實驗動物飲用水機制無菌水與高壓滅菌水的對比效果觀察

吳金花，丁 琦

（江西省藥物研究所，江西南昌 330029）

隨著生命科學的不斷發展，人們對實驗動物的質量要求也越來越高，清潔級以上的實驗動物使用量也隨之增大，清潔級實驗動物飲用水和屏障系統內環境衛生使用水用量越來越大，并要求達到無菌，應用純水機制無菌水是一個很好的思路。目前實驗動物飲用水一般采用高壓滅菌（121℃，30min），有的也應用純水機制水。高壓消毒滅菌效果好，但耗水、耗時、耗電，用水有限；制水機制無菌水取水方便，又省電，效果如何值得注意。為了實驗動物飲水安全，筆者對MN-LM-50J實驗動物飲用水機所制無菌水與高壓滅菌水進行了對比實驗。

1 材料與方法

1.1 實驗動物飲用水機

實驗動物飲用水機型號MN-LM-50J，生產單位：北京木牛流馬有限公司。實驗動物飲用水機放置在屏障系統外，與屏障系統內以水管連接，屏障系統內有一出水龍頭，供屏障內使用。

1.2 高壓滅菌水

高壓滅菌水經121℃、30 min高壓滅菌進入屏障環境內，供屏障環境內實驗動物飲用或使用。

1.3 培養基

營養瓊脂培養基，北京雙旋微生物培養基制品廠，批號20080302；硫乙醇酸鹽流體培養基，北京雙旋微生物培養基制品廠，批號20080516；營養肉湯培養基，杭州天和微生物試劑有限公司，批號20080105。

1.4 水樣的采集[1]

1.4.1 飲用水機水樣的采集 無菌操作，在屏障內用酒精擦拭消毒實驗動物飲用水機龍頭，再將水龍頭打開，放水5 min后，用滅菌的三角燒瓶采集水樣，密封備用。

1.4.2 高壓滅菌水樣的采集 無菌操作，將屏障內高壓滅菌水用酒精擦拭瓶口消毒，倒入已滅菌的三角燒瓶內，密封備用。

1.5 實驗動物飲用水機水和高壓滅菌水檢驗[2]

在超凈臺內用滅菌吸管分別吸取實驗動物飲用水機水和高壓滅菌水各1 ml檢樣，分別接種于肉湯培養基和硫乙醇酸鹽液體培養基上。37℃培養48 h，進行需氧菌和厭氧菌的檢驗。

1.6 細菌總數的測定

在超凈臺內無菌操作用，將滅菌吸管分別吸取實驗動物飲用水機水及高壓滅菌水各1 ml，注入無菌平皿中，再傾注約15 ml置45℃左右的營養瓊脂培養基中，立即旋搖平皿使檢樣與培養基充分混勻。每個檢樣2個平皿。于37℃培養24 h后計數。

2 結果

無菌檢驗及細菌總數檢驗結果：實驗動物飲用水機制水在營養肉湯培養基、硫乙醇酸鹽流體培養基經過48 h培養，結果均呈陽性；高壓滅菌水均呈陰性，見表1。實驗動物飲用水機制水在營養瓊脂培養基培養24 h菌落數和高壓滅菌水菌落數見表2。

表1實驗動物飲用水機水與高壓滅菌水無菌檢查對比觀察Tab.1 Observation of experimentals animals drinking water machine water and autoclave sterility test

3 討論

雷培琪等[3]報道機制純水效果好，能達到屏障系統動物飲用的無菌水的要求，但通過本對比實驗，MN-LM-50J實驗動物飲用水機所制飲用水并不能達到無菌效果；而高壓滅菌水能達到無菌要求，即使存放在儲水桶內7 d仍未檢出菌落。通過對比實驗，筆者認為實驗動物飲用水采用高壓滅菌水更為安全，建議不能盲目使用機制飲用水，要注意機制飲用水機型及制水質量[4]，做好對比實驗后再使用。

表2 實驗動物飲用水機水與高壓滅菌水細菌總數對比觀察Tab.2 Observation of the experimental animals drinking water and autoclave machine water of total bacteria ratio

[1]楊履渭.微生物學及檢驗技術——水的衛生細菌學檢驗[M].廣州:廣東人民出版社,1985:477-480.

[2]國標GB/T5750-5750.13-2006生活飲用水標準檢驗方法[S].北京:中國標準出版社,2006.

[3]雷培琪,曾曉蘭,夏介英.實驗動物飲用純水機制無菌水的效果觀察[J].實驗動物科學,2009,26(1):63-64.

[4]趙明海,張瀟,譚德講,等.實驗動物飲用水質量控制及處理方式的一些探討[J].實驗動物科學,2008,25(1):58-63.