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肉桂多糖的提取純化及體外抗氧化和降血糖活性分析

2024-04-01 07:31張慧慧劉會平馬笑笑
食品工業科技 2024年7期
關鍵詞:肉桂蒸餾水糖苷酶

張慧慧,李 燦,劉會平,馬笑笑,張 欣,王 兵,劉 盈

(天津科技大學食品科學與工程學院,天津 300457)

肉桂(Cinnamomum cassia)是樟科樟屬植物肉桂的干燥樹皮,既可藥用也常被用做食品香料,調味品等,國家衛生部將其劃分為藥食同源物品,在我國廣泛分布于廣西等熱帶或亞熱帶地區[1]。肉桂中含有多種活性成分,如肉桂醛、萜類物質、苯丙素、多糖等,因此具有多種生物活性[2]。已有大量研究表明,肉桂具有抗氧化、抑菌抗炎、抗凝血、抗糖尿病等功能作用[3-7]。

目前已有的與各種肉桂多糖相關的研究主要如下:Al-Ajalein 等[8]用微波輔助的方法從肉桂樹皮中提取到一種低分子量果膠多糖,主要由葡萄糖、阿拉伯糖、半乳糖、半乳糖醛酸組成,研究發現其具有抗色素沉著過度和酪氨酸酶抑制作用。李勝男等[9]從肉桂水提物中分離純化出分子量為3630 Da 的中性多糖,主要由葡萄糖組成,具有良好的DPPH·和ABTS+·清除能力。張銘儒等[10]制備到主要由甘露糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖組成的肉桂多糖,并發現其可能通過調節糖脂代謝而顯示出對糖尿病小鼠降血糖作用。此外,于峰等[11]也發現肉桂多糖對四氧嘧啶誘發的實驗性糖尿病小鼠有顯著的降糖效果。

但不同來源的肉桂其活性物質的結構性質存在部分差異[12],關于某種特定資源肉桂多糖的研究鮮有報道?!胺莱侨夤稹笔菑V西防城港市特產,中國地理標志證明商標,資源豐富,品質獨特,故以防城港肉桂為原料,采用水提醇沉法提取肉桂多糖,探究其體外抗氧化活性及降血糖活性,以期為防城港肉桂資源的綜合利用提供理論基礎。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

肉桂 產自廣西省防城港;無水乙醇、正丁醇天津市江天化工技術股份有限公司;三氯甲烷 天津市化學試劑廠;2,1-二苯基-2-三硝基肼(DPPH)、2,2'-聯氨-雙(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二銨鹽(ABTS)、硫酸亞鐵、水楊酸、過氧化氫、鐵氰化鉀、氯化鐵等 麥克林生化科技有限公司;Sephadex G-200、無水葡萄糖、AB-8 大孔吸附樹脂、葡聚糖標準品 北京索萊寶科技有限公司;阿卡波糖、α-淀粉酶(5 U/mg)、α-葡萄糖苷酶(7.5 U/mg) 上海源葉生物科技有限公司;所用試劑均為分析純。

SE-2000 高速粉碎機 圣象電器有限公司;ESJ205-4 電子天平 Mettler Toledo;DF-101S 集熱式恒溫加熱磁力攪拌器 杭州旌斐儀器科技有限公司;RE-52A 旋轉蒸發儀 上海亞榮生化儀器廠;H1850R 高速冷凍離心機 湖南湘儀離心機儀器有限公司;BS-100A 自動部分收集器 上海滬西分西儀器有限公司;FD-1A-50 真空冷凍干燥機 上海比郎儀器制造有限公司;Agilent 1260 高效液相色譜儀美國安捷倫科技公司;VECTOR-220 傅里葉紅外光譜儀 德國布魯克公司;Multiskan GO 酶標儀美國Thermo Fisher 公司。

1.2 實驗方法

1.2.1 肉桂多糖的提取 肉桂用高速粉碎機粉碎,將粉末用95%乙醇攪拌5 h 進行脫脂脫色[13],結束后濾去乙醇溶液,沉淀于55 ℃徹底干燥。采用傳統水提醇沉法提取肉桂多糖。熱水浸提2 次后合并濾液,真空旋轉蒸發至原四分之一體積,隨后邊攪拌邊加入無水乙醇至溶液濃度為60%,4 ℃沉淀18 h。結束后,離心(4000 r/min)15 min 分離沉淀,散至無乙醇味,加入蒸餾水復溶,冷凍后真空干燥。肉桂粗多糖得率計算公式如下:

1.2.2 單因素實驗 為探究不同提取條件對肉桂多糖得率的影響,選定提取溫度90 ℃,時間2 h,液料比20:1(mL/g),提取1 次,醇沉濃度60%的條件,考察浸提溫度(60、70、80、90、100 ℃),浸提時間(1、2、2.5、3、3.5 h),液料比(10:1、15:1、20:1、25:1、30:1 mL/g),浸提次數(1、2、3、4 次)對粗多糖得率的影響。

1.2.3 響應面優化試驗 根據單因素實驗結果,固定浸提次數2 次,選擇三個變量:浸提溫度、浸提時間、液料比,運用Design Expert 13 軟件進行三因素三水平的Box-Behnken 試驗設計。試驗因素與水平見表1。

表1 響應面試驗的因素與水平Table 1 Factors and levels of response surface experiment

1.2.4 肉桂多糖的純化 通過Sevag 法(V三氯甲烷:V正丁醇=4:1)去除蛋白質,取Sevag 試劑與4 倍體積粗多糖溶液混合并振蕩,離心,直至不出現蛋白層,重復約7 次。然后將除蛋白后的粗多糖溶液通過預處理后的AB-8 大孔吸附樹脂層析柱以恒流泵30 r/min的流速進行脫色[14],將脫色成功的溶液濃縮,蒸餾水透析72 h,冷凍干燥后獲得粗多糖。配制20 mg/mL 的多糖溶液,過0.22 μm 濾膜后加樣至Sephadex G-200 層析柱,以蒸餾水作洗脫劑,流速為3 min/mL,每管收集2 mL。用苯酚-硫酸法[15]測定每管洗脫液中多糖含量,繪制出洗脫曲線,其中洗脫曲線的橫坐標為收集的試管號,縱坐標為490 nm 處洗脫液的吸光度值。收集曲線峰管中的洗脫液,冷凍干燥得純化的肉桂多糖,命名為CCP。

1.2.5 CCP 含量測定 采用苯酚-硫酸法[15]測定CCP 的總糖含量,其中標準品是無水葡萄糖,標準曲線為葡萄糖含量-吸光度值圖。具體操作如下:

分別取0.1 mg/mL 葡萄糖標準溶液0、0.2、0.4、0.6、0.8、1 mL 于玻璃試管,補充蒸餾水至總體積為1 mL,隨后各加入1 mL 6%苯酚溶液和5 mL濃硫酸,振蕩混勻后室溫靜置10 min,沸水浴15 min,降溫后測定各試管溶液在490 nm 處的吸光度。將CCP 配制成0.1 mg/mL 的溶液,取1 mL 按照上述方法處理后測定溶液的吸光度值。根據標準曲線計算CCP 的總糖含量,計算公式如下:

式中,X 為樣品組吸光度值代入標準曲線后所得葡萄糖含量(mg);m 為樣品質量(mg)。

1.2.6 CCP 相對分子質量 將葡聚糖標準品(T10、T40、T70、T110、T500、T2000)及CCP 各自溶解在蒸餾水中(1 mg/mL)并通過0.22 μm 濾膜。以超純水作流動相,采用高效液相色譜儀中示差檢測器和凝膠色譜柱對所備樣品進行檢測,運行參數為柱溫30 ℃,進樣體積20 μL,洗脫速度0.6 mL/min。根據各標準品保留時間-分子量lg 值所得的標準曲線計算CCP 的相對分子質量,計算公式如下:

式中,y 為樣品保留時間代入標準曲線后所得的值。

1.2.7 CCP 的傅里葉紅外光譜分析 稱取1 mg CCP和150 mg 干燥KBr 置于研缽并快速研磨成粉末,在12 MPa 壓力下壓成均勻透光的薄片。通過傅里葉紅外光譜儀在4000~400 cm-1范圍以4 cm-1的分辨率識別CCP 的特征吸收峰,掃描16 次。

1.2.8 CCP 的1H 核磁共振檢測 稱取50 mg CCP,用0.5 mL D2O 充分溶解并移入核磁管中,利用DPX-400 核磁共振波譜儀記錄1H 譜。

1.2.9 剛果紅分析 參考Ma 等[16]的方法,配制濃度為0.5 mg/mL CCP 溶液、50 μmol/L 剛果紅溶液和1 mol/L NaOH 溶液。取2 mL CCP 溶液和等體積剛果紅溶液,再加入不同體積的蒸餾水和NaOH溶液,最終使NaOH 濃度分別為0、0.05、0.1、0.15、0.2、0.3、0.4 mol/L,室溫下反應10 min 后,使用紫外分光光度計在400~600 nm 范圍內測定不同梯度溶液的最大吸收波長。

1.2.10 熱重分析 稱取5 mg CCP 樣品置于坩堝中,設置初始溫度為30 ℃,結束溫度為600 ℃,以10 ℃/min 的加熱速度進行熱力學測試。

1.2.11 CCP 的體外抗氧化活性測定 實驗參考的方法均略有改動,具體方案如下。

1.2.11.1 DPPH 自由基清除能力測定 方法參考Deng 等[17],配制0.2 mmol/L DPPH 無水乙醇溶液,不同濃度CCP 溶液(0.05、0.1、0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、6.0 mg/mL),取1 mL CCP 溶液與2 倍的DPPH無水乙醇溶液混勻,37 ℃黑暗反應30 min,檢測溶液在517 nm 處的吸光度值。同時,以VC為陽性對照。

式中,A1是CCP 溶液組吸光度值;A2是DPPH無水乙醇換成無水乙醇;A0是多糖溶液換成蒸餾水。

1.2.11.2 ABTS+自由基清除能力測定 方法參考Thambiraj 等[18],配制ABTS+·工作液(等體積混合7 mmol/L ABTS 和2.45 mmol/L 過硫酸鉀,用蒸餾水將混合液在734 nm 處的吸光度值調整為0.7±0.02)。取0.4 mL 不同濃度的CCP 溶液(同1.2.11.1)與4 mL 工作液混勻,黑暗反應5 min,檢測溶液在734 nm 處的吸光度值。同樣以VC為陽性對照。

式中,A1是CCP 溶液組吸光度值;A2是ABTS+·工作液換成蒸餾水;A0是多糖溶液換成蒸餾水。1.2.11.3 羥自由基清除能力測定 方法參考Zhang等[19],準備6 mmol/L 的硫酸亞鐵溶液和水楊酸·無水乙醇溶液、0.1%的過氧化氫溶液、不同質量濃度的CCP 溶液(同1.2.11.1)。取1 mL 多糖溶液依次加入等體積的三種試劑并充分混合,37 ℃反應30 min 后,檢測混合液在510 nm 處的吸光度值。以VC為陽性對照。

式中,A1是CCP 溶液組吸光度值;A2是過氧化氫溶液換成蒸餾水;A0是多糖溶液換成蒸餾水。

1.2.11.4 總還原力測定 方法參考Chen 等[20],配制0.2 mol/L pH6.6 的磷酸緩沖液、1%鐵氰化鉀、10%三氯乙酸、0.1%氯化鐵、不同質量濃度的CCP溶液(同1.2.11.1)。將1 mL 多糖溶液、2.5 mL 的磷酸緩沖液和鐵氰化鉀溶液混勻,50 ℃水浴20 min。冷卻后再加2.5 mL 三氯乙酸,離心后取上清2.5 mL,加入等體積蒸餾水和0.5 mL 氯化鐵溶液,檢測混合溶液在700 nm 處的吸光度值,最終以吸光度值大小表示總還原力的強弱。以VC為陽性對照。

1.2.12 CCP 的α-淀粉酶抑制活性 方法參考Cao等[21],但有改動。用0.1 mol/L 的PBS 配制不同質量濃度(0.05、0.1、0.25、0.5、0.75、1.0、1.5 mg/ mL)的肉桂多糖溶液,酶活力為50 U/mL 的α-淀粉酶溶液以及1%的可溶性淀粉溶液。取多糖樣品和α-淀粉酶溶液各30 μL,37 ℃反應10 min,再加入同體積可溶性淀粉溶液,沸水浴15 min,迅速冷卻后向其中加入50 μL DNS,然后95 ℃加熱5 min,冷卻后加入500 μL 蒸餾水,檢測溶液在540 nm 處的吸光度值,以阿卡波糖為陽性對照。

式中,A1是CCP 溶液組吸光度值;A2是將α-淀粉酶溶液換成PBS;A3是將多糖溶液換成PBS。

1.2.13 CCP 的α-葡萄糖苷酶抑制活性 方法參考Xu 等[22],但有改動。用0.1 mol/L 的PBS 配制1.2.12中的多糖溶液,1 U/mL 的α-葡萄糖苷酶溶液、5 mmol/L 的4-硝基苯基-β-D-吡喃葡萄糖苷(PNPG)。取多糖溶液與α-葡萄糖苷酶各40 μL 混勻,37 ℃孵育10 min,然后加入40 μL PNPG,同溫度再孵育5 min,再加入100 μL Na2CO3溶液(1 mol/L)終止反應并顯色,檢測溶液在405 nm 處的吸光度值。陽性對照為阿卡波糖。

式中,A1是CCP 溶液組吸光度值;A2是將α-葡萄糖苷酶溶液換成PBS;A3是將多糖溶液換成PBS。

1.3 數據處理

實驗設三次平行,數據以平均值±標準差表示。運用Design Expert 13、Origin Pro 2021、Graph Pad Prism 8 軟件對實驗數據進行響應面分析與統計學分析。

2 結果與分析

2.1 單因素實驗結果

肉桂多糖得率隨提取溫度的升高而升高,溫度達到90 ℃時,得率為3.22%,溫度繼續升高到100 ℃時,多糖的溶出量基本穩定,多糖得率并未再提升。因此選擇80、90、100 ℃三個溫度點參與響應面設計。

浸提時間高于2.5 h 之后,多糖得率的升高速率趨于平緩,可見長時間的浸提不會提升得率,可能是后期出現了雜質的溶出??紤]到提取效率,選取2、2.5、3 h 繼續響應面試驗。

溶劑在一定范圍內增加可能使細胞內外濃度差增大,從而使多糖更多地溶出。液料比在20:1 mL/g之后多糖得率開始下降,可能是隨著溶劑量的增加,此時多糖成分提取已比較充分,升高的壓力差導致其它溶質溶出[23]。因此選擇15:1、20:1、25:1 mL/g作為響應面試驗水平。

從圖1 可以看到,當浸提次數超過2 時對肉桂多糖得率的影響并不明顯,考慮總體提取時間、效率等因素,確定提取次數為2 次。

圖1 不同單因素條件下的肉桂多糖提取效果Fig.1 Extraction efficiency of Cinnamomum cassia polysaccharide with different single factor conditions

2.2 響應面試驗結果

2.2.1 試驗設計與結果 表2 是響應面試驗設計方案及最終結果,對此結果進行多元擬合分析,獲得預測模型方程:Y=3.32+0.1425A+0.1988B+0.1213C+0.0375AB+0.0175AC+0.0400BC-0.2280A2-0.2755B2-0.3455C2。

表2 響應面試驗設計及結果Table 2 Response surface experiment design and results

2.2.2 各因素交互作用分析 方差分析由表3 可見,該模型差異性(P<0.0001)極顯著,失擬項(P>0.05)不顯著,說明模型擬合較好;同時根據P值可知[24],回歸模型的一次項影響均極顯著(P<0.0001),交互項AC 影響不顯著(P>0.05),AB、BC 影響顯著(P<0.05),二次項均影響極顯著(P<0.0001)。由F值大小可知,試驗中各因素對得率的影響順序為(B)時間>(A)溫度>(C)液料比。

表3 回歸模型方差分析結果Table 3 Variance analysis for response surface quadratic model

由圖2 可以看出,響應面圖表面相對陡峭,等高線輪廓形狀為橢圓形,相對致密,說明這些提取因素共同影響著肉桂多糖得率[25],但可以看出圖2B、2b 中這些形狀更為明顯,即浸提時間和液料比的交互作用對多糖得率的影響最為顯著,這也與方差分析中交互項的P值對應;所有響應面均開口向下,表明回歸模型具有極值點[25],此時理論提取工藝為溫度91.98 ℃,時間2.67 h,液料比20.67:1(mL/g),預測得率為3.39%。綜合操作等實際因素,調整提取條件為溫度90 ℃,時間2.5 h,液料比20:1(mL/g),以此條件進行3 次實驗的平均得率為3.22%,與理論值的相對誤差為0.17%。結果表明了模型的適用性及條件優化的成功[24]。

圖2 顯著性交互作用因素對多糖得率影響的響應面圖(A、B)和等高線圖(a、b)Fig.2 Response surface diagram (A, B) and contour diagram(a, b) of the influence of significant interaction factors on polysaccharide yield

2.3 肉桂多糖的純化

2.3.1 肉桂多糖的純化 由圖3 可知,肉桂多糖通過Sephadex G-200 層析柱純化后主要得到一個組分,收集洗脫曲線9、10 管洗脫液,冷凍干燥后備用。

2.3.2 CCP 的多糖含量 由葡萄糖標準品獲得的標準回歸方程為y=5.5064x+0.1268,R2=0.9967,通過計算得出CCP 總糖含量為90.11%±1.24%。

2.3.3 CCP 相對分子質量 由葡聚糖標準品得到標準回歸方程為y=-0.3555x+9.3736,R2=0.9906。經計算CCP 的相對分子質量為1.95×106Da。

2.4 傅里葉紅外光譜分析

CCP 的紅外光譜圖(圖4)如下,3416 cm-1附近出現的強吸收峰歸因于O-H 的伸縮振動,表明分子間或分子內氫鍵的存在[26]。2924 cm-1附近的吸收峰歸因于C-H 的伸縮振動[27]。1739 cm-1處的吸收峰是酯羰基的典型特征[28]。1631 cm-1處是C=O 吸收峰[29]。1420 cm-1處的吸收峰歸因于C-O 基團的伸縮振動[30]。1200~1000 cm-1之間的三個吸收峰表明存在吡喃糖環[31]。927 cm-1和851 cm-1左右的峰表明多糖中可能存在β-型糖苷鍵和α-型糖苷鍵[32]。

圖4 CCP 的傅里葉紅外光譜圖Fig.4 Infrared spectroscopy of CCP

2.5 CCP 的1H 譜分析結果

在1H 譜圖(圖5)中,未被標注的最強信號峰屬于D2O 溶劑峰;δH4.3~5.9 ppm 是異頭質子信號區,通常異常區域內化學位移大于5.0 ppm 的異頭質子對應α構型,大于4.3 ppm 的異頭質子對應β構型[30,33],由1H 譜圖結果可知,CCP 存在α和β型糖殘基,這與紅外光譜分析結果一致;此外,δH3.5~4.0 ppm 區域是糖環的質子信號[19]。

圖5 CCP 的1H 核磁共振譜圖Fig.5 1H nuclear magnetic resonance spectrogram of CCP

2.6 CCP 的剛果紅分析

剛果紅染料能與含有三股螺旋構象的多糖形成絡合物,它的存在會使最大吸收波長與剛果紅溶液相比發生紅移,但隨著NaOH 濃度增大,絡合物結構被破壞,溶液最大吸收波長會下降[34]。圖6 顯示了兩組溶液在掃描范圍內整體吸光度值的變化;圖7 可以看到,在不同濃度NaOH 溶液中,剛果紅和肉桂多糖混合液的最大吸收波長并未發生紅移后再下降的現象,表明CCP 可能不含三股螺旋結構[19]。

圖6 剛果紅和剛果紅+CCP 溶液(不含NaOH)的吸光度值Fig.6 Absorbance value of Congo red and Congo red+CCP solution (without NaOH)

圖7 剛果紅和剛果紅+CCP 溶液的最大吸收波長示意圖Fig.7 Trends of maximum absorption wavelengths of Congo red and Congo red+CCP solution

2.7 CCP 的熱重分析

CCP 的熱失重過程分三個階段進行(圖8)。第一階段發生在60 ℃左右,失去其重量的6.16%,歸因于多糖失去吸附水;第二階段發生的溫度范圍是240~360 ℃,失去其重量的74.11%,表明多糖在這一溫度范圍內發生了強烈的分解反應;最后,在400~600 ℃溫度范圍內,多糖重量變化趨于平緩,為緩慢碳化階段,大部分變成灰分和無機成分。

圖8 CCP 的熱重分析Fig.8 Thermogravimetric analysis of CCP

2.8 CCP 的體外抗氧化活性

許多因素會影響抗氧化活性,單一的抗氧化模型無法完全反映樣品各方面的抗氧化能力[35],因此選擇多種模型評估CCP 的抗氧化能力。

2.8.1 DPPH 自由基清除能力 DPPH 自由基常被用來評估還原物質,是研究活性物質對自由基清除能力的有用試劑[36]。由圖9 可以看出,在0.05~6 mg/mL濃度范圍內,CCP 對DPPH·的清除能力逐漸增強,但后面增加緩慢。在6 mg/mL 時的清除率達到81.32%,肉桂多糖和VC清除DPPH·的IC50值分別為0.191、0.008 mg/mL。

圖9 CCP 的抗氧化能力Fig.9 Antioxidant capacity of CCP

2.8.2 ABTS+自由基清除能力 ABTS+自由基清除實驗是確定供氫和斷鏈抗氧化劑活性的有效方法[36]。如圖9 所示,在實驗劑量范圍內,ABTS+·清除率與肉桂多糖濃度呈正相關,肉桂多糖和VC清除ABTS+·的IC50值分別為2.835、0.0002 mg/mL。

2.8.3 羥自由基清除能力 羥自由基是在人體內產生且損害生物體的高活性物質,因此,測試對這些生物相關自由基的清除能力是很有必要的[37]。如圖9所示,肉桂多糖也具有一定的羥自由基清除能力,最大濃度6 mg/mL 時的清除率為60.23%,肉桂多糖和VC清除羥自由基的IC50值分別為3.221、0.149 mg/mL。

2.8.4 總還原能力 該實驗是測試活性物質對三價鐵的還原能力,被廣泛用于分析植物提取物的抗氧化活性[38]。實驗結果中吸光度值直接反映總還原力的大小,如圖9 所示,肉桂多糖的總還原力隨肉桂多糖的質量濃度升高而增大,在6 mg/mL 時的最大吸光度值約為1.18,此時抗壞血酸的吸光度值約為1.85。

在4 種抗氧化試驗中,VC濃度達到1 mg/mL 時的清除率都能達到95%以上,而CCP 對DPPH·的清除效果最好。此外對比發現CCP 對DPPH·,ABTS+·的清除率沒有李勝男等[9]測試的結果高,有研究顯示小分子量多糖比大分子量的有更強的抗氧化活性[22],而本研究分離到的肉桂多糖分子量遠大于李勝男等[9]的(3630 Da),可能是此原因導致兩者抗氧化能力不同。但與同樣的高分子量羊棲菜多糖相比,肉桂多糖的部分自由基(DPPH·、·OH)清除能力更高,這可能與多糖的其它結構有關[20]。

2.9 CCP 的體外降血糖活性

2.9.1α-淀粉酶抑制活性α-淀粉酶的活性被抑制后可以延緩碳水化合物的消化,降低葡萄糖的吸收率,從而減緩餐后血糖的升高速度[39]。試驗結果見圖10,在多糖最大濃度1.5 mg/mL 時,抑制率為79.73%。肉桂多糖、阿卡波糖的IC50值對應為0.189、0.003 mg/mL。

圖10 CCP 的α-淀粉酶抑制曲線Fig.10 α-Amylase inhibition curve of CCP

2.9.2α-葡萄糖苷酶抑制活性α-葡萄糖苷酶參與人體糖代謝,抑制其活性可以延緩腸道中碳水化合物的吸收,從而達到降糖效果[40]。由圖11 所示,同濃度范圍內,CCP 對α-葡萄糖苷酶的抑制率不如α-淀粉酶,但也可以達到67.13%,肉桂多糖、阿卡波糖的IC50值分別為0.340、0.004 mg/mL。

圖11 CCP 的α-葡萄糖苷酶抑制曲線Fig.11 α-Glucosidase inhibition curve of CCP

肉桂多糖對兩種酶顯示出較好的抑制活性,但遠低于阿卡波糖,然而與其它研究相比,肉桂多糖對兩種酶活力仍具有更好的抑制能力[22,41]。

3 結論

肉桂作為藥食同源物品,其內各種活性成分得到了廣泛的關注。本研究優化了肉桂多糖的提取工藝,最佳工藝平均得率為3.22%。多糖經脫蛋白、脫色、葡聚糖凝膠純化后,總糖含量為90.11%±1.24%,相對分子質量為1.95×106Da。CCP 部分結構測定顯示其可能存在α-型和β-型糖苷鍵以及吡喃糖環,不含有三股螺旋結構。熱重結果顯示其具有較好的熱穩定性,230 ℃以下穩定。在活性實驗中,CCP 顯示出較好的自由基清除能力和較高的總還原力;此外,CCP 也通過α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶抑制試驗而顯示出具有良好的降血糖活性。

由于本研究獲得的多糖分子量較大,其結構特征可能更為復雜,因此研究主要集中于肉桂多糖的提取純化、部分一級結構分析及活性探究,在未來的研究中將借助更多方法及分析儀器,表征肉桂多糖一級結構,深入探討其與生物活性之間的關系。

本研究從防城肉桂中提取到一種新的高分子量多糖,該多糖在功能性食品或醫藥應用方面具有潛在的抗氧化及降血糖特性,上述結果可能為不同來源肉桂多糖的結構及活性研究提供參考,同時也為肉桂在食品藥品等領域的開發利用提供理論依據。

? The Author(s) 2024.This is an Open Access article distributed under the terms of the Creative Commons Attribution License (https://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/).

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