試劑盒由南京歐凱生物科技有限公司提供。(2)比較不同胃癌患者的血清AFP、MG7-Ag、DKK1、TK1、PGⅠ水平。(3)分析胃癌患者血清AFP、MG7-Ag、DKK1、TK1、PGⅠ水平與TNM 分期、腫瘤直徑、血管浸潤程度、淋巴結轉移的相關性。

1.3 統計學方法 應用SPSS18.0 軟件進行數據統計學分析。計量資料符合正態分布，以均數±標準差()表示，組間比較采用配對樣本t檢驗，計數資料比較采用χ2檢驗，采用Spearman 相關性分析法分析胃癌患者血清AFP、MG7-Ag、DKK1、TK1、PGⅠ水平與TNM分期、腫瘤直徑、血管浸潤程度、淋巴結轉移的相關性。以P＜0.05表示差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組受檢者的血清 AFP、MG7-Ag、DKK1、TK1、PG Ⅰ水平比較 觀察組患者的血清AFP、MG7-Ag、DKK1、TK1水平明顯高于對照組，PGⅠ水平明顯低于對照組，差異均有統計學意義(P＜0.05)，見表2。

表2 兩組受檢者的血清AFP、MG7-Ag、DKK1、TK1、PGⅠ水平比較()

表2 兩組受檢者的血清AFP、MG7-Ag、DKK1、TK1、PGⅠ水平比較()

組別觀察組對照組t值P值例數110 85 AFP(ng/mL)24.89±3.71 5.40±0.85 47.455 0.001 MG7-Ag(U/mL)7.16±3.05 2.33±0.60 14.379 0.001 DKK1(ng/mL)5.12±1.10 3.05±0.48 16.192 0.001 TK1(pmol/mL)100.85±20.30 70.00±13.90 12.001 0.001 PGⅠ(ng/mL)40.10±7.18 50.57±9.66 8.682 0.001

2.2 不同胃癌患者的血清AFP、MG7-Ag、DKK1、TK1、PGⅠ水平比較 TNM 分期高、腫瘤直徑大、發生血管浸潤和淋巴結轉移患者的血清AFP、MG7-Ag、DKK1、TK1、PGⅠ水平明顯升高，PGⅠ水平明顯降低，差異均具有統計學意義(P＜0.05)，見表3。

表3 不同胃癌患者的血清AFP、MG7-Ag、DKK1、TK1、PGⅠ水平比較()

表3 不同胃癌患者的血清AFP、MG7-Ag、DKK1、TK1、PGⅠ水平比較()

臨床病理參數TNM分期例數63 47腫瘤直徑(cm)分類Ⅰ～Ⅱ級Ⅲ～Ⅳ級t值P值≤3＞3 t值P值65 45血管浸潤程度有無t值50 60 P值淋巴結轉移有無t值48 62 P值AFP(ng/mL)22.15±3.80 28.92±5.17 7.919 0.001 23.47±4.02 27.65±5.23 4.735 0.001 28.58±5.50 22.69±3.17 7.017 0.001 28.70±5.62 22.98±3.84 6.333 0.001 MG7-Ag(U/mL)6.84±2.79 8.98±3.70 3.460 0.001 6.82±2.16 9.63±3.45 5.251 0.001 9.18±2.08 6.94±1.21 7.038 0.001 9.30±2.15 6.89±1.11 7.618 0.001 DKK1(ng/mL)4.50±1.10 5.25±0.97 3.718 0.001 4.48±1.03 5.21±0.79 4.006 0.001 5.43±0.68 4.24±1.05 6.896 0.001 5.46±0.81 4.42±1.00 5.866 0.001 TK1(pmol/mL)97.85±14.52 123.70±10.35 10.389 0.001 98.02±13.79 110.12±15.04 4.360 0.001 120.56±11.07 94.60±12.28 11.541 0.001 120.05±12.19 97.41±10.35 10.526 0.001 PGⅠ(ng/mL)42.95±5.77 36.98±4.50 5.881 0.001 43.18±6.15 38.05±5.28 4.552 0.001 35.52±5.74 45.79±6.16 8.979 0.001 34.69±5.18 45.03±6.73 8.811 0.001

2.3 胃 癌 患 者 血 清 AFP、MG7-Ag、DKK1、TK1、PGⅠ水平與TNM 分期、腫瘤直徑、血管浸潤程度、淋巴結轉移的相關性 將TNM 分期、腫瘤直徑、血管浸潤程度、淋巴結轉移作為因變量，將血清AFP、MG7-Ag、DKK1、TK1、PG Ⅰ指標作為自變量，經Spearman 相關性分析結果顯示，血清AFP、MG7-Ag、DKK1、TK1水平與TNM分期、腫瘤直徑、血管浸潤程度、淋巴結轉移均呈正相關(P＜0.05)，血清PGⅠ水平與NM 分期、腫瘤直徑、血管浸潤程度、淋巴結轉移均呈負相關(P＜0.05)，見表4。

表4 胃癌患者血清AFP、MG7-Ag、DKK1、TK1、PGⅠ水平與TNM分期、腫瘤直徑、血管浸潤程度、淋巴結轉移的相關性

3 討論

胃癌的發生是多因素、多階段、多步驟的結果，主要受環境因素和遺傳因素兩大方面的影響。環境因素包括生活的環境、飲食、工作環境，甚至身心環境，都是導致胃癌產生的因素。胃癌也是有遺傳傾向的疾病，具有一定的遺傳性[8-9]。目前胃癌的治療方法在早期可通過胃鏡進行微創治療，約90%以上的患者可痊愈；進展期胃癌以手術治療為主。根據患者的病情，可進行3～4個周期的新輔助化療后進行手術治療，術后繼續進行化療；晚期胃癌可進行化療、靶向治療、生物學治療等[10]。因此在臨床中需要腫瘤標記物和相關血清因子的水平檢測為病情的發展以及臨床的治療提供參考依據。

血清AFP在正常人血清中的含量低于20 μg/L，干細胞發生癌變時，隨著病情急劇惡化，AFP 含量會迅速增高[11]。MG7-Ag是主要存在于細胞表面的中性糖蛋白抗原，能夠被胃癌單克隆抗體所識別，當胃部組織發生癌變，在癌變因子的刺激下，MG7-Ag 會大量合成與分泌，并傳播到人體血液中。因此在胃癌的臨床診斷和預警具有重要價值[12]。DKK1在細胞內合成通過內質網和高爾基體運送到細胞膜，再分泌到細胞外；發揮作用的蛋白質能在細胞的增殖、遷移中發揮調節作用，且在肝癌、宮頸癌及胃癌的癌變中發揮關鍵作用。TK1 在發生細胞過度增殖時的活性含量遠超過正常水平，能作為一種有效的腫瘤標志物來監測惡性腫瘤的增殖活性、腫瘤細胞的動態變化、腫瘤細胞的增長速率，臨床治療可根據TK1數據定制合適患者的治療方案[13]。PGⅠ是由胃底主細胞和壁細胞分泌的，PGⅠ表達水平增高時，多提示胃黏膜分泌功能增強，胃黏膜損傷、炎癥、糜爛、消化性潰瘍的風險增加。而當PGⅠ表達水平降低時，多提示胃黏膜分泌功能下降，胃黏膜萎縮、腸上皮化生、異型增生、不典型增生的風險增加[14]。本次研究結果顯示，患者的血清AFP、MG7-Ag、DKK1、TK1 水平均明顯高于對照組，PGⅠ水平明顯低于對照組，差異均有統計學意義(P＜0.05)。且TNM 分期越高、腫瘤直徑越大、發生血管血管浸潤和淋巴結轉移的血清AFP、MG7-Ag、DKK1、TK1水平升高、PGⅠ水平降低。通過分析是患者機體受癌變影響，在癌細胞脫落進入血管后，隨血流到其他部位繼續生長，進入血管系統的腫瘤細胞常與纖維蛋白及血小板共同黏聚成團，破壞鄰近正常組織、器官，并繼續生長。T淋巴細胞亞群及NK殺傷細胞均被破壞，血清AFP、MG7-Ag、DKK1、TK1可以通過分化、增殖、遷移在人體中得到進一步的表達。伴隨TNM分期的變化以及腫瘤直徑的變大會直接加劇腫瘤浸潤超過固有肌層，侵犯漿膜，直接影響PGⅠ的合成[15-16]。本研究經Spearman 相關性分析結果顯示，血清AFP、MG7-Ag、DKK1、TK1 水平與 TNM 分期、腫瘤直徑、血管浸潤程度、淋巴結轉移均呈正相關，血清PGⅠ水平與NM 分期、腫瘤直徑、血管浸潤程度、淋巴結轉移均呈負相關。顯示血清AFP、MG7-Ag、DKK1、TK1、PGⅠ直接影響胃癌的病情進程，可能與血清AFP、MG7-Ag、DKK1、TK1的協同作用對PGⅠ的水平表達具有抑制作用。本研究的不足之處在于未分析手術和化療對胃癌患者血清AFP、MG7-Ag、DKK1、TK1、PGⅠ水平的影響，因此有待加大研究范圍，強化和深入該研究方案的臨床價值。

綜上所述，血清AFP、MG7-Ag、DKK1、TK1 在胃癌患者中的表達水平明顯升高，PGⅠ明顯降低，血清AFP、MG7-Ag、DKK1、TK1、PGⅠ的聯合檢測可為胃癌的臨床治療以及病情的評估提供參考價值。