2015—2020年延安市HIV 確證試驗結果分析

馬艷，張寧梅，何靜子

1.延安市疾病預防控制中心，陜西 延安 716000；2.延安大學附屬醫院，陜西 延安 716000

美國于1981 年首次報道了5 例艾滋病病例，由此拉開了人類了解艾滋病的序幕[1]。據2020年調查統計全世界感染艾滋病者約3 800 萬，全世界接受抗逆轉錄病毒療法者約2 540萬。僅2020年新發感染者就有170萬人，每年死于艾滋病相關的疾病約69萬人，新發感染患者的數量在逐年遞增。目前艾滋病已經成為威脅我國公共衛生問題之一[2]。對艾滋病患者如果可以做到早發現早治療，就有助于幫助患者提高生活質量，從而減少艾滋病的傳播[3]。目前艾滋病的實驗室檢測主要包括人類免疫缺陷病毒(HIV)抗體檢測、核酸檢測。HIV抗體檢測的篩查方法主要主要有酶聯免疫吸附試驗(ELISA)、化學發光(CIA)、免疫熒光試驗(IFA)以及快速檢測(RT)等。HIV 抗體確證實驗是診斷HIV 感染的金標準。國內目前常用的HIV 抗體確證實驗是免疫印跡試驗(Western blot，WB)。本研究對2015—2020年延安市HIV 確證試驗的結果進行分析，以探討其條帶特點和人群特征，為提高條帶判讀能力以及艾滋病防治工作提供支持。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取的標本嚴格按照《全國艾滋病檢測技術規范(2020年修訂版)》[4]采樣、運輸和保存，標本類型均為血清或血漿。標本為2015 年1 月至2020 年12 月在延安市各個篩查實驗室中HIV 初篩陽性的患者，經本實驗室通過WB 試驗后診斷為HIV-1 抗體陽性、HIV-1抗體陰性及HIV-1抗體不確定者共571例。

1.2 實驗室檢測 WB 試劑為MP 公司生產的HIV1+2 型抗體檢測試劑盒，均在有效期內，按照說明書要求存放，實驗操作人員嚴格按照說明書進行操作。實驗操作人員均持有上崗證書，結果判讀由兩人以上進行肉眼判讀。

1.3 結果判定 確證實驗結束后根據條帶并結合帶型進行HIV 抗體結果判定。HIV 抗體陰性的判斷標準則是沒有出現特異性條帶。HIV 抗體不確定的判斷標準則是出現任何特異性條帶，但不足于被判斷為陽性，則需要檢測者在一定期限內再次檢測，再根據檢測結果做出判斷。HIV抗體陽性的判斷標準是需要檢測出2個ENV(gp160、gp120、gp41)及任何一個 GAG (p17、p24、p55)或者檢測出 2 個 ENV(gp160、gp120、gp41)及任何一個 POL (p31、p51、p66)。若HIV-2抗體陽性的判斷則需滿足上述條件并且清晰出現HIV-2特定條帶。HIV檢測流程及判定結果都是參照《全國艾滋病檢測技術規范(2020 年修訂版)》[4]以及使用的試劑說明書進行判定。

1.4 統計學方法 應用SPSS22.0 軟件進行數據統計分析。資料采用描述性分析方法，計數資料比較采用χ2檢驗或Fisher 確切概率法。以P＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 延安市HIV 確證人群概況 2015—2020 年本確證實驗室進行確證試驗571 份。確證結果顯示HIV-1 抗體陽性率為 76.53% (437/571)，HIV-1 抗體不確定率為4.73%(27/571)，HIV-1抗體陰性率為18.73%(107/571)，見表1。各年份HIV抗體陽性、陰性、不確定的檢出率比較差異有統計學意義(χ2=25.342，P＜0.05)，見表2。經過WB確證實驗后，HIV-1抗體陽性為444份，HIV-1 抗體不確定為20 份，HIV-1 抗體陰性為107份。444 份 HIV-1 抗體陽性中，特異性全帶(gp160、gp120、p66、p55、p51、gp41、p39、p31、p24、p17)共 254 份占58.12%。HIV-1抗體陽性和HIV-1抗體不確定的標本共464 份，其中檢測出ENV 基因：gp160、gp120、gp41，分別為 95.47% (443/464)、95.91% (445/464)和 94.18%(437/464)。檢測出 GAG 基因：p17、p24、p55，分別為84.91% (394/464)、86.85 (403/464)、66.16% (307/464)。檢測出 POL 基因：p31、p51、p66，分別為 89.22%(414/464)、91.16%(423/464)和91.16%(423/464)。

表1 延安市2015—2020年HIV 檢驗結果統計

表2 2015—2020年HIV感染樣本確證結果分析[例(%)]

2.2 延安市HIV 確證人群分布 經過WB 實驗后發現HIV-1 抗體陽性構成比例主要以男性為主，年齡在31～50歲之間，分布較多的是農民和無業人群，文化程度以初中和初中以下為主。不同性別、年齡、職業和文化者的HIV-1 抗體陰性構成比例均無明顯差異。HIV-1 抗體不確定的構成比例男性明顯高于女性，大于等于60歲的比例最高，但不同職業、文化程度和婚姻狀況的HIV-1抗體不確定構成比例差異無統計學意義(P＞0.05)，見表3。

表3 延安市HIV抗體WB實驗人群分布特征

2.3 不同送檢單位陽性確證結果的條帶檢出分布情況比較 送檢單位主要是轄區內HIV 篩查實驗室，包括血站、CDC、醫院和VCT 等，經過WB 確證實驗后確證例數分別為25例、117例、278例和24例。其中醫院的陽性率最高91.44%，血站的陽性率最低26.32%。gp160、gp120 的檢出率均為100%，p55 的檢出率最低。不同組間對比發現血站送的樣本中條帶的檢出率較其他組高，但是血站的陽性率較低可能與血站的篩查試劑靈敏度較高有關。相同條帶在不同的送檢單位之間的比較差異無統計學意義(P＞0.05)，見表4。

表4 不同送檢單位陽性確證結果的條帶檢出分布情況比較[例(%)]

2.4 不同年齡組確證陽性結果的條帶檢出分布情況比較 感染者最小7 歲，最大85 歲?！?8 歲占1.8%(8/444)，19～30 歲占29.95%(133/444)，31～50 歲占50%(222/444)，51～60 歲占 14.86%(66/444)，60 歲以上占3.38% (15/444)。在不同年齡組間gp160、gp120 的檢出率均為100%，p55 和p17 的檢出率都相對較低。p24條帶在不同年齡組間差異有統計學意義(P＜0.05)，其他條帶在不同年齡組間差異無統計學意義(P＞0.05)。 p24 在≤18 歲組內檢出率最低。相同條帶在≥60歲的組內檢出率較低，這可能與年齡有關。相同條帶在31～50 歲組內的檢出率較高，這可能也與年齡有一定的聯系，見表5。

表5 不同年齡組確證陽性結果的條帶檢出分布情況比較[例(%)]

2.5 結婚與否陽性確證結果條帶檢出分布情況比較 HIV-1 抗體陽性根據婚姻狀態分組，條帶檢出率最低的為p55，其次為p17；條帶檢出率較高的為：p66、gp41、p24，相同條帶比較差異無統計學意義(P＞0.05)，見表6。

表6 結婚與否陽性確證結果條帶檢出分布情況比較[例(%)]

3 討論

本確證實驗室對延安市2015—2020年571份HIV樣本通過WB 法進行了確證實驗。實驗結果表明：HIV-1 抗體陽性率為76.53%，HIV-1 抗體不確定率為4.73%，HIV-1 抗體陰性率為18.73%。通過數據分析得出HIV-1抗體的不確定主要是以早期感染和非特異性反應為主的結論[5-7]。對HIV-1 抗體不確定的標本要加強隨訪，將每一份標本的檢測工作落實到位，這需要篩查實驗室和確證實驗室的相互配合，加強工作能力。同時希望確證試劑能加強靈敏度使試劑更一步完善[8-9]。延安市2015—2020 年根據年份不同的確證實驗結果差異無統計學意義，這也說明了延安市HIV防控工作維持穩定，沒有增加的趨勢。

HIV-1 抗體陽性率為76.53%，男性陽性率為84.01%，明顯高于女性的55.91%，這個結果與青島、揚州等地的研究結果相同[10-11]。本研究發現女性的HIV-1 抗體陰性率明顯高于男性，但是男性和女性的HIV-1抗體不確定率相差不多。通過流行病學研究發現，近幾年隨著男男同性戀人數的不斷增加，男男性行為傳播成為男性感染的重要途徑[12-14]。要加強宣傳教育，加大檢測力度，尤其是對男男同性人群。男男同性戀人群是一個值得社會關注的群體，同時也是一個HIV預防的研究方向。

根據樣本來源的不同，確證結果的差異性也很大。血站的HIV-1 抗體陽性率最低為26.32%，醫院HIV-1抗體陽性率最高為91.44%，大部分血站送來的標本是通過自愿獻血，其中獻血人群可能有腫瘤患者或者自身患有免疫性疾病的人，也可能和血站的初篩試劑的靈敏性有關，這些都是造成HIV-1 抗體陽性率低的原因[15-17]。醫院的陽性樣本和CDC的陽性樣本都比較多，很多醫院樣本發現的時候都已經是HIV的中晚期，很多病人都是在入院后才知道自己的身體狀況，CDC的陽性標本往往都是基層單位經過篩查的標本，送來確證實驗室后經過WB確證后陽性率也很高，自愿咨詢的陽性率也達到了64.86%，這說明現在人們對HIV 的認知越來越多。有研究發現gp120、p24 是HIV感染后最早出現的抗體[18]。本次研究中gp120 和p24的檢出率分別為100%和99.77%，和先前研究結果相同。p24的高檢出率是因為其產生穩定以及特異性高。對HIV 要加大宣傳尤其是對年輕人群和高危人群，讓大家了解HIV 的傳播途徑和治療方法，加大對自身的保護力度。對醫院和CDC要提高檢測能力，如果對HIV感染者能做到早發現、早診斷、早治療，那么患者就能得到更好的救治和保護。