食用油中DNA提取方法的研究進展*

張海亮，吳亞君，陳銀基，鞠興榮，陳穎

1(中國檢驗檢疫科學研究院，北京，100123) 2(南京財經大學食品科學與工程學院，江蘇南京，210003)

食用油中DNA提取方法的研究進展*

張海亮1，2，吳亞君1，陳銀基2，鞠興榮2，陳穎1

1(中國檢驗檢疫科學研究院，北京，100123) 2(南京財經大學食品科學與工程學院，江蘇南京，210003)

利用基于DNA的分子生物學手段對食用油進行品種鑒定、摻假檢測已經成為研究的熱點，而其瓶頸就是DNA提取。DNA提取是分子生物學的基礎技術，能否提取到高質量的DNA，是食用油研究的關鍵。文中從樣品的前處理、裂解和分離、DNA富集和純化3個方面分別介紹了幾種常用的食用油中DNA提取方法，并對其研究進展進行了概述。

食品安全，食用油，DNA提取

近年來，隨著食品安全事故的頻發，食品安全越來越成為人們關注的焦點。食用油安全是食品安全的重要內容之一。食用油摻假摻雜不僅威脅著人們的身體健康，而且侵犯消費者利益，影響消費信心，不利于食用油產業的健康發展。運用分子生物學技術對食用油進行品種鑒定及摻假檢測是新發展起來的一種檢測方法，與傳統方法的理化檢測和儀器分析檢測相比(如測定過氧化值、脂肪酸比例、色譜分析等)，具有檢測靈敏度高、可靠性強、操作簡單和省時省力等優點。

運用分子生物學技術對食用油進行品種鑒定及摻假檢測，首要前提是從油脂中提取出適合PCR擴增的DNA。由于精煉食用油生產需經過高溫及高壓等處理，其中的DNA降解為大小不一的碎片，且含量極低，這給DNA提取造成了很大困難。因而DNA提取技術成為食用油PCR檢測技術的瓶頸，是食用油檢測成功與否的關鍵所在。

國際上研究人員一直在努力探索食用油中DNA的提取技術。例如Pauli等［1］從粗制大豆油中提取DNA，但這種方法并不適合精煉植物油。另外有很多關于從橄欖油中成功提取DNA的報道［2－5］，主要原因是初榨橄欖油不經過精煉，極大地避免DNA的破壞和損失。1997年Maja Hellebrand等［6］首次從精煉菜籽油中提取到菜籽DNA，并證明可用于物種鑒定。2010年Joana Costa等［7］利用改良的試劑盒法從精煉植物油中提取大豆DNA，這是國外第一次報道從精煉植物油中檢測到大豆DNA。

國內也有學者建立了食用油中DNA提取的方法。覃文等［8］在2002年就對油脂中轉基因成分的檢測進行了初步研究，并對市售的食用油進行了DNA提取，利用PCR-GeneScan技術對其進行了檢測，且檢測到植物內源基因。2004年金紅等［9］對大豆色拉油中DNA的提取方法進行優化，采用PCR檢測出大豆的外源基因。徐偉麗等［10］通過試劑盒改良，建立了一種穩定有效、重復性好、操作簡便的油脂中DNA提取方法。白立群等［11］利用冷凍干燥技術對含有DNA的水相進行濃縮，建立了一種油脂中DNA提取的新方法，可用于轉基因檢測。

國內外在食用油中DNA提取方面所考慮的技術要點主要包括:(1)樣品的前處理;(2)裂解和分離;(3)DNA富集和純化。本文將針對這3個技術環節對目前的食用油中DNA提取方法進行介紹。

1 樣品前處理

由于食用油是一種高度加工和純化的產品，為了盡可能多的從油脂中分離殘留的DNA分子，合理地對樣品進行萃取和濃縮是必要的。目前常用的前處理方法是乳化法和濃縮法。

1.1 乳化法

將油相與水相或有機相進行充分的乳化處理，使油脂中的DNA保留在水相中，是提取DNA的關鍵。Clarissa Consolandi等［12］將橄欖油與正己烷混合，充分乳化后離心，并用含有吐溫的裂解液和蛋白酶K分別處理上清和沉淀，經孵育和離心后，各分離相用預冷的異丙醇沉淀DNA，并用體積分數70%冷乙醇清洗，最后將DNA溶解于水中。實驗利用多重PCR對提取的DNA進行檢測，結果顯示該方法不僅效率高，而且成本低，樣品量小，僅需2mL橄欖油，便可提取到50μL總量為1.35μg的DNA，比Wizard試劑盒的起始檢測油量低50倍。Maria等［13］在此法的基礎上進行改進，將CTAB裂解液和正己烷等體積混合，并在60℃條件下與橄欖油充分乳化，提取結果顯示改良的乳化法顯著優于CTAB法和正己烷法。

1.2 濃縮法

由于精煉油經過復雜的處理后DNA含量極少，因此如果能用適當的方法將含有DNA的大量水相進行濃縮，將大大提高后續的提取效果。白立群等［11］建立了一種有效的大豆精煉油DNA提取方法——冷凍干燥法。冷凍干燥法將食用油與水充分乳化，利用冷凍干燥技術將水分完全蒸發，再使用CTAB裂解液從沉淀中提取和分離DNA。采用該方法從5種市售一級大豆油中提取DNA，成功檢測到大豆內源Lectin基因、外源CaMV35S啟動子、NOS終止子。

2 裂解和分離

DNA提取中常用的裂解液主要有CTAB、SDS、異硫氰酸胍等，基本原理是通過裂解液裂解細胞并分離DNA，利用酚/三氯甲烷等有機溶劑除去蛋白質等雜質，并加入異丙醇或乙醇等沉淀DNA，最終用TE緩沖液或雙蒸水溶解DNA。目前常用的裂解和分離方法適合于動植物及微生物中DNA的提取，因此根據食用油組成及理化性質的不同，需要對已有的方法進行改良。

2.1 CTAB(十六烷基三甲基溴化銨)法

CTAB法被廣泛的應用于植物葉子、種子、微生物以及加工食品中的DNA提取，是一種經典的DNA提取方法［14－15］。其基本原理是:CTAB是一種陽離子去污劑，它能與核酸形成復合物，這些復合物在低鹽溶液中因溶解度的降低而沉淀，而在高鹽溶液中可解離，從而使DNA與多糖等雜質分開，再用乙醇沉淀DNA 而除去 CTAB。自從 Murray等人［16－17］首次使用CTAB法成功的提取植物基因組DNA，CTAB發展迅速，不斷得到改進，已經成為分子生物學中提取DNA 的最常用的方法之一［18－20］。

根據食用油的性質和特點，經改良后的CTAB法更加適合食用油DNA的提取。Innocenzo Muzzalupo［4］利用CTAB法從橄欖油中提取 DNA，添加了蛋白酶K，并向CTAB提取緩沖液中加入2%的巰基乙醇，不僅能使蛋白質充分變性，還能夠保護DNA的完整性，使提取的DNA更適合進行RAPD-PCR擴增。Matteo Busconi［21］等通過提高 CTAB 的濃度，并使用三氯甲烷/辛醇代替三氯甲烷/異戊醇抽提，提高了橄欖油中DNA的提取效率。王亞等［22］通過向CTAB提取緩沖液中加入PVP和巰基乙醇，經酚/三氯甲烷抽提，最后用異丙醇和醋酸銨沉淀油脂中DNA，取得了不錯的效果。

CTAB法提取DNA成本較低，不需要昂貴儀器和試劑，操作簡單，具有普遍的適用性。但該法比較耗時，容易造成提取過程中DNA的損失，而且提取過程中用到酚、三氯甲烷等有毒試劑，因此CTAB法在食用油DNA提取方面還具有一定的局限性。

2.2 SDS(十二烷基磺酸鈉)法

SDS法也是一種分子生物學中常用的DNA提取方法。與CTAB不同，SDS是一種陰離子去垢劑，在高溫條件下能裂解細胞，使染色體離析、蛋白變性，同時SDS能與蛋白質及多糖結合成復合物，釋放出核酸。通過提高鹽濃度并降低溫度，使SDS-蛋白質復合物的溶解度變得更小，從而使蛋白質及多糖雜質沉淀。上清液經酚/氯仿反復抽提后用乙醇沉淀DNA。

傳統的SDS提取緩沖液，包含Tris-HCl，EDTA，NaCl，巰基乙醇和 SDS［23］。SDS 法最初也主要用于植物DNA的提?。?4］。在后來的應用中，SDS法經過一步步改良，不斷完善，所獲得的DNA質量和產量也逐漸提高，已經成為DNA提取的一種較好的方法。

根據食用油的特點和性質，Maja Hellebrand［6］等利用SDS法成功的從精煉菜籽油中提取到菜籽DNA。他們首先向預處理后的菜籽油加入SDS提取液，并添加蛋白酶K，后經酚/氯仿抽提，最后用乙醇沉淀DNA。結果發現，在粗制油和精煉菜籽油中均可以提取到DNA，并能成功進行 PCR擴增。許冬倩［25］等對SDS法進行改良，省去了酚/三氯甲烷抽提步驟，減少了大豆油DNA的損失，提取的DNA含量高，質量也足以保證PCR反應的要求。

SDS法操作簡單而且比較溫和，也可提取到高分子量的DNA，但所得到的產物含雜質較多，有一些報道稱用SDS法提取的DNA的純度不如CTAB法提取的高［26－28］。

2.3 異硫氰酸胍(GuSCN)法

異硫氰酸胍是一種蛋白質變性劑，它能使細胞結構迅速被破壞，使核酸從細胞中釋放出來。同時高濃度的異硫氰酸胍還使細胞內的核酸酶失活，使釋放出的核酸不被降解。

異硫氰酸胍除了用于一般動植物DNA的提取之外，還可用于食用油等深加工產品的DNA提取。Simona Pafundo［29］等使用 Nucleospin Plant試劑盒提取橄欖油中的 DNA，并將提取的 DNA成功的用于AFLD分析，而該試劑盒的裂解液中的主要成分之一為異硫氰酸胍。Wizard試劑盒裂解液中也含有異硫氰酸胍成分。覃文等［8，30］使用Wizard試劑盒提取食用油中的DNA，經實時熒光PCR檢測出大豆內源基因Lectin以及外源抗除草劑基因EPSPS，成功的為食用油脂進行核酸類生物性檢測提供了一種簡捷有效的方法。徐偉麗等［10］針對色拉油中DNA含量低，破壞嚴重的特點，采用Wizard基因組純化試劑盒成功檢測出大豆的內源基因、抗除草劑基因等。María José Chapela［31］等曾利用 Wizard DNA 純化試劑盒提取金槍魚罐頭中DNA，結果顯示提取的金槍魚DNA質量良好，并成功地用于PCR擴增。

3 DNA富集和純化

3.1 磁珠法

磁珠法的核心是將細胞中游離出來的核酸分子吸附到磁性顆粒表面，蛋白質等雜質不被吸附而留在溶液中。在磁場作用下，使磁性顆粒與液體分開，回收顆粒(即磁珠-DNA混合物)，再用洗脫液洗脫即可以得到純凈的DNA。

磁珠法提取的DNA純度好，質量高，已經被用于多種復雜及深加工食品的DNA提取。Catherine［32］等對比Wizard試劑盒磁珠，硅膠和羥基磷灰石3種材料吸附提取橄欖油中的DNA，提取發現Wizard磁珠試劑盒法對橄欖油DNA提取效果最好，提取的DNA可用于微衛星分析。Wu［2］等比較了Wizard磁珠純化試劑盒和CTAB法對大豆油DNA的提取效率，發現磁珠法提取DNA的lectin基因擴增效率更高。

磁珠法提取的DNA片段大，純度高，質量穩定可靠，而且磁珠法不需要離心、不需要加入多種試劑，操作簡單，符合核酸自動化提取要求，是未來核酸純化方法發展的一個重要方向。

3.2 離心柱法

離心柱法是將樹脂或硅膠膜固定在離心管中，在高鹽低pH值條件下，DNA選擇性吸附于離心柱內的樹脂或膜上，通過漂洗、離心等步驟，去除蛋白和多糖雜質，最后用低鹽高pH值的洗脫緩沖液將DNA從樹脂或硅膠膜上洗脫。

Joana Costa等［7］使用以離心柱法為原理的 Nucleospin DNA提取試劑盒從精煉油中提取到大豆DNA。Joana等［33］用 Nucleospin DNA 提取試劑盒成功地從大豆油精煉過程中堿煉、水洗、脫色、脫臭等各個環節的油脂產物中提取到高質量的DNA。Innocenzo Muzzalupo［5］等使用 QIAamp DNA 離心柱提取試劑盒提取橄欖油中DNA，能夠用于微衛星分析，進行橄欖油品種的鑒別。Rayda Ben Ayed［3］等比較了QIAamp DNA提取試劑盒，Wizard基因組純化試劑盒和CTAB法對橄欖油中DNA的提取效果，發現QIAamp DNA試劑盒提取DNA的效果最好，能夠用于物種鑒定。

欒鳳俠等［34］針對食用油脂中提取高純度和高得率DNA比較難的問題，通過對以離心柱為原理的試劑盒進行改良，用離心柱法從食用油脂中提取到了純度和濃度均比較高的DNA，并用實時熒光PCR技術成功地檢測出了食用油脂中的內源基因和外源基因。程紅梅等［35］通過將油和正己烷充分乳化，使殘存在油中的DNA交換到緩沖液中，并用自制的離心柱純化富集DNA，成功從大豆油中提取DNA。

3.3 擔體法

在食用油DNA提取過程中，通過添加一定量的DNA或RNA等物質作為擔體，能夠提高DNA的提取效率，而且不對檢測結果產生影響。擔體DNA或RNA一般都在沉淀DNA之前加入，而且擔體DNA或RNA的選擇，最好選擇與目標DNA的物種相差較遠的植物、動物或微生物DNA或RNA。

王彭等［36］在提取大豆油中DNA過程中，在用無水乙醇沉淀DNA時加入少量東北大豆黑衣33號DNA作為擔體，不僅能夠提高大豆油中DNA的得率，而且不會影響轉基因檢測的結果，從而為轉基因深加工產品檢測過程中的DNA提取提供了新的手段。覃文等［8］在用異丙醇沉淀油脂DNA之前加入植物基因組DNA作為擔體，效果良好。白立群［37］在大豆油中DNA富集過程中，比較了線性丙烯酰胺和鮭魚精DNA作為擔體的效果，發現前者富集的DNA擴增效率更高。Giménez等［13］在提取橄欖油中DNA過程中，也使用了線性丙烯酰胺作為擔體，且提取效果顯著。

4 結語

雖然CTAB法、SDS法提取的DNA純度能夠滿足分子生物學實驗的一般需要，但是還存在著一定的缺陷，如步驟繁雜，耗時長，DNA損失較大，提取的DNA質量不高等。另外，酚、三氯甲烷等有機溶劑有毒，有損操作者健康。磁珠法和離心柱方法多為一些商業試劑盒采用，它們均采用獨特的緩沖液體系，省去了酚/三氯甲烷抽提，減少了DNA的損失，操作簡單而高效，提取的DNA質量較高，但成本較高，提取量少。濃縮法和乳化法由于其提取步驟簡單，DNA損失較少，而且能極大的富集食用油中DNA。

國內外研究人員對食用油中DNA提取各種方法的提取效果進行了對比。欒鳳俠等［34］比較了CTAB法和離心柱法提取精煉大豆油中DNA的效果，結果表明離心柱法操作簡單快速，提取的DNA質量高，效果顯著優于CTAB法。Andreas Zimmermann等［38］比較了CTAB法，SDS法及離心柱法等9種DNA提取方法在提取大豆深加工產品中的效果，并從DNA質量和產量2個方面進行評價。他們發現，離心柱法提取的DNA量相對低，但是卻具有質量高、易進行PCR擴增等特點;相比之下，CTAB、SDS等方法雖然提取的DNA產量較高，但往往導致DNA質量較低，易含有PCR抑制劑。Angela Di Pinto等［39］也發現，試劑盒中采用的磁珠法和離心柱法與CTAB法和SDS法相比，含有相對較少的污染物和PCR抑制劑。

高質量DNA的提取是決定分子生物學實驗成敗的關鍵因素。食用油中DNA提取主要包括3個技術環節:(1)樣品的前處理;(2)裂解和分離;(3)DNA富集和純化，其中最重要的環節就是DNA的富集和純化。隨著科技的不斷發展，納米磁珠和生物膜等新型DNA吸附材料未來將會在食用油等深加工產品的DNA提取過程中發揮重大作用，并能極大的提高分子生物學中技術在食品檢測中的應用范圍。與此同時，還應當提升DNA的后續檢測技術的水平，提高其檢測靈敏度。

除此之外，隨著未來新型油料作物的增加，各種類油的出現，以及食用油摻假、摻雜現象的增加，快速的、高通量結合自動化系統的DNA提取方法的應用將會極大地降低提取時間和成本。

［1］Pauli U，Liniger U，Zimmermann A.Detection of DNA in soybean oil［J］.Z Lebensm Unters Forsch A，1998，207:264－267.

［2］Wu Yajun，Chen Ying，Ge Yiqiang，et al.Detection of olive oil using the Evagreen real-time PCR method［J］.Eur Food Res Technol，2008，227:1 117－1 124.

［3］Rayda Ben Ayed，Naziha Grati-Kamoun，Fabienne Moreau，et al.Comparative study of microsatellite profiles of DNA from oil and leaves of two Tunisian olive cultivars［J］.Eur Food Res Technol，2009，229:757－762.

［4］Innocenzo Muzzalupo，Massimiliano Pellegrino，Enzo Perri.Detection of DNA in virgin olive oils extracted from destoned fruits［J］.Eur Food Res Technol，2007，224:469－475.

［5］Innocenzo Muzzalupo，Enzo Perri.Recovery and characterisation of DNA from virgin olive oil［J］.Eur Food Res Technol，2002，214:528－531.

［6］Maja Hellebrand，Marion Nagy，Jorg-Thomas Morsel.Determination of DNA traces in rapeseed oil［J］.Z Lebensm Unters Forsch A，1998，206:237－242.

［7］Joana Costa，Isabel Mafra，Joana S.Amaral，et al.Detection of genetically modi?ed soybean DNA in refined vegetable oils［J］.Eur Food Res Technol，2010，230:915－923.

［8］覃文，董潔，鄧鴻鈴，等.PCR法定性檢測食用油脂中轉基因成分［J］.中國油脂，2002，27(2):4－6.

［9］金紅，程奕，趙昕，等.大豆色拉油中轉基因成分檢測技術研究［J］.華北農學報，2004，19(1):24－27.

［10］徐偉麗，杜明，徐德昌.色拉油中轉基因成分的PCR檢測［J］.生物信息學，2009，7(3):238－242.

［11］白立群，吳亞君，韓建勛，等.一種有效的大豆精煉油DNA提取新方法－冷凍干燥法［J］.食品與發酵工業，2009，35(12):155－159.

［12］Clarissa Consolandi，Luisa Palmieri，Marco Severgnini，et al.A procedure for olive oil traceability and authenticity:DNA extraction，multiplex PCR and LDR－universal array analysis［J］.Eur Food Res Technol，2008，227:1 429－1 438.

［13］Maria J Giménez，Fernando Pistón，Antonio Martín，et al.Application of real-time PCR on the development of molecular markers and to evaluate critical aspects for olive oil authentication［J］.Food Chemistry，2010，118:482－487.

［14］Khan I A，Awan F S，Ahmad A，et al.A modified miniprep method for economical and rapid extraction of genomic DNA in plants［J］.Plant Molecular Biology Reporter，2004，22:89a－89e.

［15］Vishal Bharmauria，Vivek Verma，Navjyoti Narang，et al.Efficient DNA isolation from Emblica officinalis for effective PCR［J］.Scientific Research and Essay，2010，5(1):105-109.

［16］Murray M G，Thompson W F.Rapid isolation of high molecular weight plant DNA［J］.Nucleic Acids Research，1980，8:4 321－4 325

［17］Taylor B，Powell A.Isolation of plant DNA and RNA［J］.Focus，1982，4:4－6.

［18］Scott O.Rogers，Arnold J.Bendich.Extraction of DNA from milligram amounts of fresh，herbarium and mummified plant tissues［J］.Plant Molecular Biology，1985，5:69－76.

［19］Muhammad A Lodhi，Ye Guangning，Norman F Weeden，et al.A simple and efficient method for DNA extraction from grapevine cultivars and vitis species［J］.Plant Molecular Biology Reporter，1994，12(1):6－13.

［20］Doyle J J，Doyle J L.Isolation of plant DNA from fresh tissue［J］.Focus，1990，12:13－15.

［21］Matteo Busconi，Chiara Foroni，Massimiliano Corradi，et al.DNA extraction from olive oil and its use in the identi?cation of the production cultivar［J］.Food Chemistry，2003，83:127－134.

［22］王亞.食用油DNA提取方法及轉基因成分檢測技術的研究［D］.合肥:安徽大學，2007.

［23］Stephen L Dellaporta，Jonathan Wood，James B Hicks.A plant DNA minipreparation:version II［J］.Plant Mol Biol Rep，1983，1(4):19－21.

［24］Thomas H Tai，Steven D Tanksley.A Rapid and inexpensive method for isolation of total DNA from dehydrated plant tissue［J］.Plant Molecular Biology Report，1990，8(4):297－303.

［25］許冬倩，郝義波.一種有效的油脂DNA的提取方法［J］.食品研究與開發，2008，29(10):42－45.

［26］易干軍，于曉英，霍合強，等.香蕉種質資源的AFLP鑒別與分類中DNA模板的制備［J］.果樹學報，2001，18(6):345－348.

［27］王彩虹，王倩，戴洪義，等.蘋果基因組AFLP分析的DNA模板的制備及技術體系的建立［J］.山東農業大學學報:自然科學版，2001，32(2):197－200.

［28］周明芹.SDS法和CTAB法提取蠟梅DNA質量的比較［J］.長江大學學報:自然科學版，2009，6(3):42－44.

［29］Simona Pafundo，Matteo Busconi，Caterina Agrimonti，et al.Storage-time effects on olive oil DNA assessed by Amplified Fragments Length Polymorphisms［J］.Food Chemistry，2010，123:787－793.

［30］覃文，董潔，鄧鴻鈴.實時熒光PCR定性定量檢測混合食用油脂中的花生油成分［J］.中國油脂，2006，31(10):73－76.

［31］María José Chapela，Carmen GSotelo，Ricardo I Pérez-Martín，et al.Comparison of DNA extraction methods from muscle of canned tuna for species identiWcation［J］.Food Control，2007，18:1 211－1 215.

［32］Catherine Breton，Delphine Claux，Isabelle Metton，et al.Comparative study of methods for DNA preparation from olive oil samples to identify cultivar SSR alleles in commercial samples:possible forensic applications［J］.Journal of Agriculture and Food Chemistry，2004，52:531－537.

［33］Joana Costa，Isabel Mafra，Joana S.Amaral，et al.Monitoring genetically modified soybean along the industrial soybean oil extraction and refining processes by polymerase chain reaction techniques［J］.Food Research International，2010，43:301－306.

［34］欒鳳俠，張洪祥，白月.食用油脂中DNA高效快速提取方法及實時熒光PCR檢測技術的研究［J］.中國油脂，2005，30(7):41－43.

［35］程紅梅，彭于發，金蕪軍，等.一種快速、簡便提取大豆油DNA的方法及轉基因大豆油的檢測［J］.中國農業科學，2007，40(5):1 069－1 072.

［36］王澎，金麗晨，耿志明，等.食用大豆油中DNA的快速提取和轉基因成分定性檢測［J］.江蘇農業學報，2008，24(6):940－943.

［37］白立群.大豆精煉油中痕量DNA的高效提取和評價方法研究［D］.北京:中國農業大學，2010.

［38］Andreas Zimmermann，Jürg Lüthy，Urs Pauli.Quantitative and qualitative evaluation of nine different extraction methods for nucleic acids on soya bean food samples［J］.Z Lebensm Unters Forsch A，1998，207:81－90.

［39］Angela Di Pinto，Vito Tony Forte，Maria Corsignano Guastadisegni，et al.A comparison of DNA extraction methods for food analysis［J］.Food Control，2007，18:76－80.

The Research Development of DNA Isolation in Edible Oil

Zhang Hai-liang1，2，Wu Ya-jun1，Chen Yin-ji2，Ju Xing-rong2，Chen Ying1
1(Institute of Food Safety，Chinese Academy of Inspection and Quarantine，Beijing 100123，China)2(College of Food Science and Engineering，Nanjing University of Finance and Economics，Nanjing 210003，China)

To verify the production cultivar and authenticity of edible oil using DNA－based molecular methods has become the hot research.however，the bottle neck of the research is DNA isolation.DNA isolation is one of the basic techniques of molecular biology，and extracting DNA with high quality is the key of edible oil research.In this paper，we described several commonly used methods of DNA isolation in edible oil and their research developments in three aspects:(1)sample preparation;(2)lysis and isolation;(3)enrichment and purification of DNA.

food safety，edible oil，DNA isolation

碩士研究生(陳穎教授為通訊作者)。

*科技部轉基因重大專項(2008ZX08012);中央級公益性科研院所公益性行業(質檢)科研專項(2009JK033)

2010－09－04，改回日期:2010－09－09