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非洲馬瘟診斷與防治研究進展

2022-11-24 05:31杭柏林鄧麗劉保國潘豪彎夢遼
關鍵詞:血清型特異性蛋白

杭柏林,鄧麗,劉保國,潘豪,彎夢遼

(1.河南科技學院動物科技學院,河南 新鄉 453003;2.揚州大學獸醫學院/教育部禽類預防醫學重點實驗室/江蘇省動物預防醫學重點實驗室,江蘇 揚州 225009)

非洲馬瘟(African horse sickness,AHS)是由非洲馬瘟病毒(African horse sickness virus,AHSV)引起的一種高致死性傳染病[1],被世界動物衛生組織(OIE)列為法定必須報告的動物疫病,被我國列為一類動物疫病和需要重點防范的外來動物疫病.非洲馬瘟主要分布在非洲大陸[2-3],非洲以外的地區或國家(如近東、中東、西班牙[4]、葡萄牙[5])也曾有流行.目前,貿易全球化、交通便捷化、國際國內馬術與賽馬的比賽增多、馬胚胎資源流動、馬匹的非法走私、氣候變暖導致媒介昆蟲分布改變等諸多因素使得非洲馬瘟病毒的傳播風險不斷加大,一旦爆發將造成重大經濟損失.因此,世界各國高度關注非洲馬瘟等外來動物疫病.

雖然我國是OIE 認可的非洲馬瘟歷史無疫國,到目前為止還沒有發生非洲馬瘟,但是東南亞的多個國家(如泰國[6]、印度[7]、馬來西亞[8])曾發生非洲馬瘟.我國云南地區與泰國接壤,滇馬等馬群的數量較多,同時該地區溫暖潮濕,有利于媒介昆蟲如庫蠓等的生存[8].因此,我國面臨著非洲馬瘟傳入的風險,必須密切關注非洲馬瘟.

充分掌握非洲馬瘟診斷與防治的相關知識對防控非洲馬瘟具有關鍵作用,對保護我國馬相關產業具有重要意義.為此,本文通過對非洲馬瘟的診斷與防治方面進行綜述,希望為我國非洲馬瘟的防控與科學研究提高幫助.

1 非洲馬瘟病毒概述

非洲馬瘟病毒(AHSV)是呼腸孤病毒科(Reoviridae)環狀病毒屬(Orbivirus)的成員[9].AHSV 的基因組為雙鏈RNA(dsRNA),有10 個片段(大片段為L1~L3,中等片段為M4~M6,小片段為S7~S10),其中7個片段分別編碼7 個結構蛋白(VP1~VP7),3 個片段(M5、S8 和S10)編碼4 個非結構蛋白(NS1、NS2、NS3、NS3A),S10 片段編碼兩個最小的蛋白NS3 和NS3A[10].AHSV 粒子的直徑大約為75 nm,表面無囊膜,衣殼為20 面體對稱.AHSV 粒子的衣殼分為兩層,外殼由VP2 和VP5 構成,當病毒入侵細胞通過細胞膜時被脫掉;內殼由主要蛋白(VP3 和VP7)和微量蛋白(VP1、VP4 和VP6)構成,微量蛋白組成病毒轉錄復合體[11-13].

VP2 蛋白的變異性最大,有15 個抗原位點,是主要的血清型特異性抗原,能與中和抗體發生反應,與VP5 蛋白一起能被中和抗體識別.當VP2 蛋白缺乏時,VP5 蛋白也能誘導產生一定程度的中和抗體.VP3蛋白也高度保守.VP6 蛋白被認為是病毒dsRNA 的解旋酶[14-21].VP7 蛋白高度保守,是群特異性抗原,其對應的基因片段常作為群特異性鑒定靶點,VP7 蛋白免疫后有很好的保護作用[22-23].在感染細胞中,至少有3 種非結構蛋白(NS1、NS2、NS3/NS3A),NS1 蛋白形成病毒特異的微管結構.NS3 蛋白的變異性僅次于VP2,可分為3 個系統進化群(ɑ、β 和γ)[12].

AHSV 有9 個血清型,毒力強弱有差異,部分型之間有交叉反應,如5 型與8 型、6 型與9 型、1 型與2型、3 型與7 型,但不能完全交叉保護.動物康復后對相應血清型的AHSV 有很好的免疫力.AHSV 主要在肺、脾、淋巴結中復制,病毒數量最高[24-25].AHSV 存在于體液(血液、滲出液、組織液等)中,紅細胞上最多.AHSV 有血凝活性,在pH 值為6.4 和37 ℃的條件下作用2 h 可凝集馬的紅細胞[19].

AHSV 對乙醚、氯仿、去氧膽酸鈉、胰蛋白酶有一定的抵抗力,經質量分數0.1%福爾馬林作用48 h被滅活,能被質量濃度為4 mg/L β- 丙內酯和乙醚滅活[26-27].AHSV 對酸較為敏感,在pH 值為3.0 時迅速死亡,pH 值小于6.0 時易被滅活,在pH 值為6.0~10.0 之間相對穩定.AHSV 不耐高溫,經50 ℃3 h、60 ℃30 min 即失活,在-50 ℃~-20 ℃條件下極易失活,但在室溫、4 ℃、-70 ℃或凍干條件下能存活多年,復蘇后仍有較高活性.AHSV 在血液或血清中可長期存活,在尸體(即使尸體腐?。┲幸材艽婊钶^長時間[19,28].

2 非洲馬瘟診斷

我國有《非洲馬瘟診斷技術》(GB/T 21675-2008)和《非洲馬瘟檢疫技術規范》(SNT 2856-2011)等行業標準,但這些標準多年未修訂,新的診斷技術標準還未被采用.

2.1 流行病學診斷

非洲馬瘟的傳染源主要是感染AHSV 的馬屬動物,在內臟、血液、精液、尿液等中均含病毒[19,29].

非洲馬瘟是一種非接觸性的蟲媒性疫病,主要通過媒介昆蟲如庫蠓、蟄蠅、伊蚊和庫蚊等叮咬吸血而在易感動物間傳播,其中擬紋庫蠓為主要媒介[19,30],另一種庫蠓(Culicoides bolitinos)也能傳播AHSV[31].我國有超過300 種庫蠓屬昆蟲,為非洲馬瘟的發生提供了必要條件[26].在某些蜱蟲體內也能分離到AHSV[32].在風的作用下,帶病毒的庫蠓在水上能移動700 km、在陸地能移動150 km,從而導致長距離傳播[29,33].

AHSV 感染所有馬屬動物,以馬(特別是幼齡馬)最易感,病死率高達95%[11],騾和驢的易感性較差,斑馬感染后通常無癥狀,成為自然貯存宿主,可傳播病原[19,30].猴子感染AHSV 后不出現典型癥狀[25].因接觸到帶AHSV 的馬肉或馬血,駱駝、大象、狗也可能被感染[19],也可能是媒介昆蟲叮咬狗而導致傳播[34].狗常為急性致命感染,為終端宿主[33].在單峰駝、非洲象、黑犀牛、白犀牛、綿羊、山羊[35]中也檢測到AHSV的抗體[29,35].

非洲馬瘟的發生與流行具有明顯的季節性,常呈地方性流行或暴發流行,在溫暖潮濕季節多發[19].影響媒介昆蟲的因素(如地勢高、干燥、自然屏障、霜凍等)能使非洲馬瘟的發生率顯著降低[19].非洲馬瘟主要在非洲流行,但其他洲也時有發生.

非洲馬瘟不是人獸共患病,但疫苗毒株能導致人出現腦炎和視網膜炎[36].

2.2 臨床癥狀診斷

非洲馬瘟病毒感染后,潛伏期通常為5~14 d,最短為2 d,在潛伏期即能傳染.根據癥狀的不同,可分為四種類型[26].

(1)熱型.表現溫和,輕微發熱,眶上窩水腫,病程短,基本能很快恢復,致死率較低,多見于有一定免疫力的宿主或低毒力病毒感染,是非洲馬類和驢常見的類型[19,29].

(2)心型.大頭癥(Dikkop),為亞急性型,發熱,不超過40.5 ℃,可持續10 多天至幾周,水腫(皮下膠凍樣浸潤)多見于頭部(如上眼瞼、口唇、舌和腭等部位)、頸部、胸部、肩部、腹部,水腫部位不低于四肢,伴有心臟衰弱等,舌腹側面偶有出血斑,伴有腹痛,偶爾結膜充血,眼中有出血點,死亡率可達50%,瀕死時有呼吸加快、橫臥、肌肉震顫、流汗等癥狀[30].病程發展慢,部分病例可恢復,多見于免疫接種后被感染的馬[28,30].

(3)肺型.小頭癥(Dunkop),為最急性型或急性型,精神沉郁,體溫升高,40~42 ℃,咳嗽(痙攣性),頭頸部出汗較多,嚴重時呼吸困難,流淚,心跳加快,結膜發紺,鼻孔擴張,流大量泡沫樣鼻液,經5~7 d 死亡,死亡率高達95%,少數能恢復,但愈后不良,多見于新疫區和流行初期[19,28-30,37].

(4)混合型.最常見,為亞急性型,呈肺型與心型兩種癥狀,發熱后3~7 d 內死亡,死亡率可達70%[19].

2.3 病理變化診斷

非洲馬瘟的病理變化主要呈現在呼吸系統和循環系統[19,38].

(1)心型.多處部位(如筋膜下、皮下、肌內組織和淋巴結)出現水腫(有黃色凝膠樣液體),肌肉外觀呈茶褐色,同時有出血,心肌變性,心臟內外膜上呈現點狀淤血、出血,心包積液(黃色或紅褐色液體),胃部有炎性出血,肝脾腫大,肝臟有脂肪變性,并有充血,外觀呈暗褐色,脾臟有較多出血點,盲腸和結腸漿膜表面有出血點和/或發紺.受損和末受損部分之間有明顯分界線[38-39].

(2)肺型.肺呈粉紅色或紅色,支氣管中有大量白色泡沫,肺小葉間水腫,肺間質和胸膜下積液(黃色凝膠狀滲出液),腹部積液(黃色透明液體),胃部粘膜充血、水腫,胸部淋巴結水腫,心包有點狀淤血,腸系膜、腹膜、盲腸和結腸漿膜有出血點[30,39].

(3)混合型.與心型和肺型所發生的損傷基本一致[19].

2.4 病原學診斷

病原分離鑒定是疫病診斷最為經典的方法.應在抗體產生之前使用細胞培養或接種乳鼠進行病毒的分離鑒定[40].分離出的病毒可用免疫學方法或分子生物學方法進行鑒定.血液(發熱期有病毒血癥)、脾、肺、淋巴結和唾液腺等可作為病毒分離的樣本.組織處理液、抗凝血或洗滌的紅細胞接種到VERO細胞或BHK21 細胞,3~7 d 可見細胞病變(CPE),初次分離未曾發現CPE,需盲傳3 代,或熒光抗體染色進行檢查.也可用1~3 d 齡乳鼠腦內接種或雞胚靜脈接種[25,28].乳鼠腦內接種是初次分離AHSV 的首選方法.若有神經癥狀,則需乳鼠腦內繼代接種.倉鼠腎細胞、馬腎細胞、雞胚細胞、蚊子C6/36 細胞、庫蠓KC細胞、猴腎細胞(MS)等也可用于AHSV 的分離.

AHSV 的分離鑒定費時費力,不能快速做出診斷,不利于及時采取應對措施,且需要較高等級的生物安全實驗室,同時需要敏感的宿主或細胞,易受采集樣本和抗體的干擾[41-42].因此,在診斷早期,可不進行病毒分離,而采用其他方法進行診斷.

2.5 免疫學診斷

免疫學診斷主要是通過確定病原抗原或血清抗體的存在來證實感染或曾經感染.因抗體出現時間的差異,在疾病發展的不同階段應選擇不同方法.

2.5.1 酶聯免疫吸附分析(ELISA) ELISA 方法具有特異、敏感、重復性好、易操作等優點.多數研究均基于VP7 蛋白建立了檢測AHSV 抗原或抗體的ELISA 方法[19,43].鄭小龍等[44]基于AHSV VP7 蛋白建立了IgM捕獲ELISA(MAC-ELISA)方法,特異性高,僅能檢出AHSV 陽性血清,與其他病毒陽性血清無交叉反應;穩定性好,批內和批間的變異系數均低于10%,但與進口試劑盒相比,還可能存在假陰性的問題.潘佳亮等[45]基于原核表達的VP7 蛋白建立的間接ELISA 方法可用于AHSV 抗體的檢測,特異性和靈敏性均為良好,且與標準競爭ELISA 試劑盒的符合率達100%.曹琛福等[46]利用表達VP7 蛋白的昆蟲細胞裂解液作為包被液成功建立了檢測AHSV 抗體的間接ELISA 方法,具有較好的特異性.

2.5.2 瓊脂免疫擴散試驗(AGID)瓊脂免疫擴散試驗的敏感性低[47].我國有行業標準《非洲馬瘟瓊脂免疫擴散試驗操作規程》(SN/T 1692.1-2006).

2.5.3 病毒中和(VN)試驗和血球凝集抑制(HI)試驗VN 試驗和HI 試驗是AHSV 血清型鑒定的常用方法[19].VN 試驗具有型特異性,可確定AHSV 的血清型,但待檢樣本必須用9 種血清型的AHSV 抗原/抗體進行測定,才能確定感染毒株的血清型,且在5~7 d 內不一定能獲得結果[25].VN 試驗繁瑣,費時費力,且需要標準毒株、特定型別血清和細胞[46],多數實驗室難以滿足這些條件,因此,VN 試驗已很少被采用[42].我國有行業標準《非洲馬瘟血球凝集和血球凝集抑制試驗操作規程》(SN/T 1692.2-2006).HI 試驗比VN試驗簡單,但仍需要標準血清型的抗原和抗體.感染前期,體內抗體水平低,不適宜進行VN 試驗和HI 試驗,但在感染中期和感染后期,VN 試驗和HI 試驗可用于AHSV 的血清學調查.在應用VN 試驗和HI 試驗時,應注意可能存在多種血清型AHSV 混合感染的情況,采集樣本時應至少間隔2 周以上[18],應用9 種血清型的AHSV 抗原/抗體進行測試.

2.5.4 補體結合(CF)試驗 我國有行業標準《非洲馬瘟補體結合試驗操作規程》(SN/T1692.3-2006).CF 試驗用的補體結合反應抗體是群特異性的,可與AHSV 的9 種補體抗原進行反應,因而可用滅活(60℃30 min)的馬屬動物血清進行CF 試驗來診斷非洲馬瘟[30,48].雖然過去使用較廣,但是CF 試驗相對繁瑣,耗時長,不適于大批量檢測.

2.6 分子生物學診斷

目前,大多數實驗室主要采用分子生物學方法檢測病原的核酸來診斷疫病,檢測AHSV 核酸所用引物常根據L2、L3、M5、S7、S8 和S10 等基因設計[19].

2.6.1 聚合酶鏈反應(PCR)相關技術 反轉錄PCR(RT-PCR)方法檢出率高、特異性強、快速、便捷,是OIE 推薦的檢測AHSV 的方法.趙文華等[49]基于AHSV L2 片段設計了型特異性引物,利用RT-PCR 及測序方法可對9 個血清型的AHSV 進行分型.趙文華等[50]根據AHSV S7 片段設計了2 對引物,建立了檢測AHSV 的群特異性RT-PCR 方法,可檢測出6 個血清型(2、3、4、7、8 和9)的AHSV,同時能區別同屬的藍舌病病毒和鹿出血熱病毒.趙文華等[51]建立了檢測AHSV 熒光定量RT-PCR 方法,H2 探針及其配套引物可特異性檢測出7 個血清型(1、3、4、6、7、8、9)的AHSV,而MGB 探針及其配套引物可特異性檢測出2個血清型(2、5)的AHSV,該方法可對9 個血清型的AHSV 進行定量檢測和快速診斷.此方法將為非洲馬瘟爆發后疫苗早期選擇和疫情控制具有重要作用.趙文華等[52]根據AHSV VP7 蛋白基因ORF(開放閱讀框)全長序列設計了一對引物,建立了一種“三步法”實時熒光定量RT-PCR 方法,可對9 個血清型的AHSV RNA 擴增,特異性強(檢不出藍舌病病毒和鹿出血癥病毒的核酸),靈敏度高(100 拷貝/μL).高志強等[41]基于VP7 蛋白和NS2 蛋白的基因建立了檢測AHSV 的雙重TaqMan 熒光定量RT-PCR 方法,其特異性強(檢不出馬流感病毒、馬流產沙門菌、馬鏈球菌獸疫亞種、東部馬腦脊髓炎病毒和西部馬腦脊髓炎病毒的核酸),靈敏度高(是常規RT-PCR 方法的10 倍),同時雙基因檢測可防止漏檢.格日勒圖等[53]建立的一種TaqMan 熒光定量PCR 方法可同時檢測非洲豬瘟病毒、AHSV 及西尼羅病毒(WNV),靈敏度高(10 拷貝/μL),特異性好(檢不出牛呼吸道合胞體病毒、牛冠狀病毒和牛傳染性鼻氣管炎病毒的核酸),穩定性好(在4 ℃、37 ℃和室溫條件下放置6 個月后依然穩定).

2.6.2 芯片技術 芯片技術是一種快速檢測病原的方法.趙胤澤等[54]建立的基因芯片檢測技術可同時檢測和鑒別AHSV、WNV 和馬冠狀病毒,將檢測時間由1~2 周縮短至7 h 內,檢測體系具有很好的重復性,芯片批間差異輕微.該方法具有快速、準確和靈敏的特點,可用于出入境檢疫中大規??焖俸Y查.

2.6.3 環介導等溫擴增(LAMP)技術 LAMP 技術是近年來發展較快的一種便捷、易操作、可視化、快速的病原檢測方法.姜睿姣等[9]基于AHSV VP7 蛋白的基因建立的反轉錄LAMP(RT-LAMP)方法在63 ℃反應45 min 后即可進行可視化檢測,靈敏性是RT-PCR 的1000 倍,且具有速度快、結果特異、操作方便、設備簡易等特點,適合于現場快速檢測.李富祥等[55]根據VP7 蛋白的基因設計了2 對特異性引物,優化AHSV 的可視化RT-LAMP 檢測方法,可檢測9 個血清型的AHSV,具有特異性強(檢不出馬流感病毒、馬傳染性貧血病毒、馬動脈炎病毒和藍舌病病毒)、敏感性高(普通RT-PCR 的1000 倍)、簡便(62 ℃,可現場檢測)、快速(1 h)等特點.

2.6.4 斑點雜交試驗 編碼結構蛋白VP3(L3)和非結構蛋白NS1(M5)與NS2(S8)的基因可能是雜交試驗中最好的候選序列,Northern 斑點雜交試驗證實,源自AHSV 基因L3、M5 和S8 的探針有強烈的血清型交叉反應;源自M5 基因的探針對其他環狀病毒雜交時則缺乏反應,這些Northern 斑點雜交技術具有明顯的血清型特異性,但直接用于臨床樣品時則缺乏敏感性[25].

3 非洲馬瘟的防治

預防和控制非洲馬瘟需要從多個方面入手,并執行嚴格的相關措施.例如,為防止非洲馬瘟傳入,美國對進口馬屬動物實施60 d 強制檢疫、血清學檢測、保留種毒、改善庫存疫苗等措施.在疫情發生后,西班牙曾采取撲殺病馬、普遍接種疫苗、消滅傳播媒介和限制馬的流動等措施.但是,西班牙的經驗證明徹底根除非洲馬瘟非常困難[56].因此,平時應嚴格做好非洲馬瘟的預防工作,發生疫情后應及時采取措施進行控制和治療.

3.1 非洲馬瘟的預防

3.1.1 控制傳播媒介 控制和消滅非洲馬瘟的傳播媒介非常重要,但不可能完全消滅傳播媒介.因此,應盡可能減少帶毒媒介昆蟲叮咬易感動物的機會[39].使用消毒劑和殺蟲劑消殺環境中的庫蠓、伊蚊等媒介昆蟲.在馬匹安定而吸血昆蟲最活躍的夜間進行殺蟲、驅蟲[56].廄舍門窗裝置鐵紗窗,使用驅蟲劑如避蚊胺、檸檬桉樹油、苦楝油、香茅油等也能減少傳播的機會.保持畜舍干燥,清理媒介昆蟲孳生地,減少媒介滋生,從源頭清除和控制媒介[33,57].要降低馬匹被媒介昆蟲叮咬的機率,在媒介昆蟲活動較為活躍時段(如黃昏、夜間)可將易感馬匹控制在圈舍內[39],同時不在媒介昆蟲聚集區放牧.

3.1.2 疫苗免疫 疫苗免疫是防控非洲馬瘟最有效的方法[58].OIE 認可的非洲馬瘟無疫國/區境內馬匹不能系統性接種非洲馬瘟疫苗,但在非洲馬瘟流行區域還應進行疫苗接種[33].預防非洲馬瘟的疫苗包括弱毒疫苗、滅活疫苗和新型疫苗.無疫情國家及地區禁止使用非洲馬瘟弱毒疫苗,以防控為主[30].

非洲馬瘟的滅活疫苗沒有嚴重的副作用,不會發生毒力返強現象,相對安全[58].組織毒滅活苗一般只在個別地區作緊急預防接種,細胞毒滅活苗效果好[18].一種非洲馬瘟鋁膠佐劑福爾馬林滅活苗“Equipest”安全有效,對驢也有較好的保護作用,但在歐洲清除非洲馬瘟后就停止了生產[58].用二乙烯亞胺作滅活劑制備的2 價(4 型與9 型)非洲馬瘟病毒油乳劑滅活苗已經商品化[58].因成本高、接種程序復雜,多數非洲馬瘟滅活疫苗已停用[26].

全球防控非洲馬瘟仍以弱毒疫苗為主[58].非洲馬瘟的弱毒疫苗多是以經乳鼠腦和猴腎細胞連續培養的弱毒制備的,按血清型制成的單價苗或多價苗[56].應用多價弱毒苗可使非洲馬瘟的發生頻率和危害程度大大降低[18].南非使用的一種弱毒疫苗由兩種疫苗構成,疫苗I(含血清型1、3、4)用于首免,疫苗II(含血清型2、6、7、8)用于首免3 周后的二免[58].AHSV 血清型5 在對某些動物免疫時發生了嚴重的副反應(嚴重時死亡),已經停用;而AHSV 血清型9 的單價弱毒疫苗在撒哈拉以南之外的地區使用較多[58].雖然非洲馬瘟的多價弱毒疫苗能誘導機體產生較為穩定的免疫力,但是嚴重的副作用卻時常出現[26].

AHSV 的滅活疫苗和弱毒疫苗免疫后不能從血清學上鑒別是疫苗接種誘導的免疫還是自然感染誘導產生的免疫,從而導致不必要的撲殺[18].因此,開發非洲馬瘟的DIVA(區分感染和免疫的動物)疫苗非常必要.非洲馬瘟的亞單位疫苗、活載體疫苗、部分缺失的病毒樣顆粒疫苗和通過反向遺傳技術構建的基因缺失疫苗具有DIVA 功能[18],將是非洲馬瘟疫苗的發展趨勢,在此基礎上將同步建立對應的血清學檢測方法,對疫區實施非洲馬瘟的消除計劃將具有重要促進作用[58].以VP2、VP5、VP7 蛋白為基礎組分的AHSV 核酸疫苗、亞單位疫苗和活載體疫苗等一系列新型疫苗的研發取得了較大進步,免疫效果良好[19,26].VP2 是一種潛在的亞單位疫苗免疫原[19].Roy 等[59]將血清4 型AHSV VP2 蛋白(桿狀病毒表達系統表達)制備成亞單位疫苗,免疫后再進行人工感染試驗,結果表明VP2 蛋白(5μg)即可提供完全的免疫保護.另外,還有其他類型疫苗研究的報道,如表達VP2 蛋白的痘病毒活載體疫苗和DNA 疫苗,但DNA 疫苗的免疫效果不太理想[18].

3.1.3 加強監測,認真檢疫 加大相關動物樣品和媒介樣品的采集力度,認真做好病原檢測,早發現,早報告,及時處理.高度警惕國外傳入風險,加強邊境防控和口岸檢疫,加大野生馬屬動物巡查和打擊走私的力度[30].為防止非洲馬瘟傳入,禁止從發病國/區輸入馬屬動物及其相關產品,同時提升非洲馬瘟監測能力,做好相關準備工作[60].對從無疫國/區引進的動物應進行嚴格控制,對從(曾)暴發區/感染區引進的動物,應嚴格隔離檢疫,限制動物移動.建立芯片或馬護照等可追溯系統[33],有利于疫情流行病學調查和疫情控制.

3.1.4 加大宣傳培訓,儲備人員和物資,提升應急反應能力 加大對相關人員(養殖業者、畜牧獸醫人員、基層防疫檢疫人員、官員等)關于非洲馬瘟防控知識的宣傳培訓力度,提升對非洲馬瘟的預警水平,強化早期識別、及時報告、快速處置的能力[19].同時做好非洲馬瘟疫情的防控演練,查漏補缺.

加強疾病快速準確診斷、病原快速準確檢測、應急疫苗快速高效制備等相關應急技術的研究、開發與儲備,組織相關資質企業對應急疫苗、診斷試劑、消毒防護物資等進行生產與儲備[30].

3.2 非洲馬瘟的治療

當發現非洲馬瘟疑似病例時,應按照法律法規的規定,及時報告,采取緊急控制和撲滅等強制性措施,同時采集樣本進行病原檢測.如確定病原,應立即撲殺患病馬群,按照規定將尸體深埋或焚毀[18].

條件充分時,可對輕微病馬進行治療.但針對非洲馬瘟沒有特異性療法,僅是支持療法.加強飼養管理,認真護理患病動物,保障優良飼料和清潔飲水,給予充分休息,減少使役,對癥用藥以輔助治療,如用非甾體抗炎藥緩解疼痛、發熱,用糖皮質激素穩定細胞膜、保持血管膜的完整性,使用抗生素預防細菌性繼發感染[18,39].治療時,應嚴格隔離、限制運動[33].

我國從未發生過非洲馬瘟.因此,當確診后,不建議治療,應直接撲殺處理.

4 展望

雖然我國是OIE 認可的非洲馬瘟無疫國,但必須吸收2018 年非洲豬瘟的慘痛教訓.因此,我們應時刻關注國外非洲馬瘟疫情形勢,及時溝通,開展交流與合作,做好相關疫苗研發、診斷和檢測等相關防控技術的儲備,加強口岸檢疫,加大邊境地區相關動物非洲馬瘟流行病學調查和媒介昆蟲驅殺等工作力度,將非洲馬瘟拒之于國門之外.當發生非洲馬瘟后,啟動應急方案,同時對未感染動物進行緊急免疫接種,由官方獸醫決定疫苗針對的血清型. 建議在國外外來動物疫病流行國家或地區單獨或合作設立實驗室進行相關外來動物疫病的研究,可豐富我國針對外來動物疫病的防控技術,提升針對外來動物疫病的應急反應能力,從而有利于我國外來動物疫病的防控,進而保護國內動物養殖業健康發展.

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